2. Определение групповой принадлежности крови по системе ав0 методом цоликлонов.

Цоликлоны - продукты гибридных клеточных линий, полученных в результате слияния мышиных антителообразующих В-лимфоцитов с клетками мышиной миеломы. Индивидуальные гибридные клеточные линии продуцируют гомогенные антитела только одного класса иммуноглобулинов, полностью идентичных по структуре и биологической активности. Антитела, продуцируемые клетками одного клона (потомство одной клетки), являются моноклональными.

Цоликлоны анти-А (аналог агглютинина альфа) и анти-В (аналог агглютинина бета) предназначены для определения групп крови человека вместо стандартных сывороток. Реагенты не должны храниться открытыми, так как при высыхании активность антител снижается; температура воздуха в помещении должна быть от 15 до 25º С.

ЦЕЛЬ: освоить методику определения групп крови по системе АВ0 методом цоликлонов.

ОСНАЩЕНИЕ: стерильные перчатки, цоликлоны анти-А (розовый цвет) и анти-В (голубой цвет), исследуемая кровь.

ХОД РАБОТЫ: наденьте перчатки. Нанесите на пластинку по одной капле (0,1 мл) реагентов анти-А и анти-В и рядом по одной капле крови (0,1 мл), которая в 10 раз меньше капли сыворотки.

Реактив и кровь тщательно перемешайте стеклянными палочками. Наблюдение за ходом реакции проводите при легком покачивании пластинки в течение 2-5 минут. При положительном результате - агглютинация эритроцитов; при отрицательном результате капля - равномерно окрашена в красный цвет, агглютинаты не обнаруживаются.

Группа крови	цоликлон анти-А	цоликлон анти-В
0(I) ab	-	-
A(II)b	+	-
B(III)a	-	+
АВ (IV) -	+	+

Оценка результатов:

цоликлон анти-А	цоликлон анти-В	Вывод:
		эритроциты исследуемой крови относятся к группе

3.Определение резус-принадлежности крови методом стандартных цоликлонов.

ЦЕЛЬ: освоить методику определения резус-принадлежности крови.

ОСНАЩЕНИЕ: стерильные перчатки, вата, тарелка, стеклянная палочка, пипетки, физиологический раствор, спирт, стандартный цоликлон анти-D, кровь донорская.

ХОД РАБОТЫ: нанесите на сухое стекло каплю стандартного цоликлона анти-D, затем в 10 раз меньшую каплю исследуемой крови, смешайте. При комнатной температуре чётко выраженная агглютинация наступает через 30 – 60 секунд. При наличии агглютинации кровь считают резус-положительной (Rh+), а при отсутствии - резус-отрицательной (Rh-).

Оценка результатов:

Цоликлон анти-D супер	Вывод о резус-принадлежности исследуемой крови

4. Определение индивидуальной совместимости крови донора и реципиента по системе ав0.

ЦЕЛЬ: ознакомиться с методикой.

ОСНАЩЕНИЕ: сыворотка реципиента, кровь донора, физиологический раствор, тарелка, стеклянные палочки.

ХОД РАБОТЫ: на тарелку наносят каплю - сыворотки реципиента, рядом (в 10 раз меньшую каплю) - крови донора; перемешивают стеклянной палочкой 4-5 минут, добавляют 2-3 капли физиологического раствора для исключения ложной агглютинации. Наличие агглютинации указывает на несовместимость крови донора и реципиента.