Донецкая Э.Г.-А., Зрячкин Н.И. Инфектология

Материал для исследования:

–у женщин – мазки или соскобы из уретры, канала шейки матки, больших вестибулярных желез;

–у мужчин – отделяемое уретры, первая порция мочи, секрет предстательной железы, сперма.

6.1.10.3. Суставная форма микоплазмоза

Из синовиальной жидкости и ткани суставов при ревматоидном артрите выделяют M. arthritidis, M. fermentas, U. urealyticum.

Эпидемиология:

а) источник иинфекции – больной человек, носитель;

–– 151 ––

––– Инфектология –––

б) пути передачи:

–воздушно-капельный;

–половой;

–эндогенный;

в) восприимчивый коллектив – дети и взрослые.

Этиопатогенез. Микоплазмы, вызывающие суставные поражения, запускаютаутоиммунныепроцессы,результатомкоторыхявляетсядлительная персистенция возбудителя в организме. Скапливаясь в большом количестве, микоплазмы аккумулируются в суставных хрящах и костном мозге и в дальнейшем при эндогенной активации становятся источником реинфекции.

Патогенезсуставныхпораженийможетбытьсвязанстем,чтовырабатываемые на микоплазмы антитела перекрестно реагируют с антигенами тканей организма (например, M. arthritidis имеет перекрестно реагирующие антигены с хондроцитами макроорганизма). При этом развиваются аутоиммунные процессы, приводящие к повреждению хрящевой ткани.

Клинические проявления:

–инкубационный период до 30 дней;

–чаще микоплазмы поражают коленные и голеностопные суставы, реже фаланговые, тазобедренные, плечевые и локтевые;

–начало острое;

–температура тела чаще субфебрильная, но может быть и высокой;

–боль в области сустава;

–припухлость сустава;

–кожа над суставом горячая на ощупь.

Материал для исследования: кровь, суставная жидкость.

6.1.11. Микробиология инфекционных поражений, вызванных Ehrlichia spp.

Эрлихиоз – риккетсиоз, характеризующийся лихорадкой, явлениями интоксикации, миалгией и артралгией и появлением экзантемы у части больных.

Классификация эрлихий:

Геногруппа1:Ehrlichiacanis,Ehrlichiachaffeensis,Ehrlichiaewingii, Ehrlichia ruminantum.

–– 152 ––

––– 6. Новые инфекции –––

Геногруппа 2: Anaplasma phagocytophilum, Anaplasma platus. Геногруппа 3: Neorickettsia sennetsu и Neorickettsia risticii.

Эрлихии–этооблигатныевнутриклеточныепаразиты,поражающие моноциты, макрофаги, полиморфноядерные лейкоциты. Мононуклеарный эрлихиоз вызывают Ehrlichia chaffeensis, гранулоцитарный эрли-

хиоз вызывает Anaplasma phagocytophilum.

Морфология. Клетки эрлихий чаще сферической формы. Размножаются бинарным делением. Имеют хорошо выраженную клеточную стенку, цитоплазматическую мембрану и внутриклеточные скопления. Внутриклеточные скопления эрлихий напоминают ягоды малины (морулу)

Антигенное строение. Выявлено семь основных протеинов с различной молекулярной массой и минорный белок, обладающие антигенными свойствами.

Культуральныке свойства. Культивируются в культуре клеток: макрофагоподобных (линия собачьих макрофагов ДН82) или эпителиоподобных (линии эндотелиальных клеток человека, клетки VERO, HeLa).

Факторы патогенности: в качестве фактора патогенности рассматривается формирование «спороподобных» корпускул; выход из клет- ки-мишени путем «почкования» с последующим заражением прилегающих соседних клеток эндотелия; адгезины клеточной стенки.

Резистентность. Эрлихии кислотоустойчивы, чувствительны к влиянию факторов внешней среды.

Эпидемиология:

–источник инфекции – собаки, кошки, лошади, олени, антилопы, козы, овцы и приматы;

–путь передачи – трансмиссивный (передаются клещами во время укуса);

–восприимчивый коллектив – дети и взрослые.

Этиопатогенез. При моноцитарной и гранулоцитарной формах на начальной стадии инфекции возбудитель внедряется в организм через кожу. После укуса инфицированного эрлихиями клеща возбудитель проникает в подлежащие ткани, попадает в кровь и гематогенным путем разносится по всему организму. Размножение эрлихий происходит в моноцитах и гранулоцитах периферической крови и в тканевых макрофагах, вызывая их гибель. В ходе процесса поражаются макрофаги селезенки, печени, лимфатических узлов, костного мозга. В этих органах формируется миелоидная гипоплазия, развивается желудочно-ки-

–– 153 ––

––– Инфектология –––

шечное и легочное кровотечение, происходит изменение уровня печеночных трансаминаз.

Клиника. Начало болезни острое. По клиническим симптомам напоминает легкую форму пятнистой лихорадки Скалистых гор, но при этом реже отмечается экзантема. У больных наблюдаются мышечные боли, боли в суставах, головная боль, могут быть тошнота и рвота. Температура повышается до 38–40 0С, печень и селезенка увеличены.

Микробиологическая диагностика:

а) материал для исследования – кровь; б) методы исследования:

–микроскопия мазков периферической крови, окрашенных по Романовскому – Гимзе, дает положительный результат в острой фазе заболевания;

–серодиагностика–выявлениеспецифическихантителвтитре1:80и выше, используют реакцию непрямой иммунофлюоресценции или ИФА, иммуноблоттинг; нарастание титра антител происходит на второй неделе заболевания, ау переболевших антитела могут сохраняться до двух лет;

–молекулярно-генетическая диагностика методом ПЦР.

6.1.12. Микробиология инфекционных поражений, вызванных Orientia tsutsugamushi

Лихорадка цуцугамуши – острый риккетсиоз, типичный природ- но-очаговый зооантропоноз клещевой группы, характеризующийся наличием первичного аффекта, лимфаденопатии и макулопапулезной сыпи.

Морфология. Возбудитель имеет кокковидную или палочковидную форму, Гр(–), при окраске по Романовскому – Гимзе приобретает пурпурный цвет, обнаруживается в цитоплазмпе мононуклеарных клеток и не проникает в ядро. Имеет ригидную оболочку, в цитоплазме – гранулы. В клеточной стенке отсутствует пептидогликан.

Антигенное строение. Выделяют три серологических типа возбудителя.

В антигенном отношении отдельные штаммы отличаются друг от друга.

–– 154 ––

––– 6. Новые инфекции –––

Антигены: первый – растворимый, второй – корпускулярный. Имеется общий антиген с протеем ОХ19.

Культуральные свойства. Культивируются в желточном мешке, культуре тканей млекопитающих, хорионаллантоисной оболочке куриного эмбриона. Вырабатывают эндотоксин.

Факторы вирулентности. Липополисахарид клеточной стенки, поверхностные белки, фосфолипаза А2, гемолизины, токсины, фимбрии, пили.

Резистентность. Возбудители устойчивы к действию внешних факторов, вылущиванию, длительно сохраняются во внешней среде. Выдерживают действие ультрафиолетовых лучей.

Эпидемиология:

–источник инфекции – личинки краснотелковых клещей;

–резервуар – грызуны, насекомоядные;

–путь передачи – трансмиссивный;

–восприимчивый коллектив – дети и взрослые.

Этиопатогенез.Заражениепроисходитчерезкожуприукусешестиногих личинок краснотелковых клещей. На месте укуса формируется аффект в виде местного очагового поражения кожи. Затем из первичного очага риккетсии продвигаются по лимфатическим сосудам и возникают лимфангиты и регионарные лимфадениты. Потом риккетсии попадают в кровь, в эндотелий сосудов, где и размножаются. Возникают очаговые васкулиты и периваскулиты в различных органах человека.

Клинические проявления. Инкубационный период длится от 5 до 21 дня. После укуса инфицированной личинкой сразу же начинается развитие первичного аффекта – возникает участок воспалительного инфильтративногопоражениякожи.Вначаленаблюдаетсяуплотнениеипокраснениеучасткакожидиаметромот0,3до1см,споследующимувеличением до 2–3 см. На его верхушке появляется везикула, которая вскрывается и превращается в язвочку диаметром 2–6 мм с зоной гиперемии.

Быстро повышается температура тела, отмечается озноб или познабливание.

Лихорадкацуцугамушиотличаетсяотдругихриккетсиозовразвитием генерализованной лимфаденопатии после появления регионального лимфаденита.

У больного наблюдаются симптомы интоксикации: общая слабость, высокая температура, головная боль, бессонница. Пациента беспокоят сильные боли во всем теле и особенно в пояснице.

–– 155 ––

–––Инфектология –––

Впервые 2–3 дня болезни появляются гиперемия кожи лица и шеи, инъекция сосудов склер, упорный кашель и затем – увеличение размеров печени и селезенки.

Вначальный период больного беспокоит брадикардия, а при развитии миокардита – тахикардия.

При поражении ЦНС нарушается сознание, могут быть галлюцинации, общий тремор, мышечные подергивания и судороги.

Микробиологическая диагностика:

а) материал для исследования – кровь; б) методы исследования:

–серологическая диагностика (реакция агглютинации с протеем ОХк, РСК, Elase);

–ПЦР-диагностика;

–биологический метод (заражение белых мышей).

6.1.13. Микробиология инфекционных поражений, вызванных Chlamydia spp.

Хламидиозы – группа антропонозных и зоонозных инфекций, вызываемых хламидиями, характеризующихся острым или хроническим течением с поражением внутренних органов, лимфатических узлов, глаз, суставов и воспалительными гранулематозными процессами на слизистых оболочках.

Возбудители – хламидии, относятся к самостоятельному порядку Chlamydiales семейству Chlamydiaceae, включающему два рода:

Chlamydophila и Chlamydia.

Род Chlamydophila включает следующие виды: Chlamydophila pneumoniae и Chlamydophila pssittaci. Род Chlamydia вид Chlamydia trachomatis, который делится на два биовара. Первый биовар – трахомы и паратрахомы. Он делится на серовары,из которых А, В, Ва, С являются возбудителями трахомы. Серовары от Д до К (генитальные) – причина урогенитального хламидиоза (негонококковый уретрит) и его экстрагенитальных осложнений (болезнь Рейтера). Серовары L1,L2,L3 вызывают венерическую лимфогранулематому.

Широкое распространение хламидийной инфекции обусловлено увеличением количества L-форм и персистентных форм Chlamydia

–– 156 ––

–––Инфектология –––

–в состав клеточной стенки входят гликолипиды, аналогичные липополисахаридам наружной мембраны клеточной стенки Гр(–)-бактерий.

Антигенная структура:

1.Общий, групповой, родоспецифический антиген, представленный термостабильными липополисахаридами (LPS-эндотоксин).

2.Видоспецифический и типоспецифический антигены, позволяющие подразделять хламидии на серовары.

3.ОсновнойбелокнаружноймембраныМОМР(ОМП-1)–этострук- турный белок, который формирует мембранные поры (порины).

4.Общий протеин наружной мембраны (ОМП-2).

5.Белок теплового шока хламидий hsp60.

Clamydia sрр. способна переходить в L-формы, что является одним из механизмов развития персистирующей инфекции, которая протекает латентноисложнавдиагностике.Установлено,чтопатогенезхламидийной инфекции связан с изменениями, происходящими в антигенном составе клеточной стенки возбудителя, а именно с уменьшением на ее поверхности МОМР и LPS и в тоже время увеличением экспрессии hsp60.

Культивирование. Хламидии – это патогенные бактерии, которые являются облигатными внутриклеточными энергетическими паразитами. Они не способны самостоятельно аккумулировать и использовать энергию.

Культивируются хламидии в желточном мешке развивающихся куриных эмбрионов, в организме чувствительных животных и в культурах клеток HeLa, McCoy, Hep2. Оптимальная температура культивирования +35 0С. Это облигатные внутриклеточные паразиты, поэтому на питательных средах они не растут.

Факторы патогенности: белки наружной мембраны, определяющие адгезивные свойства, эндотоксин, белок теплового шока.

Резистентность. Возбудители хламидиозов неустойчивы во внешней среде, чувствительны к действию высокой температуры и быстро погибают при высушивании. При комнатной температуре инфекционная активность возбудителей снижается через 5–7 суток. Низкая температура (–20 0С) способствует длительному сохранению инфекционных свойств возбудителей. Хламидии быстро погибают под воздействием ультрафиолетового облучения.

Методы обнаружения хламидий:

1. Микроскопический метод. В основе микроскопического метода лежит обнаружение цитоплазматических включений в клетках эпите-

–– 158 ––

––– 6. Новые инфекции –––

лия, окрашенных по Романовскому – Гимзе. При этом элементарные тельца хламидий окрашиваются в розовый цвет, а ретикулярные тельца – от голубого до синего. В случае положительного результата, полученного методом микроскопии, необходимо провести культуральное исследование.

2.Культуральное исследование. Классическим методом диагностики хламидиоза является культуральное исследование. Для выделения

возбудителя используют клетки McCoy, эпителиальные оболочки клеточного мешка куриного эмбриона, клетки HeLa 229, культуры клеток детенышей хомяка ВНК 21.

Преимуществом этого метода является возможность обнаружить живые размножающиеся хламидии. Длительность культивирования варьирует от 4 до 7 дней.

3.Прямая иммунофлюоресценция. Для постановки ПИФ используют моноклональные антитела к различным антигенам хламидий:

– основному белковому антигену наружной оболочки хламидий (МОМР);

– липополисахаридному антигену.

Этот метод может быть использован для исследования материала, полученного как инвазивным, так и неинвазивным путем.

4.Иммуноферментный анализ. Это прямой метод детекции возбудителя хламидиоза. Преимущество использования ИФА заключается в возможности исследования большого количества образцов, быстроте получения результата.

5.Методмолекулярнойгибридизации.Преимуществаметодазаключаются в возможности анализа большого количества клинических образцов,всвязисчемегочащеиспользуютдляскрининга,особеннопри исследовании клинического материала, полученного неинвазивным путем. Этот метод не требует живого возбудителя, что существенно влияет на результаты анализа.

6.Метод амплификации нуклеиновых кислот. При наличии соответствующих тест-систем возможно проводить одновременное определение хламидий и гонококков.

7.Серодиагностика. Обнаружение антител имеет ограниченную диагностическую ценность. Для этих анализов используют РСК и РНГА. Разработаны тест-системы для ИФА с целью обнаружения IgA, IgM,

IgG к Clamydiа spp.

–– 159 ––

–––Инфектология –––

6.1.13.1.Респираторный хламидиоз

Респираторный хламидиоз (пневмохламидиоз) – антропонозное заболевание, характеризующееся острым началом, лихорадкой и преимущественным поражением органов дыхания.

Возбудитель – Chlamydophila pneumoniae.

Имеет ряд отличий от других хламидий:

–низкая степень гомологии ДНК (имеет слабое генетическое родство с другими хламидиями – 10%);

–размножаются только в клетках линий Hela и Hep2;

–способныиндуцироватьцилиостазресничекмерцательногоэпителия;

–в отличие от других хламидий форма элементарных телец грушевидная или копьевидная за счет расширенного периплазматического пространства.

Chlamydophila pneumoniaе представлена тремя биоварами:

–TWAR (Taiwan Acute Respiratory) – вызывает респираторный хла-

мидиоз у человека;

–Koala – патогенный для кошек;

–Eguine – конский биовар.

Эпидемиология:

–источник инфекции – больные люди с манифестными и бессимптомными формами заболевания;

–путь передачи – воздушно-капельный;

–восприимчивый коллектив: восприимчивость к инфекции высокая как у детей, так и у взрослых; наибольшая заболеваемость отмечается среди лиц 20–49 лет.

Этиопатогенез. Chlamydophila pneumoniaе – внутриклеточный па-

разит, который может долго персистировать в клетках эпителия лимфоглоточного кольца, способствует возникновению аллергии, обусловливает тяжелое течение заболеваний легких.

Возбудитель проникает в легкие человека через верхние дыхательные пути. Он обладает тропизмом к эпителиоцитам дыхательных путей, эпителиюбронхов,бронхиол,альвеолярныммакрофагам,моноцитам,эндотелиальным клеткам сосудов, что приводит к воспалению верхних отделов респираторного тракта и легких (фарингит, бронхит, синусит, пневмонии).

–– 160 ––