Приготовление насыщенных растворов флотантов

Для приготовления насыщенных растворов можно применять как химически чистую соль, так и техническую селитру, используемую в ветеринарной практике, сельском хозяйстве.

Раствор натрия нитрата (NaNO₃). В кастрюле или ведерке смешивают натрия нитрат (или любую другую соль) с водой в соотношении 1:1 (1 кг соли на 1 л воды) и подогревают ее до образования кристаллической пленки на поверхности раствора. Затем раствор охлаждают, измеряют денситометром его плотность (должна быть не ниже 1,38-1,4). При охлаждении насыщенного раствора на дно сосуда должны выпадать кристаллы соли.

Раствор свинца нитрата [Pb(NO₃)₂]. Готовят раствор плотностью 1,5 (обладает высокой флотационной способностью). Берут 650 г вещества на 1 л воды. Соль растворяют в горячей воде в эмалированном ведре. Ее кладут в ведро с горячей водой порциями, подогревая содержимое ведра на электроплитке и постоянно перемешивая до полного растворения. Фильтровать раствор необязательно. Раствор свинца нитрата со временем дает осадок. В связи с этим его плотность уже через 24 ч после приготовления несколько падает. Поэтому раствор готовят в день исследования. Если же он приготовлен в большом количестве, то в последующие дни перед исследованием его подогревают, размешивая осадок. Свинца нитрат – соль тяжелого металла, поэтому при работе соблюдают осторожность, избегая попадания вещества исследующему внутрь.

Раствор Брудастова: натриевая селитра 900 г, калиевая селитра 400 г, вода 1000 мл. После подогревания и растворения солей плотность раствора достигает 1,47-1,48, через 24 ч она падает до 1,4-1,42, поэтому его следует готовить перед исследованием.

Раствор аммония нитрата (NH₄NO₃) – гранулированной или обычной аммиачной селитры плотностью 1,3 – делают так же, как и предыдущий, но из расчета 1500 г вещества на 1 л воды.

Раствор цинка сульфата (ZnSO₄×7H₂O) плотностью 1,24 готовят из расчета 400г соли на 1 л воды.

Раствор натрия тиосульфата (натрия гипосульфита, Na₂S₂O₃×5H₂O) плотностью 1,4 готовят из расчета 1750 г вещества на 1 л воды, а магния сульфата, или английской соли (MgSO₄), плотностью 1,26-1,28 – из расчета 920 г вещества на 1 л воды.

Раствор цинка хлорида (ZnCl₂) плотностью 1,82 готовят в эмалированной посуде, растворяя в 1 л горячей воды 2 кг вещества (соль быстро растворяется при помешивании). Остывший раствор не кристаллизуется.

Для исследования берут соскоб – 15-25 г материала с поверхности объекта и применяют те же методические приемы, что и при обработке почвы. Соскобы делают в разных местах пола по двум диагоналям. Расстояние между местами взятия соскобов – не более 5 см. Соскобы, произведенные в одном помещении, соединяют в 1 пробу и перемешивают.

В США для выявления яиц токсокар собак из проб почвы применяют флотационный метод, используя при этом раствор цинка сульфата и насыщенный раствор магния сульфата в смеси с 5% раствором калия йодата.

К ингредиентам при индексации гельминтов и простейших в смывах методом микроскопирования относятся:

- 2% раствор Люголя: 1 г кристаллического йода + 2 г KI, растворяют в 100 мл дистиллированной воды, выдерживают в термостате при температуре 37⁰С в течение 3-х суток, после чего используют в работе.

- 2% водный раствор формалина: 1 часть продажного 40% формальдегида растворяют в 20 частях дистиллированной воды.

Отбор проб смывов с внешних объектов транспорта и его инфраструктур для определения яиц гельминтов производится в стерильные 20 мл пробирки, содержащие тампон с 10 мл флотанта. Пробы доставляются в лабораторию. После отжатия ватно-марлевого тампона в растворе флотанта (10 мл) весь полученный смыв центрифугируют в пробирке емкостью 10 мл в течение 5 минут при 1500 оборотов в минуту. Надосадочную жидкость сливают, осадок ресуспендируют в 6-8 мл 2% водного раствора формалина. Суспензию вновь центрифугируют в прежнем режиме, а надосадочную жидкость сливают, к осадку добавляют 3 мл одного из флотантов (предпочтительнее 33% водный раствор семиводного сульфата цинка). Центрифугируют 5 минут при 2000 оборотов в минуту, после чего надосадочную жидкость переливают в центрифужную пробирку. Разбавляют 4 раза дистиллированной водой, центрифугируют в прежнем режиме, удаляют надосадочную жидкость, а из осадка готовят препарат на предметных стеклах. В зависимости от задачи исследования препарат либо не окрашивают, либо подвергают окраске.

Если нужно произвести подсчет паразитарных агентов без определения их жизнеспособности или требует визуального определения жизнеспособности цист кишечных простейших, препарат не окрашивают или его окрашивают 1 каплей 2% раствора Люголя.

Вероятную жизнеспособность цист лямблий можно определить, окрашивая препарат 1 каплей 1% водного раствора эозина. Готовые препараты накрывают покровным стеклом и микроскопируют с использованием 100-600 кратного увеличения (объективы 10-40, окуляры 10-15).

Оценка результатов исследования смывов: при микроскопировании подсчитывается число паразитарных патогенов во всем объеме осадков, что соответствует числу во всей исследуемой пробе; пересчитывают на содержание их в 1 литре, одновременно определяется систематическая принадлежность обнаруживаемых паразитарных организмов; идентификацию проводят по соответствующим морфологическим признакам.