- •«Методи контролю в біотехнології»
- •1. Контроль живильного середовища тема: аналіз меляси
- •Визначення нафтових продуктів в мелясі
- •Визначення спінювання меляси
- •Визначення колоїдів меляси
- •Визначення вологості меляси
- •Визначення вмісту сірчистого ангідриду
- •Визначення буферності меляси
- •Освітлення меляси
- •А) Визначення амінного азоту „мідним методом”
- •Б) Визначення азоту, що засвоюється
- •Визначення цукрів в мелясових розчинах
- •Визначення сухих речовин аерометрами та рефрактометром
- •Лабораторна робота № 11 Мікробіологічний аналіз меляси
- •Т е м а : Мікробіологічний контроль води
- •Санітарно-бактеріологічний контроль питної води
- •Колі індекс – визначає вміст клітин e.Coli (кишкової палички) в 1л води та вказує на фекальне та патогенне забруднення води.
- •Визначення мікробного числа Методика визначення
- •Визначення колі-індекса (бродильний метод) Методика визначення
- •Суть методу
- •Методика визначення
- •Примітка
- •Реактиви та обладнання:
- •14.3. Екстрактивний ваговий метод Методика визначення
- •Реактиви та обладнання:
- •2. Контроль культури та біомаси лабораторна робота № 2.1 контроль чистої культури
- •Реактиви та обладнання:
- •Лабораторна робота № 2.2 Вирощування дріжджів а) Підготовка меляси
- •Б) Вирощування дріжджів
- •Лабораторна робота № 2.3. Визначення вмісту біотину в дріжджах
- •А) приготування стандартного ряду розчинів вітамінів
- •Б) підготовка матеріалу і визначення біотину
- •Лабораторна робота № 2.4 контроль маточних дріжджів
- •А) Мікробіологічний контроль
- •Б) Фізико-хімічний контроль
- •В) Виявлення посторонніх дріжджевих грибків в чистій культурі – в маточних дріжджах
- •Г) Метод відбору найбільш активної культури пекарських дріжджів
- •3. Контроль культуральної рідини
- •4. Контроль продукції
- •Електрофоретичне визначення глюкозооксидази
- •5. Контроль відходів біотехнологічних виробництв
- •Контроль стічних вод а) Визначення сполук сірки у промислових стоках
- •Реактиви та обладнання: хімічні стоки, стоки пивзаводу, їдільні, лікарні, фільтрувальний папір, середовище Ендо, мікроскоп, пінцет, чашки Петрі. В) Визначення рН
- •6. Контроль біоматеріалів
Т е м а : Мікробіологічний контроль води
Безпека води в епідеміологічному відношенні визначається :
загальним числом мікроорганізмів (Мікорбне число - МЧ = 100 кл /1 мл) та числом бактерій групи кишкової палички (Колі-індекс = 3 к.п./1 л або Колі-титр - 300 мл – 100 мл/1 к.п.) . Біоочистка води ведеться з допомогою ультрафільтрів.
Мінералізація природньої води господарсько питного призначення < 3 г/м3. Твердість води Т0 < 7мг-екв/л.
Токсикологічні показники якості води характеризують нешкідливість її хімічного складу:
природні домішки - Fe < 0,3 мг/л ; Mn , 0,1 мг/л ; H2S < 0,05 мг/л ; F < 1,5 мг/л ; сума металів Zn, Cu, Pl - 2.10-7 моль/л;
концентрація хімічних речовин, що попадають у воду (Al < 0,5 мг/л, As < 0,05 мг/л, Pl < 0,03 мг/л, Sr < 7,0 мг/л , Se < 0,001 мг/л, Zn < 5,0 мг/л, Cu2+ < 1,0 мг/л, PO43-< 3,5 мг/л, SO42- < 500,0 мг/л, Cl-залиш. < 350 мг/л, NO-3 < 4,5 мг/л, NO-2 < 0,5 мг/л, NH+4 < 0,5 мг/л ) .
Залишкові домішки знезаражуючих речовин – Clвільний = 0,3- 0,5 мг/л при контакту = 30 хв ; Сl зв’язаний =0,8- 1,2мг/л при контакту = 60 хв; О з = 0,1-0,3 мг/л при контакту = 12 хв;
Фізико-хімічна очистка води ведеться коагуляцією, а для усунення молекулярно-дисперсних домішок вугільною адсорбцією. Хімічне знезараження води ведеться хлоруванням (хлорною водою та хлорним вапном), озонуванням та комбінованим хлоруванням (хлор-амонізацією з перманганатом калію, іонами міді та срібла).
Кислотно-основний показник води pH = 6,5-8,5 (6,0-9,0).
Правила відбору проб води, які забезпечують максимальне зберігання природного сольового та газового складу води. Для відбору та зберігання проб на аналіз використовують скляні або пластмасові ємності до 0,5л, попередньо ретельно вимиті та сполокані аналізованою водою щонайменше трикратно, а для відбору проб на глибині – батометри. Посудини з пробами закриваються скляними, гумовими або пластмасовими пробками, попередньо прокип’яченими в дистильованій воді та сполокані аналізованою водою (між корком та поверхнею води об’єм повітря 5-10 мм). Якщо пробу бруть з крану водогону, то спочатку флембують кран, спускають воду протягом 15 хв, споліскують ємність водою та набирають воду.
Визначення показників в пробі проводять через 2-6 год після відбору, або в консервованій пробі протягом 2 діб (консерванти для проб води: конц. H2SO4, CHCl3, 3 мл HCl-d=1,19 г/мл на 1л води).
Санітарно-бактеріологічний контроль питної води
Основні санітрано-бактеріологічні критерії якості води :
МЧ - визначає кількість батерій , що ростуть на живильному агарі протягом 24 год інкубування при 37 0С в 1 мл води, та вказує на органічні забруднення води ;
Колі індекс – визначає вміст клітин e.Coli (кишкової палички) в 1л води та вказує на фекальне та патогенне забруднення води.
Л А Б О Р А Т О Р Н А Р О Б О Т А № 12
Визначення мікробного числа Методика визначення
Проба води на 4/5 відбирається в стерильні пляшечки (0,5 л), закриті ватно-марлевими пробками з паперовими ковпаками та прив’язаними стерильними корками в паперовому пакетику. Якщо вода хлорована – до стерилізації в пляшечки вносять дехлоратор 10 мл 1,5 % розчину сірчистокислого натрію. Проба закривається стерильним корком.
Пробу води дозами 1мл та 0,1 мл засівають над полум’ям в дві стерильні чашки Петрі стерильною піпеткою у привідкриту чашку, де заливалося 12-15 мл розплавленого і охолодженого до 450С МПА без бульбашок. Після посіву та вистигання сердовища закриті чашки поміщають в термостат при 370С та інкубують протягом 24 год.
Підрахунок колоній, що виросли, проводять через мікроскоп або лупу з п’ятикратним збільшенням, поміщаючи чашку догори дном на чорному фоні, відзначаючи маркером кожну підраховану колонію, що виросла на поверхні та в глибині середовища.
Примітка
Якщо в чашці виросло більше 100 колоній, доцільно розділити чашку на 8 секторів і підрахувати мінімум в 4 секторах. Якщо - більше 300 колоній дослід повторюють або використовують “рахівні пластинки “. Якщо – лише 20 колоній чи спостерігають повзучий ріст - посів не підраховують.
При обрахунку визначають кількість мезофільних, мезотрофних, аеробних, факультативно аеробних мікроорганізмів в 1 мл води.
Л А Б О Р А Т О Р Н А Р О Б О Т А № 13
