семиотика++для+студов+20г
.pdf
Мутации, выявляемые с помощью чипов для CGH
Делеции и дупликации от 200 п.н. (oligo) и от 1
Mb (BAC)
Анеуплоидии
Мозаичный анеуплоидный кариотип (min уровень
аномального клона -10%)
Моногенные делеции и дупликации
Сравнительная геномная гибридизация (CGH)
ДНК |
Контрольная |
|
Пациента |
ДНК |
Цифровой анализ изображения |
|
||
|
|
11q13 |
|
|
амплифика |
11q13
амплификациятерминальная 11q делеция
делецияамплификацияПациент Контроль DAPI
Спектроскопический анализ хромосом
(SKY)
Используются флюоресцентные красители, имеющие сродство к определенным участкам хр -м
Набор специфических зондов с разными красителями
Каждая пара хромосом имеет уникальные спектральные характеристики
Аппарат интерферометр для спектрального анализа
Компьютерная обработка результатов
Результат в виде цветового изображения в цифровой форме
Гомологичные хромосомы – одного цвета, перестройки – незначительные изменения
спектра
Микроцитогенетические синдромы - это группа наследственных заболеваний, обусловленных микроструктурными
перестройками в хромосомах (делеции или
дупликации, размер которых не превышает
3-5 млн п.н., невидимы при обычном кариотипировании, выявляются с помощью молекулярных или молекулярно цитогенетических методов)
Нейроповеденческий синдром - расстройство развития, включающее специфические отклонения в
формировании неврологических и психических функций с формированием особого, иногда патогномоничного комплекса психических и
неврологических расстройств
ВПР/МПВР/МАР, и/или
Задержка психоречевого |
|
развития/умственная отсталость |
и/или |
Поведенческие расстройства/расстройства
аутистического спектра
Технология ВACs-on-Beads
(Таргетное молекулярное кариотипирование Prenatal BoBs)
1. ДНК пациента и контроля метятся
флуоресцентными красителями
2. ДНК гибридизуют на шариках с нанесенными BAC
клонами в суспензии, в лунке планшета
3. На анализаторе Люминекс считывается сигнал
флуоресценции. Сигнал количественно
оценивается, соответственно количеству копий ДНК
4. Сигнал флуоресценции от образца пациента
сопоставляется с сигналом флуоресценции от
контрольного образца
5. Результаты визуализируются и интерпретируются
Всего 88 пробандов МЦС (n=88) BACs-on-Beads
Выявлено в КДЦ «ОЗМР» за период 2012-2015гг – 60 случаев В том числе пренатально - 6
С. Прадера-Вилли/ |
17/ |
Ангельмана |
5 |
С. Вильямса |
12 |
|
|
С. ДиДжорджи |
19 |
С. Смита-Магениса |
1 |
С. Миллера-Дикера |
1 |
С. Хиршхорна-Вольфа |
2 |
С. «крика кошки» |
3 |
|
|
|
|
группа методов, предназначенных для выявления вариаций в структуре исследуемого участка ДНК (аллеля, гена, региона хромосомы) вплоть до расшифровки первичной
последовательности оснований
1.Получение образцов ДНК (или РНК) - выделение всей ДНК
(тотальной или геномной) из клеток или накопление определенных фрагментов с помощью ПЦР Источник ДНК - любые ядросодержащие клетки
2. Рестрикция ДНК на фрагменты, осуществляется рестриктазами,
относящимися к группе бактериальных эндонуклеаз
3. Электрофорез фрагментов ДНК
обеспечивает разделение
их и распределении на поверхности агарозного или
полиакриламидного геля
4. Визуализация и идентификация фрагментов
ДНК-диагностика моногенных заболеваний
Изучает непосредственную причину заболевания
Наиболее адекватная и точная диагностика
Возможна даже в тех случаях, когда неизвестен ген,
ответственный за заболевание
ДНК-ДИАГНОСТИКА
ПОДТВЕРЖДАЮЩАЯ
ПРЕСИМПТОМАТИЧЕСКАЯ
ГЕТЕРОЗИГОТНОГО НОСИТЕЛЬСТВА
ПРЕНАТАЛЬНАЯ