87. Роль s.Pneumoniae в патологии человека. Биологические свойства, факторы вирулентности. Классификация. Особенности микробиологической диагностики.

S. pneumonia, возбудитель пневмонии, может вызывать ползучую язву роговицы, отиты, сепсис;

Морфология и биологические свойства. Пневмококки представляют собой парно расположенные кокки овальной, слегка вытянутой ланцетовидной формы, напоминающие пламя свечи. Они могут располагаться также короткими цепочками, напоминая стрептококки. В организме человека и животных образуют капсулу; при выращивании на искусственных средах она отсутствует. Неподвижны, спор не образуют, грамположительны.

Пневмококки требовательны к питательным средам, хорошо растут на кровяных и сывороточных средах с добавлением 0,1 % глюкозы, предпочитают капнофильные условия (5-10% СО2). На ЖПС дают равномерное помутнение и небольшой хлопьевидный осадок, на ППС образуют колонии диаметром около 1 мм, иногда с углублением в центре (за счет аутолиза), на кровяном агаре вызывают α-гемолиз.

Токсинбобразование. Пневмококки содержат эндотоксин, а также гемотоксин, фибринолизин, лейкоцидин, гиалуронидазу. Вирулентность пневмококка связана с веществом капсулы. В ней находится антифагин, препятствующий фагоцитированию лейкоцитами пневмококков.

Антигены стрептококков.

1. Экстрацеллюлярные – белки и экзоферменты. Это вариантспецифические антигены.

2. Целлюлярные:

1) поверхностные представлены поверхностными белками клеточной стенки, а у S. pneumonia – белками капсул. Они вариантспецифичны;

2) глубокие – тейхоевые кислоты, компоненты пептидогликана, полисахариды. Они группоспецифичны.

У пневмококков известно несколько антигенов:

* К-антиген – поверхностный полисахаридный капсульный антиген (состоит из повторяющихся в различном сочетании моносахаридов: D-глюкозы, D-галактозы и L-рамнозы), типоспецифический (85 серотипов);

* субстанция С – полисахаридный антиген клеточной стенки, аналогичен С-антигену других стрептококков;

* белок М – антиген клеточной стенки, аналогичен М-антигену других стрептококков.

S. pneumoniae синтезирует мембранотоксины (α-, β-пневмолизины и лейкоцидин).

Ферменты патогенности пневмококков:

* гиалуронидаза;

* пептидаза – расщепляет секреторный Ig А;

* муранидаза – расщепляет лизоцим.

Структурные и химические компоненты пневмококков:

* капсула;

* пили I типа;

* субстанция С – реагирует с С-реактивным белком, что активирует систему комплемента и происходит высвобождение медиаторов острой фазы воспаления, их накопление в легочной ткани стимулирует миграцию полиморфно-ядерных фагоцитов и формирование воспалительных инфильтратов (сопровождается нарушением гомеостаза легочной ткани и образованием полостей в паренхиме легких);

* белок М.

Факторы патогенности.

1. Комплексы тейхоевых кислот с поверхностными белками (играют роль адгезинов).

2. М-белок (обладает антифагоцитарной активностью). Это суперантиген, т. е. вызывает поликлональную активацию клеток иммунной системы.

3. OF-белок – фермент, который вызывает гидролиз липопротеидов сыворотки крови, снижая ее бактерицидные свойства. OF-белок важен для адгезии. По наличию или отсутствию этого белка выделяют:

1) OF+-штаммы (ревматогенные); входными воротами является зев;

2) OF—штаммы (нефритогенные); первичная адгезия на коже.

4. Ферменты агрессии и защиты: гиалуронидаза, стрептокиназа; стрептодорназа; протеазы; пептидазы.

а) О-стрептолизин (обладает кардиотоксическим действием, сильный иммуноген);

б) S-стрептолизин (слабый иммуноген, не обладает кардиотоксическим действием);

2) эритрогенин (обладает пирогенным действием, вызывает парез капилляров, тромбоцитолиз, является аллергеном, встречается у штаммов, вызывающих осложненные формы инфекции, у возбудителей скарлатины, рожистого воспаления

Резистентность. Пневмококки вне организма малоустойчивы: в высушенной мокроте сохраняются до 14 дней, а в крови около 45 дней, при нагревании до 600С гибнут за 10-15 мин., чувствительны к рабочим концентрациям дезинфицирующих средств, ко многим антибиотикам (однако в последние годы все чаще высевают пенициллинрезистентные штаммы пневмококков).

Патогенез и клиника. Пневмококки являются возбудителями крупозной пневмонии у человека. Они могут также вызывать ползучую язву роговицы, катары верхних дыхательных путей, менингит, эндокардит, поражения суставов и другие заболевания. Вместе с тем пневмококки являются обитателями слизистой оболочки верхних дыхательных путей здорового человека. Установлено, что у здоровых носителей встречаются маловирулентные штаммы, не относящиеся к I, II и III типам, поэтому инфекция в большинстве случаев носит экзогенный характер и передается воздушно-капельным путем. Понижение сопротивляемости организма в результате переохлаждения, переутомления, перенесенного гриппа и другие неблагоприятные факторы способствуют возникновению заболевания. Входные ворота инфекции — слизистая оболочка верхних дыхательных путей. При крупозной пневмонии поражаются доли легкого или все легкое. Болезнь сопровождается высокой температурой, ознобом, сухим болезненным кашлем и другими симптомами. Микробные токсины поражают сосудистую и центральную нервную системы. В связи с успешным применением антибиотиков роль пневмококка в этиологии пневмоний резко снизилась.

Иммунитет. У людей довольно выражена естественная невосприимчивость к пневмококковой инфекции.

Об этом свидетельствует частое обнаружение пневмококков на слизистой оболочке верхних дыхательных путей здоровых лиц. После перенесенного заболевания иммунитет малонапряженный, кратковременный, типоспецифический. Перенесенная пневмококковая инфекция предрасполагает к повторным заболеваниям, так как пневмококки обладают сенсибилизирующими свойствами.

Микробиологическая диагностика. Материалом для исследования являются мокрота, кровь, мазок из зева, спинномозговая жидкость. Ввиду того что пневмококк быстро погибает, патологический материал необходимо как можно скорее доставить в лабораторию для исследования. Из этого материала готовят мазки, окрашивают их по Граму и по методу Гинса, а затем микроскопируют. Обнаружение ланцетовидных диплококков, окруженных бесцветной капсулой, дает основание предположить наличие пневмококков. Затем производят микробиологическое исследование патологического материала. С этой целью делают посев на кровяной агар и сывороточный бульон. Одновременно используют биологический метод, вводя внутрибрюшинно исследуемый материал двум белым мышам. Уже через 4-6 часов у них появляются первые признаки заболевания. Мышей под наркозом вскрывают или отсасывают пунктат из брюшной полости. Кусочки внутренних органов, кровь или пунктат засевают в сывороточный бульон и на кровяной агар. На следующий день просматривают посевы, отмечают характер роста, микроскопируют, выделяют чистую культуру. Для дифференциации от стрептококка делают посев исследуемой культуры в пробирку с 10% желчным бульоном и в среду с инулином. Если через 24 ч инкубации в термостате в пробирке с желчным бульоном произошло полное просветление среды (вследствие лизиса микробов), а в пробирке инулином— покраснение ее, указывающее на разложение инулина, выделенную культуру относят к пневмококкам. Для определения типа пневмококка ставят реакцию агглютинации с противопневмококковыми сыворотками

Профилактика и лечение. Меры профилактики сводятся к закаливанию организма; следует избегать рез- ч кого охлаждения. Специфическая профилактика пневмококковой инфекции в РФ не проводится, хотя имеется поливалентная вакцина, включающая 23 различных полисахаридных антигена. Специфическое лечение не разработано.

88. Роль S.pyogenes в патологии человека. Биологические свойства, факторы вирулентности. Классификация. Особенности микробиологической диагностики.= вопрос 86

Возбудителями стрептококковой инфекции являются Streptococcus pyogenes - потенциально-патогенный микроорганизм, с которым связано возникновение гнойно-септических и ненагноительных заболеваний.

Морфология. Это Гр+ аспорогенные кокки, часто располагающиеся в виде цепочек. Неподвижны. Капсулу не образуют (за исключением некоторых штаммов).

Культуральные свойства. Факультативные анаэробы. На простых средах не растут; их выращивают на средах с добавлением глюкозы (сахарный бульон), сыворотки или крови (кровяной агар). В жидкой среде дают пристеночный рост, на кровяном агаре - мелкие колонии, часто с зоной гемолиза (полный гемолиз даёт бета-гемолитический стрептококк, неполный - альфа-гемолитичеекий, зеленящий).

Антигенная структура. По полисахаридному антигену различают около 20 серогрупп, из которых заболевания у человека чаше вызывают бета-гемолитические стрептококки группы А.

Факторы вирулентности. Стрептококки обладают различными факторами патогенности: токсинами (гемолизинами, лейкоцидином, эритрогенином, цитотоксином). ферментами (гиалуронидазой, фибринолизином и др.), а также особыми клеточными структурами (например, капсулой, М-протеином, обеспечивающими антифагоцитарные и другие свойства). У человека стрептококки вызывают местные гнойно-воспалительные процессы, рожистое воспаление, ангины, скарлатину, сепсис, а также участвуют в патогенезе ревматизма и гломерулонефрита.

Источник инфекции: больной или микробо¬носитедь. У последних стрептококки чаще вегетируют в зеве. Заражение происходит эндогенным или экзогенным путем (контактным, воздушно-капельным, реже алиментарным). Характер течения заболевания во многом зависит от состояния организма (в частности, его сенсибилизации); более тяжело, с развитием осложнений, оно протекает у лиц со сниженной резистентностью и предрасположенностью к стрептококковой инфекции. Хронизацию инфекции часто сопровождает образование стрептококком L-форм.

Микробиологическая диагностика. Материалом для исследования служат:

1) слизь из зева при ангине и скарлатине;

2) кровь при эндокардите и подозрении на сепсис;

3) гнойное отделяемое из очага поражения;

4) мокрота при заболеваниях органов дыхания;

5) моча при заболеваниях почек и мочевыводящих путей. Чаще всего исследуют слизь из зева и кровь. Слизь из зева, взятую стерильным ватным тампоном, засевают на чашки с кровяным агаром. Посевы выдерживают в термостате при 37°С 18—20 ч (первый день). На второй день просматривают колонии, делают мазки, микроскопируют. Колонии, окруженные зоной гемолиза, отсевают в пробирку с бульоном Мартена или кровяным бульоном.

Микробиологическая диагностика основана на обнаружении в патологическом материале возбудителя микроскопическим или микробиологическим методами; иногда проводят аллергодиагностику или выявляют в крови антитела к стрептококковым антигенам (серодиагности¬ка).

Специфическое лечение: антибиотики (чаще пенициллин); стрептококковый бактериофаг (местно).

Специфическая профилактика: не разработана. Для профилактики рецидивов хроническим больным вводят пенициллин длительного действия (бициллин).

89. Гемофильные бактерии. Биологические свойства, факторы вирулентности. Роль в патологии человека. Механизм и пути передачи. Принципы микробиологической диагностики. Препараты для лечения т специфической профилактики.

Haemophylus influenzae-возбудитель пневмонии, менингитов, эндокардита, абсцессов, артритов, поражение кожи, ногтей и глаз.

В группу гемофильных бактерий объединены мелкие грамотрицательные бактерии, которые способны расти только на обогащенных питательных средах, содержащих цельную или лизированную кровь, или ее производные в качестве факторов роста. Многие микробы этого рода в норме обитают на слизистых оболочках дыхательных путей человека. Наиболее важными патогенами являются гемофилис инфлюэнца, преимущественно типа b, вызывающие инфекции с респираторным механизмом заражения (менингиты, синуситы, бронхиты), а также возбудитель мягкого шанкра гемофилис дикрейи. Морфология. Это мелкие грамотрицательные сферические или палочковидные бактерии, иногда образующие пары, цепочки, нити (плеоморфизм). Неподвижны, спор не образуют, имеют пили (фимбрии). Образование капсулы признак непостоянные, может судить маркером вирулентности.

Культуральные свойства. Факультативные анаэробы, но лучше растут в аэробных условиях. Факторы роста, содержащиеся в крови - фактор 9 (протопорфирин 9 в составе гематина), фактор 5 (Над или НАДФ). Для культивирования применяют шоколадный агар.

Факторы вирулентности: -ведущим фактором вирулентности H. Influenza является капсула, штаммы, имеющие ее, преимущ типа b, вызывают тяжелые инфекции. -IgA- протеаза, инактивирующая секреторные антитела. Протеаза и пили влияют на прикрепление микроба к эпителию и его колонизации. - ЛПС наружной мембраны – эндотоксин (процессы адгезии и инвазии), а также вызывает паралич ресничек дыхательного эпителия. Источник инфекции: больной человек, бактерионоситель.

Механизм заражения: респираторный, путь передачи- воздушно капельный.

Микробиологическая диагностика: материал для исследования- мазок из носоглотки, кровь, мокрота, ликвор. Используют серологические тесты с целью обнаружения b-капсульного антигена: иммуноэлектрофорез, прямая РИФ, латекс агглютинацию с анти-b. b для выделения и идентификации возбудителей используют бактериологический метод исследования: посев на шоколадный или кровяной агар, инкубация до появления колоний. Инфлюэнцу дифференцируют от других грамотрицательных палочек по ее потребности в факторах роста.

Лечение: цефалоспорины 3 поколения (цефтриаксон, цефотаксим)

Профилактика: субкорпускулярная вакцина. Содержащая очищенный капсульный антиген (PRP) (создание искусственного иммунитета к H.influenza) Конъюгированные вакцины, сод. PRP на белке носителе (дифтерийный, столбнячный анатоксин)