семиотика++для+студов+20г
.pdf
ПРАВИТЕЛЬСТВО СВЕРДЛОВСКОЙ ОБЛАСТИ МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ
СВЕРДЛОВСКОЙ ОБЛАСТИ
от 02.03.12 г. № 166-п
ПРИКАЗ
г. Екатеринбург
О совершенствовании массового обследования новорожденных детей на наследственные
заболевания на территории Свердловской области
Спектр скринируемых заболеваний:
фенилкетонурия
врожденный
гипотиреоз
муковисцидоз
адреногенитиальный
синдром
галактоземия
лейциноз
множественная карбоксилазная недостаточность
глютаровая ацидурия I типа
изовалериановая ацидемия
тирозинемия I типа
метилмалоновая ацидемия
пропионовая ацидемия
цитруллинемия
недостаточность среднецепочечной ацил-коэнзимА-дегидрогеназы
недостаточность трифункционального белка
недостаточность очень длинноцепочечной ацил-коэнзимА- дегидрогеназы
Результаты неонатального скрининга методом ТМС (2011-2013)
Обследовано |
113732 |
Группа риска |
|
1,2% |
(рет ест ) |
|
|
|
|
|
Выявлено |
22 – ФКУ |
|
|
1 |
- глютаровая ацидурия I типа |
|
1 |
– лейциноз |
|
1 |
- пропионовая ацидемия |
|
1- недостаточность трифункционального белка |
|
|
1- недостаточность среднецепочечной ацил- |
|
|
коэнзимА-дегидрогеназы |
|
|
|
|
ПРАВИТЕЛЬСТВО СВЕРДЛОВСКОЙ ОБЛАСТИ МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ
СВЕРДЛОВСКОЙ ОБЛАСТИ
ПРИКАЗ г. Екатеринбург
10.11.2015 |
№ 1769 –п |
О диагност ике наследст венных болезней обмена вещест в у дет ей мет одом т андемной масс-спект ромет рии на
территории Свердловской област и
Перечень НБО, подлежащих ТМС ( аминоацидопатии, органические ацидурии, дефекты м/х бета-окисления ЖК)
Показания для направления детей Протокол обследования детей
Форма бланка для направления на лабораторное исследование Форма бланка результата исследования методом ТМС
Цитогенетические методы исследования
Микроскопические методы с 19 века
(термин цитогенетика ввел Саттон в
1903 г.)
Стали широко использоваться с начала 20-х годов XX в.
Изучение морфологии и подсчета хромосом человека - путем культивирования лейкоцитов для получения метафазных пластинок
Первое главное условие диагностики - наличие делящихся клеток в цитологическом препарате
Метод цитогенетического исследования
(кариотипирование)
Взятие венозной крови 1-2 мл (лимфоциты периферической крови)
Культивирование клеток 48 – 72 часа
Применение в качестве митогена (стимулятора клеточного деления) выделенного из семян фасоли мукополисахарида фитогемагглютинина (ФГА)
Использование колхицина (колцемида) - ингибитора образования
митотического веретена, останавливает деление клеток на стадии метафазы
Гипотонический шок - раствор солей калия или натрия, вследствие разницы осмотического давления вызывают их набухание и разрыв межхромосомных связей
Фиксация клеток с использованием ледяной уксусной кислоты и этанола (метанола) в соотношении 3:1 (фиксатор Карнуа), способствует сохранению структуры хромосом
Окрашивание
Собственно микроскопия с компьютерной обработкой
FISH – флуоресцентная гибридизация in situ
FISH - метод флуоресцентного окрашивания отдельных участков или целых хромосом, основанный на способности хромосомной ДНК образовывать устойчивые гибридные молекулы с ДНК(РНК)- зондами на препаратах фиксированных клеток
Метод позволяет определить местоположение последовательности ДНК или РНК в клетке, клеточном ядре или на хромосомах
FISH – возможности метода
FISH позволяет выявлять:
-Анеуплоидии
-Делеции
-Инсерции
-Транслокации
-Амплификации
генов
-Микроделеции
mFISH
Сравнительная геномная гибридизация (CGH)
Comparative Genomic Hybridization
На микрочипах (array)
Используется для картирования и клонирования генов вовлеченных в канцерогенез
Определение районов хромосом, которые делетируются или амплифицируются в определенном типе опухоли
Районы делеции – супрессоры опухолевого
роста
Районы амплификации – содержат онкогены
Компьютерный анализ хромосом
