Донецкая Э.Г.-А., Зрячкин Н.И. Инфектология

––– 6. Новые инфекции –––

заболевания острое, отмечаются интоксикация, рвота, диарейный синдром, боль в животе.

Микробиологическая диагностика:

1)материал для исследования: фекалии, кровь;

2)методы исследования:

–основным методом обнаружения вируса является метод иммунной электронной микроскопии;

–радиоиммунологический тест в твердой фазе для выявления антигена вируса Norfolk и антител к ниму;

–для иммуноиндикации используют ОТ-ПЦР.

6.2.5. Микробиология инфекционных поражений, вызванных вирусами семейства Coronaviridae

Острый респираторный синдром – SARS.

ВозбудительотноситсяксемействуCoronaviridae, родуCoronavirus

(рис. 11).

Рис. 11. 3D-модель Coronavirus (https://ru.wikipedia.org/wiki/ %D0%9A%D0%BE%D1%80%D0%BE%D0%BD%D0%B0 %D0%B2%D0%B8%D1%80%D1%83%D1%81%D1%8B)

–– 171 ––

––– Инфектология –––

Структура. Вирус имеет округлую или сферическую форму, размер вириона колеблется от 50 до 200нм. Сердцевина вируса представляет геномом – РНК(+), однонитевая, нефрагментированная. Нуклеокапсид спирального типа симметрии окружен гликопротеидной оболочкой, снаружи переходящей в выросты с хрупкой шейкой и массивной головкой – пепломер. За счет большого количества пепломеров вирусная частица выглядит как солнечная корона. Имеется белок полимераза, кэп-связывающий белок, хеликаза, эндопротеаза.

Геном вириона кодируют следующие белки:

–М-мембранный белок, формирующий белково-липидную оболочку вируса;

–Е–малыйоболочечныйпротеин,входящийвсоставвируснойобо- лочки; делится на Е1 и Е2, которые отвечают за адсорбцию вируса на клетке и проникновение в клетку хозяина;

–S-гликопротеин, образующий шипы на поверхности вирусной частицы (структурный белок);

–С-конец, обладающий свойствами белка порина;

–N – нуклеокапсидный белок;

–гемагглютинин эстераза – поверхностный белок.

Антигенноестроениесложное.Антигенныедетерминантырасположены на пепломерах. У некоторых штаммов обнаружен гемагглютинин.

Культивирование. Коронавирусы плохо культивируются в лабораторных условиях, что затрудняет их выделение. Отдельные штаммы можнокультивироватьвкультуретканитрахеиэмбрионачеловека,другие в культуре ткани кишечника.

Репродукция. Процессы репликации происходят в цитоплазме клеток альвеолярного эпителия длительно. Сборка вириона осуществляется на эндоплазматическом ретикулуме. Вирион высвобождается через эндоплазматический ретикулум. Вирусная частица появляется через 6–15 часовпосле инфицирования. Оптимальная температура реплика-

ции 32–33 0С.

Резистентность. При 56 0С вирус выживает в течение 10–15 минут, при 50 0С – в течение часа. Устойчив к замораживанию и оттаиванию. При700Синижесохраняетсямноголетиинактивируетсяподдействием кислой и щелочной среды.

Эпидемиология:

1. Источник инфекции – больные люди. Вирус может выделяться уже в конце инкубационного периода.

–– 172 ––

––– 6. Новые инфекции –––

2.Пути передачи:

–воздушный (возможны вспышки внутрибольничной инфекции и развитие инфекции в многоэтажных домах (через вентиляционную систему));

–алиментарный (редко);

–водный (редко);

–контактный.

3.Восприимчивый коллектив. Восприимчивость низкая. В группу риска входят дети первого года жизни (особенно новорожденные),

атакже пожилые люди с хроническими заболеваниями. Этиопатогенез. Основными клетками-мишенями для SARS-вируса

являются клетки альвеолярного эпителия, в цитоплазме которых происходит их первичная репродукция. В дальнейшем осуществляется сборка вириона, который поступает внутрь цитоплазматических везикул, продвигается к мембране клетки и путем эндоцитоза переходит во внеклеточное пространство. Адсорбируясь на поверхности клеток, вирус способствует их слиянию и образованию синтициев. Это предопределяетбыстрое распространение вируса в ткани. При воздействии вируса происходит повышение проницаемости клеточной стенки, усиление транспорта жидкости в интерстициальную ткань легкого

ипросвет альвеол, что приводит к нарушению процессов газообмена. При тяжелом течении болезни развиваются острый респираторный дистресс-синдромитяжелаядыхательнаянедостаточность.Вэтовремя присоединяется бактериальная флора, что приводит к развитию пневмонии вирусно-бактериальной этиологии. Вирус поражает макрофаги

илимфоциты.

Клинические проявления. Начало болезни острое. Первыми симптомами являются озноб, головная боль, слабость в мышцах, лихорадка. У больных регистрируются кашель, насморк, боли в горле. Отмечается гиперемия слизистой оболочки нёба и задней стенки глотки.

Через5–7днейболезньможетпереходитьвовторуюфазу–респира- торную, которая характеризуется повторным повышением температуры, появлением упорного непродуктивного кашля, одышки.

Далее инфекция переходит в третью фазу – это фаза прогрессирующей дыхательной недостаточности. В этой фазе требуется проведение длительной искусственной вентиляции легких и часто наблюдается летальный исход.

–– 173 ––

––– Инфектология –––

Микробиологическая диагностика:

1)материалом для исследования служат отделяемое носоглотки, кровь, мокрота, биоптаты;

2)методы исследования основаны:

–на клинических критериях;

–рентгенологических критериях;

–выявлении антител против вируса SARS после 21 дня от начала болезни иммуноферментным методом (ELASA) – через 10 дней от начала болезни;

–использовании вирусологических методов при исследовании крови, фекалий, респираторных секретов;

–молекулярно-генетическом методе, который позволяет обнаружить специфические фрагменты РНК в биологических жидкостях и секретах.

6.2.6.Микробиология инфекционных поражений, вызванных вирусами семейства Retroviridae

6.2.6.1. ВИЧ-инфекция

ВИЧ-инфекция – хроническая антропонознаяинфекционная болезнь, которая характеризуется контактным механизмом передачи возбудителя, прогрессивным поражением иммунной системы, приводящим к развитию синдрома приобретенного иммунодефицита. Летальный исход наступает от присоединения оппортунистических бактериальных, грибковых, протозойных или онкологических заболеваний.

Возбудитель. Вирус относится к семейству Retroviridae, подсемей-

ству Lentiviridae, роду Lentivirus.

Структура. Возбудитель – РНК-геномный однонитевой вирус. Размер вириона 80–130 нм. Тип симметрии нуклеокапсида кубический. Вирусимеетсуперкапсиднуюоболочку,котораяпредставленадвойным слоем липидов клеточного (мембранного) происхождения. На поверхности суперкапсида расположены шипы гликопротеиновой природы. Сразу же под оболочкой расположен матриксный слой М-белка. Нуклеокапсид – это сердцевина вируса «соr». В его состав входит капсидный белок gp24. На внешней оболочке вируса имеются белки gр41 – белок

–– 174 ––

––– 6. Новые инфекции –––

слияния; gр120 – прикрепительный белок, белок 160. Внутри вируса расположены две идентичные нити РНК(+). Вирус имеет обратную транскриптазу, у РНК вируса на конце длинные концевые повороты

LTR.

Геном вируса иммунодефицита сложный. Он содержит три структурных гена

–gag кодирует капсидный, матриксный белки;

–pol отвечает за синтез обратной транскриптазы (ревертазы); РНК-азы; интегразы;

–env кодирует оболочечные гликопротеины: белок gp41, gp120 Кроме того, геном вируса содержит шесть регуляторных генов, ко-

дирующих неструктурные белки:

–tat – ген-регулятор, увеличивает активность структурных и регуляторных генов; усиливает синтез всех белков; повышает скорость репликации вируса;

–rev – регуляторный белок, активизирует процессы экспрессии структурных генов;

–vif – отвечает за синтез белка р23, который способствует заражению клеток, не имеющих CD4-рецептора;

–nef – негативный регулятор, угнетает активность всех генов;

–vpr и vpu-гены – регуляторные белки, принимают участие в репродукции вируса, недостаточно изучены.

Антигенное строение. Все структурныеи регуляторные белки виру-

са являются антигенами, которые присоединяются к клеткам, несущим CD4-рецепторы – это Т- и В-лимфоциты, макрофаги, промиелоциты, мегакариоциты, дендритные клетки, астроциты, эндотелий капилляров мозга, олигодендроциты, клетки эпидермиса кожи, клетки эндотелия шейки матки.

Культивирование. Вирус культивируют на культуре Т-лимфоци- тов и моноцитов крови. Культивируются на клеточных культурах ткани

Vero.

Репродукция. Сборка вирусной частицы происходит на внутренней стороне клеточной мембраны. Во время формирования вируса в него втягиваются две цепи РНК. Вирион отпочковывается от клетки, увлекая участки мембраны клетки хозяина. При активной репликации ВИЧ идет нарушение целостности мембраны и клетка гибнет.

Вирус иммунодефицита, попав в лимфоциты, использует клеточный аппарат для транскрипции своих генов и синтеза белка.

–– 175 ––

––– Инфектология –––

Резистентность. Вирус обладает высокой чувствительностью к воздействиюфактороввнешнейсреды.Нанегогубительнодействуютсолнечные лучи и искусственное ультрафиолетовое облучение. Нагревание до 56 0С резко снижает инфекционность вируса, при нагревании до 70 0С он инактивируется через 10 минут. Под воздействием ферментов слюны и пота вирус становится малоактивным. В крови, замороженной сыворотке, замороженной сперме вирус сохраняется от нескольких месяцев до нескольких лет (замороженная сыворотка).

Эпидемиология:

1)источником инфекции является человек в любой период болезни (с момента заражения до смерти);

2)пути передачи:

–половой (основной);

–парентеральный – при переливании крови;

–артифициальный – при проведении инвазивных медицинских манипуляций;

–трансплацентарный;

3)восприимчивый коллектив – восприимчивость людей высокая. Группа риска: наркоманы, люди с беспорядочными половыми свя-

зями.

Этиопатогенез: ВИЧ-1 имеет склонность к пандемическому распространению и является основным возбудителем ВИЧ-инфекции; ВИЧ-2–выявляетсяреже.Инфекции,имвызываемые,протекаютболее длительно и доброкачественно.

Редко встречающаяся разновидность – ВИЧ-3. Он отличается структурой генома, нуклеотидной последовательностью (от последовательности геномов ВИЧ-1 и ВИЧ-2). Последовательность концевого повтора (LTR) отличается на 30% от основной LTR ВИЧ-1 и более, чем на

50% от ВИЧ-2.

Другой разновидностью является ВИЧ-4. Вирус инфицирует Т-хел- перыуклиническиздоровыхлюдей,нонеубиваетих.Возбудительтакже выделен в группах повышенного риска по инфицированию.

В основе патогенеза ВИЧ-инфекции лежит поражение иммунокомпетентных клеток. Проникнув в организм с кровью, слюной, спермой, влагалищным отделяемым,вирус поражает основные клетки-мишени – СD4-лимфоциты. На первом этапе происходит адсорбция вируса на клетках, имеющих CD4-рецепторы, за счет присоединения gp120. Далее белок gp41 помогает вирусу проникнуть в клетку путем эндоцитоза

–– 176 ––

––– Инфектология –––

пищевода; внелегочный и атипичный туберкулез; кахексия; диссеминированная саркома Капоши; поражения ЦНС различной этиологии. IV. Терминальная стадия.

Инкубационныйпериод(отмоментаинфицированиядопервыхклинических проявлений или сероконверсии) продолжается от 2–3 недель до 1–2 месяцев, а по некоторым данным, и до 3–5 лет.

Клинические признаки острой фазы часто имеют неспецифический характер и определяются выраженной интоксикацией, слабостью, лихорадкой,больювмышцахисуставах,катаральнымиявлениямисостороны верхних дыхательных путей, тонзиллитом, полиаденитом, иногда этим явлениям сопутствует сыпь на коже.

Микробиологическая диагностика:

1.Материал для исследования – кровь.

2.Методы исследования:

А. Лабораторная диагностика методом ИФА, в два этапа:

–выявляются суммарные антитела, пробы с положительным результатом исследуют на втором этапе.

–определяются антитела к белкам вируса (gp41, gp120, gp160, p24 p55, p17).

Б. Молекулярно-генетический метод, с помощью которого можно обнаружитьфрагментыРНК-вируса.Результатыэтогометодадаютвоз- можность провести раннюю диагностику и обнаружить нуклеиновые кислоты в первые дни болезни.

6.2.6.2. Т-клеточный лейкоз человека

Т-клеточный лейкоз человека – вирусное лимфопролиферативное злокачественное заболевание кровеносной системы.

Возбудитель. Вирус HTLV-1 (human T-lymphotropic virus) – возбу-

дитель Т-клеточного лимфолейкоза взрослых. Относится к семейству

Retroviridae, роду Deltaretrovirus.

Возбудитель. Вирус относится к семейству Retroviridae, подсемей-

ству Lentiviridae.

Структура.ВозбудительРНК-геномныйоднонитевойвирус.Размер вириона 80–130 нм. Тип симметрии нуклеокапсида кубический. Вирус имеет суперкапсидную оболочку, которая представлена двойным слоем

–– 178 ––

––– 6. Новые инфекции –––

липидов клеточного (мембранного) происхождения. На поверхности суперкапсида расположены шипы гликопротеиновой природы. Сразу же под оболочкой расположен матриксный слой М-белка. Геном вируса иммунодефицитасложный.Онсодержиттриструктурныхгенаишесть регуляторных генов, кодирующих неструктурные белки.

Антигенное строение. Все структурные и регуляторные белки вируса являются антигенами, которые присоединяются к клеткам, несущим CD4-рецепторы,–этоТ-лимфоциты,макрофаги,промиелоциты,мегакари- оциты,дендритныеклетки,астроциты,эндотелийкапилляровмозга,олигодендроциты, клетки эпидермиса кожи, клетки эндотелия шейки матки.

Культивирование. Вирус культивируют на Т-лимфоцитах и моноцитах крови в присутствии интерлейкина-2 на клеточных культурах ткани Vero.

Репродукция. Сборка вирусной частицы происходит на внутренней стороне клеточной мембраны.

Резистентность. Вирус обладает высокой чувствительностью к воздействиюфактороввнешнейсреды.Нанегогубительнодействуютсолнечныелучииискусственноеультрафиолетовоеоблучение.Нагревание при 56 0С резко снижает инфекционность вируса, при нагревании до 70 0С он инактивируется через 10 минут. Под воздействием ферментов слюны и пота вирус становится малоактивным. В крови, замороженной сыворотке, замороженной сперме вирус сохраняется от нескольких месяцев до нескольких лет (замороженная сыворотка).

Эпидемиология:

1)источник инфекции – больной человек;

2)пути передачи:

–половой;

–парентеральный(пригемотрансфузияхидругихконтактахскровью);

–контактно-алиментарный(сгрудныммолокомотматериребенку);

–трансплацентарный;

3)восприимчивый коллектив – естественная восприимчивость не изучена, предполагается генетическая предрасположенность.

Этиопатогенез. Вирус инфицирует Т-клетки, В-лимфоциты, моно-

циты, фибробласты.

При лейкозах и лимфомах, индуцированных HTLV-1, в первую очередь повреждаются Т4-клетки, при этом их ядра приобретают выраженнуюдольчатость.В основепатогенезаТ-клеточноголейкозале-

–– 179 ––

––– Инфектология –––

жит увеличение количества рецепторов к интерлейкину-2. В результате зараженные клетки с этим рецептором начинают размножаться и продуцировать фактор роста. Это первый этап карценогенеза.

В ходе усиленной репродукции в некоторых клетках происходит онкогенная мутация, и такая клетка начинает продуцировать популяции лейкозных клеток и возникает моноклональный лейкоз. Наблюдается инфильтрация всех органов кроветворения и паренхиматозных органов, диффузное поражение ткани костного мозга.

Клинические проявления:

–инфекционный период от 4 до 14 дней;

–начало заболевания острое, связанное с лихорадкой и интоксикацией;

–увеличение печени и селезенки;

–увеличение лимфатических узлов.

Микробиологическая диагностика:

1)материал для исследования – кровь;

2)методы исследования:

а) лабораторная диагностика методом ИФА в два этапа:

–выявление суммарных антител (пробы с положительным результатом исследуют на втором этапе);

–определение антител к белкам вируса (gp41, gp120, gp160, p24 p55, p17);

б) молекулярно-генетический метод, с помощью которого можно обнаружить фрагменты РНК-вируса (результаты этого метода дают возможность провести раннюю диагностику и обнаружить нуклеиновые кислоты в первые дни болезни).

6.2.7. Микробиология инфекционных поражений, вызванных вирусами семейства Polyomaviridae

Полиомавирусная инфекция – острое вирусное заболевание, обусловленное вирусами семейства Polyomaviridae и характеризующееся поражением различных органов человека.

Возбудитель – полиомавирус JC, полиомавирус ВК.

Структура. Геном вируса представлен кольцевой двухцепочечной ДНК. В составе инфекционного вириона суперспирализованная ДНК связана с белками-гистонами клетки хозяина.

–– 180 ––