Биохим-кие методы исслед-я.

Использ-ся для диагностики бол-ней обмена в-в, прич-ной кот-х явл-ся изм-е акт-ти нек-х ферм-ов. С пом-щью биохим-х методов открыто более 500 молек-ных бол-ней, явл-ся следствием проявл-я мутантных генов. При разл-ных забол-ях удаётся опред-ть либо сам аномальный белок-фермент, либо промеж-е прод-ты обмена. Эти методы отлич-ся большой трудоёмкостью, требуют спец-го оборуд-я и потому не могут исп-ны для массовых исслед-ний с целью раннего выявл-я больных с насл-ной патологией. Для массовых иссл-ний применяютяся скрининг-программы. Для этого использ-ся экпресс-методы. Это первый этап. На втором этапе проводится уточн-е. Для этого исп-ся точные хроматографич-е методы опред-я ферм-тов, а.к-т и т. п.

ФКН.

Это б-нь, связ-ая с наруш-ем обмена а.к-т. Оно насл-ся по аутос-рец-му типу. В рез-те генной мутации имеется недостаток ферм-та, расщ-щее а.к-ту фенилаланин (фенилаланингидроксилазы). Частота 1/14000. В рез-те деф-та ферм-та возникает метаболич-й блок: а-к-та фенилаланин не усв-ся орг-мом. СХЕМА!!!

Наруш-ся и послед-щие звенья цепи р-ций, в ходе кот-х обр-ся тирозин, адреналин, норадр-лин, меланин. Неусвоившийся фенилаланин превр-ся в фенилпировин-ную к-ту, накапл-ся в крови и выд-ся с мочой. Оба эти в-ва в больших конц-циях в крови оказ-ют токсич-е возд-е на нервные кл-ки мозга. В рез-те возникает наруш-е ВНД, слабоумие, расстройство рег-ций двиг-х ф-ций. Слабая пигм-ция из-за наруш-я синтеза меланина.

Близнецовый. Позвол. оценить роль окр. ср. и генотипа на формир. фенотипа. Желат. использ. монозиг. близн-ов; т.к. они им. 1 генотип. 1-я-вые бл-цы появл. из 1 я/кл и 1 сп-да, но 1 зиг. при дел-нии даёт 2 эмбриона – 2 самост. плода – одинак. генотип.

Дизиготные – 2 я/кл + 2 сп-да. М.б. как 1-го, так и разн. полов. Однояйц. только однопол.! Был введён Ф. Гальтоном, кот-й выд-лил 1-яйц-х и 2-яйц-х близнецов. Конкорд-ть – это проявл-е признака у обоих близ-цов, это процент сх-ва по изуч-му призн-ку. Дискордантность – это отсутствие приз-ка у 1 из бл-цов. Этот метод исп-ся для оценки степени влияния насл-ти и среды на разв-е какого-либо нарм-го или патологич-го призн-ка. Для оценки роли насл-ти исполь-ся ф-ла: Н=(% сх-ва ОБ - % сх-ва ДБ)/100 - % сх-ва ДБ. Где Н – коэф-нт насл-ти, ОБ – 1-яйцевые бл-цы, ДБ – двуяйц-е бл-цы. При Н=1, приз-к полн-ю опред-ся наследст-ым компон-том, при Н=0, роль играет влияние среды. Коэф-нт, близкий к 0,5 – одинак-е влияние насл-ти и среды на формир-е признака. Напр-р шизофрения: конкорд-ть монозиг-х бол-цов = 70%, а дизиг-х = 13%, тогда Н=(70-13)/(100-13) = 0,65 или 65% след-но в привед-ном примере имеет место преобл-н насл-ти над влиянием среды. Др-й пример: насл-е гр крови: у монозиг-х близнецов совпад-ет в 100%, у дизиг-х в 45% случаев, т.е этот признак полн-тью опред-ся генотипом.

Популяц-нно-статистич-кий метод.

Объект исслед-я – популяция. Попул-я – это совокупность особей одного вида, длит-но нас-щих опред-е простр-во и своб-но скрещ-ся м.д собой. Вид сост-ит из популяций. Каждая попул-я им-т опред-й ареал, возрастной и пол-й состав, числ-ность особей в попул-ции может колеб-ся от неск-х сот до неск-х 1000. Чем меньше попул-ция, тем выше угроза её вымир-я или гибели от каких-либо случ-х причин. У чел-ка при рождении соотн-е мужск-го и женского полов сост-ет 106:100. К репродукт-му периоду (18 лет) это соонош-е = 100:100, к 50 годам = 100:85, а к 85 годам = 100:50. Важное св-во популяции – генетич-кий полиморфизм. Благ-ря ест-му отбору каждая локальная попу-ция приспособлена к тем усл-ям среды, где она обитает. Поп-ция хра-ся генетической разнородностью. Попул-но-статистичкий метод позволяет опред-ть ген-кую структуру попул-ций (соотнош-е м.д частотой гомозигот и гетерозигот). Новые возм-ти для пров-ния ген-кого анализа открывает прим-е эл-но-вычислит-ной техники. Знание ген-го сост-ва попл-ции нас-ния имеет большое знач-едля соц-ной гигиены и проф-кой мед-ны. По Н.П.Бочкову – «В ген-ка чел-ка попул-цией можно назвать гр-пу людей. Занимающих одну тер-рию и свободно вступ-их в брак. Границами, разделяющими людей от вступл-я в брак м.б геогафич-е, соц-е, религиозные и т.д. Крупные поп-ции чел-ка сост-ят не из 1, а из неск-их антропол-их групп, отлич-ся по происх-ю, и расселены они на большой тер-рии». Демы – это поп-ции, числ-ть кот-х не превыш-т 1500-4000 чел-к. Они хар-ся высокой частотой родств-х браков (80-90%). Изоляты – это ещё меньшие чел-кие поп-ции с числ-тью не более 1500 чел-к. Родств-е браки = 90%. Если изолят сущ-ет не менее 4-х покол-ий (ок-ло 100 лет), то все члены его явл-ся не менее чем троюродными братьями и сёстрами. Малые поп-ции имеют большую гомозиг-ть.

З-н Харди-Вайнберга (1908 г). Идеальная поп-ция д-на хар-ся след-ми особ-ми: бескон-но большой вел-ной, своб-ным скрещ-ем (панмиксия), отс-ем мут-ий по данному гену, отс-ем миграции в поп-цию и из неё, отс-ем отбора (по признаку, кодир-му данным геном). В идеальной поп-ции ссотн-ние генотипов домин-х гомозигот (АА), гетерозиго (Аа) и рец-ных гомозигот (аа) ост-ся пост-ным. Если частоту гена А обозн-ть ч.з р, а частоту гена а ч.з q, то q=1-р. В F₂ и след-их покол-ях частота генотипов АА, Аа и аа будет опред-ся по ф-ле бинома Ньютона: (p+q)² = p²+2pq+q², где р - % домин-х ал-лей, q - % рец-х ал-лей, p² – частота ген-па АА; 2рq – частота Аа (гетерозиготы), q² – частота генотипа аа (гомозиг-ты по рец-ву). р², 2рq, q² ост-ся пост-ми. Этим объясн-ся то, что для идеальной попул-ции особи с рец-ными признаками сохр-ся наряду с особями, несущ-ми домин-е признаки. Но в реально сущ-их попул-циях эти усл-вия невыполнимы: реальные поп-ции имеют огранич-ю числ-ть, панмиксия никогда не быв-ет абсолютной, происх-ят миграции особей и мут-ные проц-сы. Использ-е формул з-на Х-В позволяет рассчитать ген-кий состав попл-ции в данное время и орпед-ть возможные тенденции её изм-я. Используя з-н Х-В, можно вычислить насыщ-ть популяцийопред-мигенами, рассчитать число гетероз-го носительства у людей. Например, в опред-ном насел-ом пункте при обс-нии на резус-фактор оказались 16% лиц с р-с (-), а 84% с р-с (+). Изв-но, что + р-с фактор наслед-ся практич-ки моногенно по аутос-но-домин-му типу. Если ген р-с фак-ра обозначить С, то носители р-с фктора будут иметь г/т СС и Сс. Опред-им, какая часть гомо-, а какая гетерозиг-на. Из ф-лы (p+q)² = p²+2pq+q²=1 (или 100%). Гомозиг-ты по рец-ву изв-ны и = 16%, значит q²=0.16, q=0.40 (40%), т.е рец-вов = 40% Частота домин-ных аллелей: p+q=1, q=0.40, p=0.60, т.е поп-ции 60% домин-х аллелей. % СС и Сс = р²=(0,60)²=0,36 (36%) с г/т СС, 2pq = 2(0.60)*0.40 = 0.48 (48%) с г/т Сс. Итак, в исслед-ной гр людей, имевщих Rh+, было 36% с г/т СС и 48% с г/т Сс (всего 84%), а 16% Rh- (сс).