Биотехнология природного альфа-интерферона и лекарственные формы на

В связи с этим твердый кондитерский жир нами был заменен на суппозиторную липофильную основу, обладающую длительным сроком хранения (3 года), витепсол (Н-15, W-35). Витепсол представляет собой смесь три-, ди- и моноглицеридов и насыщенных жирных кислот ряда С10Í20Î2 äî Ñ18Í36Î2 из кокосового и пальмового масел и согласно техническим условиям обладает достаточной твердостью, высокой температурой застывания, что обусловливает быстрое формирование суппозиториев.

Для обеспечения необходимых структурно-механических свойств

èравномерного распределения ИФН в суппозиторной основе мы использовали эмульгаторы. От применения эмульгатора Т-2 отказались ввиду ранее изложенных недостатков. При использовании эмульгатора МГД в соотношении 0,5 % от массы основы температура плавления суппозиториев не возрастает, а его структурно-механические свойства оптимизируют процесс фасовки суппозиториев с ИФН, поскольку не происходит отме- ченный при использовании первой композиции процесс расплавления.

Кроме того, данные по изучению экспериментально изготовленных серий суппозиториев, приготовленных на основе витепсолов двух видов – Н-15 и W-5 в различных вариантах показали, что лучшими по структур- но-механическим свойствам являются суппозитории, в которых витепсолы Н-15 и W-35 взяты в соотношении 1:1. Сравнительные данные по оценке физических свойств и специфической активности суппозиториев с ИФН, приготовленных на различных липофильных основах, представлены в табл. 14.

При оценке суппозиториев с ИФН, изготовленных на основе твердого кондитерского жира, отмечается расплавление их во время фасовки

èснижение активности ИФН в ходе эксперимента (срок наблюдения 27 мес). Аналогичные результаты наблюдались в случае добавления в жировую основу 1-го варианта парафина. Использование жировых основ витепсола марки Н-15, W35- в различных соотношениях соответствует регламентированным требованиям, однако по внешним данным отмечается хрупкость данных суппозиториев. Наиболее оптимальной являлась основа обеих марок витепсола в соотношении 1:1, которая не только сохраняет уровень противовирусной активности ИФН в указанной лекарственной форме в процессе хранения (срок наблюдения – 27 мес), но и обеспечивает стабильность физических свойств суппозиториев во время фасовки и длительного хранения.

71

На основе полученных нами данных было изготовлено 20 серий препарата «Свеферон». Сравнительная оценка пяти серий препарата «Свеферон» (серии 52 –56), изготовленных на основе витепсола марок Н-15 и W-35, использованных в соотношении 1:1, и суппозиториев серий 27, 28, 31, 33, 36, изготовленных на основе твердого кондитерского жира с эмульгатором Т-2, представлена в табл. 15. Как видно из полученных данных, в процессе хранения суппозиториев с ИФН, изготовленных на основе твердого кондитерского жира с эмульгатором Т-2, свыше срока годности (12 месяцев), отмечаются статистически достоверные различия между исходными показателями качественных характеристик через 27 мес. наблюдения по следующим параметрам: времени полной деформации (распадаемости), средней массы суппозиториев (рис. 7). Результаты исследований по оценке стабильности

Ò à á ë è ö à 1 4

Сравнительная характеристика показателей качества суппозиториев с ИФН, приготовленных с использованием различных липофильных основ, в процессе хранения

72

Î ê î í ÷ à í è å ò à á ë . 1 4

свойств суппозиториев с ИФН, приготовленных на основе витепсола, показали, что разработанная нами усовершенствованная технология получения суппозиториев с ИФН характеризуется высокой воспроизводимостью и позволяет получать препарат со стабильными качественными характеристиками (срок хранения 27 мес. – срок наблюдения).

Рис. 7. Прибор для контроля времени распадаемости суппозиторив

73

Ï ð î ä î ë æ å í è å ò à á ë . 1 5

75

4.2.Совершенствование методики экстрагирования интерферона из липофильных основ мягких

лекарственных форм интерферона для контроля противовирусной активности

Цель данных исследований – разработка способа определения противовирусной активности ИФН в мягких лекарственных формах, изготовленных на липофильных основах.

Известен способ определения содержания ИФН в мази, включающий обработку е¸ липазой с последующим определением активности ИФН путем выявления противовирусной активности на клеточных культурах. Недостатком данного способа является низкая чувствительность. Описан также метод определения противовирусной активности ИФН в мягких лекарственных формах путем экстрагирования ИФН из лекарственной формы дистиллированной водой с использованием тест-вируса [19]. Использование данного способа только для гидрофильных основ и малый процент выхода ИФН из мягких лекарственных форм, изготовленных на гидрофобных основах, являются его недостатками.

Нами был изучен ряд растворителей, таких как эфир для наркоза, гексан, среда 199, дистиллированная вода с учетом временного параметра экстракции специфической составляющей. Полученные результаты представлены в табл. 16. Исследовали образцы 20 серий препарата «Свеферон». Для сравнения использовали н-гексан, с помощью которого эффективно экстрагировали ИФН из суппозиториев на основе твердого кондитерского жира.

Установлено, что наибольший выход ИФН из суппозиториев отме- чается при растворении их н-гексаном с последующим экстрагированием ИФН 0,9 % раствором натрия хлорида в течение 120 мин. Указанный метод позволял выявить 39200 МЕ/свечу при исходной активности 40000 МЕ/свече. На рис. 8 представлены данные, которые позволяют сделать вывод о целесообразности использования н-гексана в сочетании с 0,9 % раствором натрия хлорида. Применение данного органического растворителя обеспечивает практически полное (98 %) извлечение ИФН из лекарственной формы.

Предлагаемый метод опробован и одобрен в ГИСК им. Л.А. Тарасеви- ча, а также утверждена нормативно-техническая документация на препарат «Интерферон лейкоцитарный человеческий суппозитории "Свеферон"» (ФСП 42 0028205101 от 20 марта 2002 г.) в качестве метода контроля специфической активности суппозиториев с ИФН.

79

Ò à á ë è ö à 1 6

Оценка эффективности использования различных растворителей для определения противовирусной активности интерферона

в суппозиториях на липофильной основе

80