- •«Методи контролю в біотехнології»
- •1. Контроль живильного середовища тема: аналіз меляси
- •Визначення нафтових продуктів в мелясі
- •Визначення спінювання меляси
- •Визначення колоїдів меляси
- •Визначення вологості меляси
- •Визначення вмісту сірчистого ангідриду
- •Визначення буферності меляси
- •Освітлення меляси
- •А) Визначення амінного азоту „мідним методом”
- •Б) Визначення азоту, що засвоюється
- •Визначення цукрів в мелясових розчинах
- •Визначення сухих речовин аерометрами та рефрактометром
- •Лабораторна робота № 11 Мікробіологічний аналіз меляси
- •Т е м а : Мікробіологічний контроль води
- •Санітарно-бактеріологічний контроль питної води
- •Колі індекс – визначає вміст клітин e.Coli (кишкової палички) в 1л води та вказує на фекальне та патогенне забруднення води.
- •Визначення мікробного числа Методика визначення
- •Визначення колі-індекса (бродильний метод) Методика визначення
- •Суть методу
- •Методика визначення
- •Примітка
- •Реактиви та обладнання:
- •14.3. Екстрактивний ваговий метод Методика визначення
- •Реактиви та обладнання:
- •2. Контроль культури та біомаси лабораторна робота № 2.1 контроль чистої культури
- •Реактиви та обладнання:
- •Лабораторна робота № 2.2 Вирощування дріжджів а) Підготовка меляси
- •Б) Вирощування дріжджів
- •Лабораторна робота № 2.3. Визначення вмісту біотину в дріжджах
- •А) приготування стандартного ряду розчинів вітамінів
- •Б) підготовка матеріалу і визначення біотину
- •Лабораторна робота № 2.4 контроль маточних дріжджів
- •А) Мікробіологічний контроль
- •Б) Фізико-хімічний контроль
- •В) Виявлення посторонніх дріжджевих грибків в чистій культурі – в маточних дріжджах
- •Г) Метод відбору найбільш активної культури пекарських дріжджів
- •3. Контроль культуральної рідини
- •4. Контроль продукції
- •Електрофоретичне визначення глюкозооксидази
- •5. Контроль відходів біотехнологічних виробництв
- •Контроль стічних вод а) Визначення сполук сірки у промислових стоках
- •Реактиви та обладнання: хімічні стоки, стоки пивзаводу, їдільні, лікарні, фільтрувальний папір, середовище Ендо, мікроскоп, пінцет, чашки Петрі. В) Визначення рН
- •6. Контроль біоматеріалів
Реактиви та обладнання:
Досліджувана вода, 10% розчин сульфату міді, сірчана кислота, буферний розчин, розчин 4-аміноантипірину (4-АПП), розчин гексаціаноферату калію (або персульфату амонію).
Перегонна колба, насадка, холодильник, алонж, ділильна воронка, фільтрувальна воронка, фотоелектроколориметр.
2. Контроль культури та біомаси лабораторна робота № 2.1 контроль чистої культури
Суть методу:
Чисту культуру дріжджів накопичують поступово. Починають з посіву однієї петлі чистої культури дріжджів з агару, яку вносять в декілька мілілітрів рідкого живильного середовища. Через ряд наступних пересівів одержують декілька сотень кілограмів пресованих дріжджів – чистої культури – для виробництва заданих і посівних дріжджів.
Процес розмноження чистої культури дріжджів проходить в декілька стадій. Перші стадії – в лабораторії, потім в цеху чистої культури, в спеціальних апаратах і дальше у виробничому цеху в спеціальній апаратурі маточного відділення.
Культуру пересівають не рідше ніж через 10-12 днів з попередньою підмолодкою в рідкому солодовому суслі густиною 10-120 Блг протягом 16-18 год при температурі 30 0С. Після пересіву на похилий живильний агар культуру вирощують при 30 0С протягом 24-36 год і потім зберігають при кімнатній температурі.
Методика визначення:
Оцінка чистоти культури.
Перегляд культури під мікроскопом.
Контролю підлягає однодобова культура із рідкого солодового сусла густиною 10-12 0Блг. Одну краплю культури за допомогою стерильної піпетки наносять на чисте предметне скло і накривають покривним (два скла попередньо протирають спиртом).
Приготовлений препарат поміщають на предметний столик мікроскопу і продивляються десять полів бачення при збільшенні в 600-800 разів. При перегляді не повинно бути знайдено посторонніх дріжджових грибків і бактерій.
Посів на чашки Петрі.
Пробу із культури, попередньо розведену в стерильній водопровідній воді, наносять на поверхню твердого живильного середовища (метод такий як і при дослідженні меляси).
Оцінка ферментативної активності культури – зимазної і мальтазної
В пробірку з дводобовою культурою на похилому живильному агарі наливають 1-2 мл стерильної водопровідної води і сильно перемішують. Одержану густу емульсію (декілька крапель) наносять стерильною піпеткою на поверхню агарового мелясового середовища.
Посівний матеріал розподіляють шпателем по поверхні середовища. Таким чином засівають не менше двох чашок Петрі, які потім поміщають в термостат при 30 0С на 48 год. Чашки ставлять кришкою вниз. Культуру дріжджів, що виросла знімають з поверхні агару шпателем.
Вологість грудки дріжджів, що утворився, близька до вологості пресованих дріжджів (біля 75%). Із одержаних таким методом дріжджів беруть дві наважки по 0,5 г для аналізу.
Зимазна активність різних культур пекарських дріжджів коливається від 45 до 60 хв, мальтазна – від 95 до 160 хв.
Реактиви та обладнання:
Однодобова культура дріжджів, пекарські дріжджі, солодове сусло, стерильна водопровідна вода, мікроскопи, агарове мелясове середовище, чашки Петрі, піпетки