+ [O2NN+ N ]Cl -

O

O2NN N N NNO2 + HCl

Метилэтилкетон дает моноазокраситель красного цвета.

Рассмотренный метод применяют для определения кислот, альдегидов, нитросоединений, спиртов и др.

Реагенты находят применение в органической химии, особенно в тех случаях, когда необходимо обнаружить и количественно определить микропримеси веществ; в промышленной санитарии (определение вредных соединений, отравляющих веществ в воздухе), в биологии.

1.2.5. Практические работы

Работа 1. Определение хрома дифенилкарбазидным методом

Принцип определения основан на том, что бихромат калия, имеющий низкий коэффициент ослабления (≈500), окисляет в кислой среде дифенилкарбазид, превращая его в бис-азокраситель с коэффициентом ослабления около 104. Дифенилкарбазид, являющийся реагентом на хром, требуется брать в избытке по отношенияю к бихромату, поскольку необходимо, чтобы во взятой пробе весь бихромат провзаимодействовал с реагентом.

дифенилкарбазид бис-азокраситель

Азокраситель имеет фиолетово-красную окраску, его максимальное поглощение лежит в зеленой области спектра, что определяет выбор зеленого светофильтра.

26

Выполнение работы

Раствор дифенилкарбазида готовят перед употреблением, растворяя 0,1 г реагента в 15 мл ацетона в мерной колбе на 50 мл и доводят водой до метки.

Для построения калибровочной кривой отбирают из бюретки 1, 2, 3, 4 и 5 мл раствора бихромата калия с концентрацией 6,8 10-5 моль/л в колбочки на 50 мл, добавляют в каждую по 2 мл раствора дифенилкарбазида и по 2 мл серной кислоты с концентрацией 5 моль/л.

Растворы разбавляют дистиллированной водой, доводят до метки, тщательно перемешивают и измеряют оптические плотности.

Для измерения абсорбции вещества кюветы заполняют на 2/3 высоты, соответственно, раствором и растворителем (дистиллированная вода). Кюветы осушают снаружи фильтровальной бумагой и помещают в держатели для кювет. Не следует касаться пальцами стенок кюветы, сквозь которые проходят световые лучи.

Результаты измерения абсорбции растворов заносят в таблицу, где указывают рассчитанную концентрацию бихромата калия в каждой пробе, а затем строят калибровочную кривую. Получают анализируемую пробу в колбочке на 50 мл, добавляют, как прежде, серную кислоту, реагент, доводят колбу водой до метки и измеряют оптическую плотность. Концентрацию анализируемой пробы находят по калибровочной кривой.

Расчет концентрации производят по формуле:

Ск = Сб ½ Vб/Vк ,

где Ск, Сб – молярные концентрации (моль/л) в колбе и бюретке, соответсвенно; Vб – объем расвора, отобранного из бюретки; Vк – объем колбы.

Работа 2. Определение концентрации аминокислот спектрофотометрическим методом

Реактивы и посуда:

1)водный раствор тирозина, С = 2,92 10-4 моль/л,

2)водный раствор триптофана, С = 6,07 10-5 моль/л,

3)кварцевые кюветы (2 шт.),

4)спектрофотометр.

Выполнение работы

Кювету заполняют раствором аминокислоты (в кювету сравнения налить воду). Записывают спектр поглощения аминокислоты в области 200-350 нм и определяют расположение максимума поглощения. Разбавляя исходный раствор аминокислоты соответственно в 2, 4, 6, 8 и 10 раз, измеряют абсорбцию полученных растворов при максимуме поглощения. Строят кривую зависимости абсорбции растворов (при макси-

27