- •Міністерство освіти і науки україни національний університет харчових технологій
- •Методи контролю біотехнологічних, фармацевтичних і харчових виробництв лабораторний практикум
- •Київ нухт 2014
- •Інструкція з охорони праці при проведенні робіт у навчальних лабораторіях кафедри
- •1. Загальні вимоги до техніки безпеки
- •2. Правила техніки безпеки
- •3. Вимоги безпеки у аварійних ситуаціях
- •4. Надання першої допомоги
- •5. Вимоги до оформлення лабораторних робіт
- •Лабораторна робота 1 розділення амінокислот методом тшх на силуфолових пластинках
- •Реактиви
- •Матеріали та обладнання
- •Загальні відомості
- •Хід роботи
- •Завдання для виконання
- •Контрольні запитання
- •Матеріали та обладнання
- •Загальні відомості
- •Хід роботи
- •Завдання для виконання
- •Контрольні запитання
- •Хід роботи
- •Завдання для виконання
- •Контрольні запитання
- •Розчинність речовин у воді при різних температурах (г/100 г h2o)
- •Залежність густини і концентрації розчинів NaCl від температури
- •Густина речовин
- •Залежність густини розчинів h2so4 від її масової долі у водному розчині при 25 °c
- •Хід роботи
- •Густина розчинів NaCl та kCl в г/см3, що відповідає різним концентраціям у %
- •Завдання на виконання
- •Контрольні запитання
- •Рекомендована література
- •Хід роботи
- •Завдання на виконання:
- •Контрольні запитання
- •Матеріали та обладнання
- •Загальні відомості
- •Закон Бугера – Ламберта – Бера. При прохожденні випромінення через розчин світлопоглинаючої речовини світловий потік слабшає.
- •Фотометричні методи аналізу
- •Залежність кольору речовини від довжини хвилі поглинутого світла
- •Приготування робочих розчинів для побудови калібрувальної кривої
- •Хід роботи
- •Завдання для виконання
- •Контрольні запитання
- •Рекомендована література
- •Матеріали та обладнання
- •Загальні відомості
- •Методом Лоурі
- •Хід роботи
- •Завдання для виконання
- •Контрольні запитання
- •Рекомендована література
- •Лабораторна робота 8
- •Коефіцієнт молярної екстинкції деяких цитохромів
- •Хід роботи
- •Завдання для виконання
- •Контрольні запитання
- •3. Методи генної інженерії.
- •Рекомендована література
Завдання для виконання
1. Ознайомитися з правилами роботи в лабораторії та технікою безпеки.
2. Підготувати силуфолову пластинку до хроматографії (відмітити лінію старту та точки 1, 2, 3, 4). Підписати.
3. Нанести розчини відомих амінокислот на точки 1, 2, 3 та розчин суміші невідомих амінокислот на точку 4.
4. Розмістити пластинку в камері з розчинником.
5. Записати час початку і закінчення хроматографії.
6. Визначити тривалість хроматографії.
7. Висушити хроматограму.
8. Проявити хроматограму.
9. Ідентифікувати плями амінокислот виявлені на силуфоловій пластинці та обвести кожну пляму олівцем.
10. Визначити амінокислоти, що входили до складу невідомої суміші.
11. Вирахувати хроматографічну рухомість (Rf ) окремих плям
амінокислот.
12. Оформити протокол заняття, зробити висновок (написати назву амінокислот в складі невідомої суміші, визначити Rf кожної амінокислоти невідомої суміші, час хроматографії). Один член бригади вклеює пластинку в зошит, інші – замальовують пластинку з плямами відомих амінокислот та невідомої суміші.
Контрольні запитання
1. Дати визначення терміну "хроматографія".
2. Хто вперше описав цей метод.
3. Що таке елюент, елюат.
4. Класифікація хроматографічних методів.
5. Що таке хроматографічна рухомість, як її визначають.
6. Тонкошарова хроматографія на силуфоловій пластинці.
7. Що таке силуфолова пластинка.
8. Рухома і нерухома фази в даному методі.
9. Яке співвідношення розчинників використовується в даній роботі.
10. Як і чим проявляють плями амінокислот.
РЕКОМЕНДОВАНА ЛІТЕРАТУРА
1. Лисенко, О.М. Вступ до хроматографічного аналізу. Навчальний посібник / О.М. Лисенко, Б.Й. Набиванець.- К.: Корвін Пресс, 2005. - 187 с.
2. Бёккер, Ю. Хроматография. Инструментальная аналитика: Методы хроматографии и капиллярного электрофореза / Ю.Бёккер. - М.: Техносфера, 2009.- 470 с.
ЛАБОРАТОРНА РОБОТА 2
КІЛЬКІСНЕ ВИЗНАЧЕННЯ АМІНОКИСЛОТ МЕТОДОМ РОЗПОДІЛЬНОЇ ХРОМАТОГРАФІЇ НА ПАПЕРІ
Мета роботи: Вивчити хроматографічний метод кількісного визначення амінокислот з використанням розподільної хроматографії на папері.
План
1. Кількісне визначення амінокислот методом розподільної хроматографії на папері.
2. Види розподільної хроматографії на папері.
3. Нерухома фаза в розподільної хроматографії на папері.
4. Види хроматографічного паперу.
5. Принцип методу кількісного визначення амінокислот в розподільній хроматографії на папері.
Реактиви
Стандартні 0,01 М розчини амінокислот (кількість кожної амінокислоти, що відповідає 0,01 М розчину, зважують на аналітичних терезах і розчиняють в 0,01 н розчині соляної кислоти).
0,5% -й розчин нінгідрину в ацетоні (95 частин 0,5%-го розчину нінгідрину в ацетоні, 1 частина льодяної оцтової кислоти і 4 частини води змішують безпосередньо перед визначенням).
0,005%-й розчин CuSO45H2O в 75%-му етиловому спирті (5 мг сульфату міді розчиняють в 22 мл води і обєм доводять 96%-м спиртом до 100 мл).
96%-й етиловий спирт.
Матеріали та обладнання
Листок хроматографічного паперу (10 х 10 см), дозатори з наконечниками, кювета з розчином нінгидрину в ацетоні, пробірки скляні зі штативом, витяжна шафа, термостат з t = 600 С, термостат з кімнатною температурою, ФЕК з довжиною хвилі 540 нм (зелений світлофільтр), кювети 5 мм, лінійка, олівець, ножиці.