Навчальнi цiлi

Знати: Будову, біологічні функції і механізм дії гормонів інсуліну, глюкагону, катехоламінів, шляхи їх синтезу та інактивації, біохімічні зміни і клінічні симптоми патології цих залоз, методи терапії і препарати.

Вмiти: Виконати кольорові реакції на інсулін та адреналін; визначити вплив інсуліну і адреналіну на вміст глюкози в крові.

Самостiйна позааудиторна робота:

1. Дати характеристику гормонам підшлункової залози і мозкового шару надниркових залоз за схемою: назва, природа, структура, шлях синтезу та інактивації, біологічні ефекти і механізм дії, ознаки гіпер- і гіпофункції залоз.

2. Підготувати вихідні дані для оформлення протоколу лабораторної роботи.

Контрольнi питання:

1. Структура, утворення і секреція, біологічна дія інсуліну.

2. Структура, утворення і секреція, біологічна дія глюкагону.

3. Інсулінозалежний та інсулінонезалежний діабет: порушення обміну речовин та біохімія ускладнень.

4. Препарати інсуліну та інші цукорзнижуючі ліки.

5. Структура, синтез, біологічна роль і механізм дії адреналіну і норадреналіну. Шляхи перетворення їх.

6. Адоеналін – фармпрепарат, використання та умови зберігання.

Самостійна робота на занятті

Виконати лабораторні роботи: 1)Якісні реакції на інсулін; 2)Якісні реакції на адреналін; 3)Вплив інсуліну та адреналіну на вміст глюкози в крові. Оформити і захистити протокол.

Методика виконання роботи

1. Якісні реакції на інсулін.

Принцип методу. Інсулін дає характерні реакції на білок: біуретову, Геллера, Фоля, Міллона та ін.

а) Біуретова реакція (Піотровського) відкриває пептидний зв’язок в білку: до 5 крапель розчину інсуліну додають 5 крапель 10% розчину їдкого натрію, 2 краплі 1% розчину сульфату міді і все перемішують; вміст пробірки набуває фіолетового кольору.

б) Реакція на тирозин (Міллона): до 5 крапель розчину інсуліну вносять 3 краплі реактиву Міллона і обережно нагрівають; в пробірці з’являється цеглисто-червоне забарвлення (утворення осаду ртутної солі динітротирозину);

в) Реакція на амінокислоти, що містять слабозв’язану сірку (Фоля): до 5 крапель розчину інсуліну додають 5 крапель реактиву Фоля, інтенсивно прокип’ячують і додають постояти 1-2 хвилини; з’являється чорний або бурий осад сульфіду свинцю.

г) Нінгідринова реакція: до 5 крапель розчину інсуліну додають 5 крапель 0,5% розчину нінгідрину і злегка підігрівають; спостерігають появу рожево-фіолетового забарвлення, яке згодом синіє.

2. Якісні реакції на адреналін

Принцип методу. Адреналін дає слаболужну реакцію, легко окислюється на повітрі з утворенням адренохрому, внаслідок чого розчин забарвлюється в червоний колір. При взаємодії з нітритом спостерігається жовто-оранжеве забарвлення з діазореактивом – червоне і з хлорним залізом – зелене. Реакція з хлорним залізом характерна для пірокатехінового кільця, яке входить в молекулу адреналіну та норадреналіну. При взаємодії діазореактиву з адреналіном рідина забарвлюється в червоний колір внаслідок утворення складної сполуки типу азобарвника.

а)реакція з хлорним залізом.

Хід роботи. В пробірку наливають 10 крапель розчину адреналіну і додають 1 краплю хлорного заліза. Спостерігається зелене забарвлення. Внаслідок наявності пірокатехіну в молекулі адреналіну. Додають три краплі 10%-го розчину їдкого натрію і спостергають вишнево-червоне забарвлення.

б)діазореакція.

Хід роботи. До 6 крапель 0,5 %-го розчину сульфанілової кислоти додають 6 крапель 0,5 %-го розчину нітрату натрію (суміш діазореактиву), 10 крапель розчину адреналіну і 3 краплі 10 %-го розчину їдкого натрію. Спостерігають червоне забарвлення.