Лабораторная диагностика гнойно-воспалительных заболеваний (гвз)

Гнойно-воспалительные и гнойно-септические заболевания в последние десятилетия имеют тенденцию к росту. Роль многих микроорганизмов, ранее считавшихся слабопатогенными или непатогенными, а так же представителей нормальной микрофлоры неизменно возрастает как возбудителей гнойно-воспалительных заболеваний.

Характерным для современного периода является распространение так называемых внутрибольничных инфекций – заболеваний, возникновение которых связано с пребыванием в стационаре.

Возникла необходимость подразделять ГВЗ на внебольничные и внутрибольничные. Госпитальная инфекция характеризуется увеличением нозологических форм заболевания: наряду с традиционными инфекциями дыхательных путей, инфекциями мочевыводящих путей и др. появились пневмонии, связанные с искусственной вентиляцией легких, с инвазивными методами диагностики и лечения - катетеризации мочевыводящих путей, центральных сосудов, с применением имплантированных устройств.

Вопросы для разбора темы.

1. Этиология гнойно-воспалительных заболеваний

А) подразделение по родовому и видовому принципу

Б) по экологическим особенностям (истинные паразиты и патогены человека или человека и животных, представители нормальной микрофлоры, представители свободноживущих микроорганизмов.

2. Гетерогенность и изменчивость популяции условно-патогенных организмов

3.Факторы патогенности условно-патогенных бактерий (УПБ)

4. Многообразие форм патологического процесса, вызываемых УПБ

5. Отсутствие выраженной специфики гнойно-септических заболеваний в зависимости от видовой принадлежности микроба возбудителя.

6. Внебольничные и внутрибольничные гнойно-септические заболевания.

7. Определение внутрибольничной инфекции.

8. Причины характерного для настоящего времени резкого возрастания числа случаев ВБИ и усиление тяжести течения.

А) расширение видового состава бактерий, составляющих микробный пейзаж в стационарах.

Б) понятие о госпитальных штаммах микроорганизмов и причинах их формирования.

В) группы риска при ВБИ

Г) источники инфекции при её внутрибольничных формах. Понятия о резервуарах инфекции в стационаре

Д) пути распространения ВБИ. Аппаратный путь как один из наиболее важных в инфицировании групп риска.

9. Характер эпидемиологического процесса при ВБИ (вспышечный, спорадический)

Микробиологическое исследование крови

Сепсис - общее инфекционное заболевание, которое возникает чаще всего в связи с существованием в организме местного инфекционно-воспалительного процесса. Септический процесс может протекать по типу септицемии и септикопиемии.

Бактериемия - важнейший лабораторный критерий сепсиса – обычно развивается после инвазии лимфатической системы.

Септицемия характеризуется выраженными явлениями интоксикации организма без видимых локальных гнойно-воспалительных очагов.

Септикопиемия развивается с образованием пиемических очагов (абсцессы, флегмоны, пневмонии, менингиты, остеомиелиты и др.).

Течение сепсиса может быть острым (длительность 3-6 недель), подострым (1,5-3 месяца), затяжным (более 3 месяцев). По локализации входных ворот или первичного очага сепсис подразделяется на пупочный, кожный, легочный, кишечный, отогенный и др. Для внутрибольничного сепсиса характерна инфекция, связанная с инвазивными методами лечения и диагностики - катетеризацией центральных сосудов. По этиологическому принципу дифференцируют стафилококковый, стрептококковый, эшерихиозный и др. В нормальных условиях у здоровых людей кровь стерильна. В случае попадания микроорганизмов в кровяное русло в небольших количествах они быстро погибают в результате фагоцитоза и действия бактерицидных факторов крови. Высокие концентрации микроорганизмов в крови возможны при многих инфекционных заболеваниях после их размножения и преодоления барьера лимфатических узлов. Эту стадию заболевания принято называть фазой бактериемии.

Кровь микробиологическими методами исследуется:

- у больных с подозрением на септицемию,

- у больных с подозрением на септикопиемию,

- у больных с лихорадочным состоянием.

Забор крови рационально проводить на высоте подъема температуры при хроническом течении – в период обострения процесса до начала антибактериальной терапии или через 12-24 часа после последнего применения. Материал, со строгим соблюдением правил асептики, берется из локтевой вены в объеме 5-10мл с помощью шприца, быстро вносится в питательную среду и осторожно перемешивается. Посев производится в сахарный МПБ во флаконе в соотношении 1:10. Рекомендуется «двойная среда» из скошенного во флаконе 150 мл МПА и 150 полужидкой среды сахарной (1% глюкозы и 0,15 г агар-агара). Посев производится в жидкую часть среды. Ежедневно посев просматривается, смачивая поверхность агара, что исключает необходимость слепого высева на плотные среды.

Предполагая анаэробную инфекцию 15-20 мл крови помещается в большую, высокую пробирку среды Китта-Тароцци, а грибковую микрофлору – на жидкую среду Сабуро. Если кровь свернулась - делается посев раздельно сгустка и жидкой фазы. При транспортировке недопустимо смачивание пробки, охлаждение или действие прямых солнечных лучей. Посевы инкубируют в термостате до выделения микробной культуры: в связи с тем, что в некоторых случаях рост бактерий чрезвычайно замедлен, срок термостатной выдержки составляет 3-4 недели, после чего, если признаков роста не обнаруживается, выдается отрицательный результат. Для выявления роста периодически производят высевы на кровяной агар.

Во время третьего дня исследования изучают все типы выросших колоний, производят из них мазки, окрашивают по методу Грама, микроскопируют, высказывают предварительное суждение о выделяемых культурах и независимо от предположений каждую разновидность колоний пересевают на скошенный агар для накопления чистой культуры. Далее следует работа по идентификации выделенной культуры.

Причиной сепсиса или бактериемии, особенно у ослабленных больных, могут быть любые виды, в т.ч. условно-патогенные и даже сапрофитические. Они могут быть следствием контаминации крови в процессе взятия или случайного загрязнения посевов. Поэтому необходимо учесть, что S. epidemidis, Corynebacterium spp, Acinetobaсter calсoaceticus, Bacillus spp и др. входят в состав нормальной микрофлоры кожи или широко распространены во внешней среде. Причиной сепсиса они бывают, как правило, у людей со сниженным иммунным статусом. Выделение нескольких видов часто свидетельствует о технических погрешностях забора и посева, тем не менее, у ослабленных людей возможна микст-инфекция. Подтверждает этиологическую значимость неоднократное выделение из крови или одновременное из крови и других видов исследуемого материала, а также быстрое (через 24-48 часов) выделение возбудителя.

По данным ГНЦ РАМН этиологическая структура бактериемий следующая: