15. Клостридии столбняка, классификация, свойства микробов, факторы патогенности, столбняк новорожденных. Лабораторная диагностика, специфическая профилактика и терапия столбняка.

Стобняк (tetanus) – тяжёлая раневая инфекция, вызываемая Clostridium tetani, характеризующаяся поражением нервной системы, приступами тонических и клонических судорог.

Морфология и культивирование

· Столбнячная палочка - строгий анаэроб, грамположительная, перетрих, образует споры

· Продуцирует сильный экзотоксин при выращивании на жидких питательных средах. На плотных питательных средах образует прозрачные и слегка сероватые колонии с шероховатой поверхностью.

· Не расщепляет углеводы, обладает протеолитическими свойствами

Антигенная структура

· По Н-антигены выделяют 10 сероваров, О-антиген является общим у всех сероваров.

· Все серовары продуцируют однородный столбнячный экзотоксин

Факторы патогенности

· Столбнячный токсин – основной фактор патогенности. Это белок около 150 кД, состоит из тетанолизина и тетаноспазмина, оказывающих гемолитическое и спастическое действие. К столбнячному токсину чувствительны человек, мыши, морские свинки, кролики и другие животные.

Резистентность и экология

· C. tetani нормальный обитатель кишечника человека и животных, попадает в почву, где в виде спор может сохраняться десятилетиями.

· Споры устойчивы к дезинфектантам, при кипячении погибают через 50- 60 минут.

Эпидемиология

· Столбняк распространён повсеместно, вызывает спорадическую заболеваемость с высокой летальностью

· Заражение происходит при попадании спор при ранениях (боевых, производственных, бытовых), обморожениях, ожогах, через операционные раны, при инфицировании пуповины (столбняк новорождённых).

· Больной не заразен для окружающих.

Патогенез

· Главный патогенетический фактор – столбнячный токсин. Из места размножения возбудителя (рана) он распространяется по кровеносным, лимфатическим сосудам, нервным стволам, вызывая поражение нервной системы. Поражаются нервные окончания синапсов, секретирующие медиаторы (ацетилхолин и другие вещества), нарушая проведение импульсов по нервным волокнам. При столбняке поражается не только нервная система, в патологический процесс вовлекаются практически все системы организма.

Клиническая картина

· Инкубационный период составляет 6 -14 дней. У больных наблюдается спазм жевательных мышц, затруднённое глотание, напряжение мышц затылка, спины (туловище принимает дугообразное положение – опистотонус), судороги мышц всего тела, повышенная чувствительность к различным раздражителям. Заболевание протекает при повышенной температуре тела и ясном сознании.

Иммунитет

· После перенесения инфекции иммунитет не вырабатывается.

· От матери к плоду передаётся непродолжительный пассивный антитоксический иммунитет.

Микробиологическая диагностика

· При столбняке яркая клиническая картина. Бактериологические исследования проводят лишь для подтверждения клинического диагноза. Исследуют материал из раны, воспалительных очагов, кровь, секционный материал; с профилактичекой целью исследуют шовный и перевязочный материал.

· Биопроба на мышах.

Лечение и профилактика

· Для лечения применяют противостолбнячную антитоксическую сыворотку или противостолбнячный иммуноглобулин человека

· Для профилактики проводят: хирургическую обработку раны, введение столбнячного анатоксина и человеческого противостолбнячного иммуноглобулина.

16. Коринобактерии, классификация. Характеристика биологических свойств возбудителя дифтерии, факторы патогенности, патогенез дифтерии. Иммунитет и методы его выявления. Лабораторная диагностика, специфическая профилактика и терапия.

Дифтерия – острое инфекционное заболевание, вызываемое Corynebacterium diphtheriae, характеризующееся токсическим поражением организма, преимущественно сердечно-сосудистой и нервной систем, а также местным воспалительным процессом с образованием фибринозного налета (преимущественно на миндалинах)

Характеристика коринебактерий:

Семейство – Corynebacteriaceae (от греч. coryne – булава).

Род - Corynebacterium

Вид - Corynebacterium diphtheria – возбудитель дифтерии; выделяют биологические

варианты: gravis и mitis;

Другие представители коринебактерий являются условно-патогенными представителями микрофлоры организма человека и вызывают различные гнойно-воспалительные процессы.

• Морфологические и тинкториальные свойства: неподвижные, грамположительные, прямые или слегка изогнутые палочки с булавовидными утолщениями на концах (зёрна волютина), окружённые микрокапсулой

Культуральные свойства С. diphtheriae

Факультативно-анаэробные

Оптимальная температура 36-37°С; рН – 7.4 – 7.8

Нуждаются в факторах роста (аминокислоты, витамины, ионы металлов): свернутая сыворотка, кровяной агар

Выращивается на средах с теллуритом калия или натрия, ингибирующего рост сопутствующей микрофлоры: дифтерийная палочка дает колонии черные или темно-серые за счет восстановления металла На плотных средах дают рост в виде «цветка маргаритки»

В жидких средах образуют помутнение и осадок.

Способны образовывать L- и фильтрующиеся формы.

Способны образовывать бактериоцины (корицины)

Антигенные свойства коринебактерий:

У C. diphtheriae выделяют О- и К-Ag

О-Ag коринебактерий преимущественно представлены межвидовыми Ag

Поверхностные термолабильные К-Ag обеспечивают видовую специфичность и проявляют выраженную иммуногенность (около 58 биоваров).

Факторы патогенности возбудителя дифтерии:

Факторы адгезии, колонизации и инвазии (пили, микрокапсула, гиалуронидаза, нейраминидаза, протеаза) .

Токсический гликолипид клеточной стенки, оказывающий разрушающее действие на клетки ткани в месте размножения возбудителя.

Экзотоксин - гистотоксин (блокада синтеза белка на рибосомах); обладает тропизмом к мембране клеток миокарда, паренхимы сердца, надпочечников. нервных ганглиев; Особенности синтеза дифтерийного токсина клетками возбудителя: токсический полипептид контролируется генами возбудителя, транспортный полипептид (отвечает за доставку токсина к клеткам-мишениям) контролируется генами профага; следовательно, только лизогенные клетки могут обладать токсигенностью.

ПАТОГЕНЕЗ ДИФТЕРИИ

Адгезия возбудителя к эпителию миндалин, реже гортани, трахеи. полости носа колонизация и инвазия в ткани продукция экзотоксина (токсемия) развивается фибринозно-некротическое поражение тканей-мишеней воспаление (образуются фибринозные пленки, плотно спаянные с подлежащими тканями, способные вызвать асфиксию –удушение)

ИММУНИТЕТ ПРИ ДИФТЕРИИ

Иммунитет стойкий, преимущественно, антитоксический

Антибактериальные антитела не обладают протективными (защитными) свойствами (не препятствуют повторному заражению)

СПЕЦИФИЧЕСКОЕ ЛЕЧЕНИЕ ДИФТЕРИИ

При лечении дифтерии обязательно используется антитоксическая сыворотка (лошадиная ) или антитоксический иммуноглобулин (донорский)

ИММУНОПРОФИЛАКТИКА ДИФТЕРИИ

Создание искусственного иммунитета обеспечивается: вакцинами АКДС, АКДС-М,

АДС, АДС-М у детей и подростков; у взрослых – дифтерийным анатоксином.

МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ ДИФТЕРИИ

1. Микроскопический – обнаружение в мазках из зева или из чистой культуры типичных дифтерийных палочек;

2. Бактериологический – посев патологического материала (мазки из зева и носа, фибриновые пленки) на теллуритовый кровяной агар с последующей идентификацией на жидких средах Гисса и определением токсигенности в реакции преципитации в агаре

3. Серологический – реакция непрямой гемагглютинации (РНГА) с парными сыворотками; РНГА может использоваться для оценки антитоксического иммунитета (диагностический титр 1:40)

Вакцины:

1. Коклюшно-дифтерийно-столбнячная адсорбированная жидкая (АКДС и АКДС-М). взвесь убитых коклюшных микробов и очищенных дифтерийного и столбнячного анатоксинов, сорбированных на гидрокисиде алюминия. Вызывает выработку антител и В-клеток иммунной памяти. Профилактика коклюша,

дифтерии, столбняка у детей в возрасте до 3 лет.

2. Коклюшно-дифтерийно-столбнячно-полиомиелитная«Тетракок» (Франция). взвесь убитых коклюшных Микробов и очищенных дифтерийного и столбнячного анатоксинов, сорбированных на гидрокисиде алюминия и инактивированная полиомиелитная вакцина 1,2,3 типов. Вызывает выработку антител и В-клеток иммунной памяти. Профилактика коклюша, дифтерии, столбняка и Полиомиелита.

Анатоксины:

3. Дифтерийно-столбнячный очищенный адсорбированный (АДС и АДС-М анатоксины). смесь очищенных анатоксинов возбудителей дифтерии и столбняка, сорбированных на

гидроксиде алюминия. Вызывает выработку антител и В-клеток иммунной памяти. Профилактика дифтерии и столбняка у детей до 6 лет.

4. Дифтерийный очищенный адсорбированный (АД и АД-М). очищенный дифтерийный

анатоксин, сорбированный на гидроксиде алюминия. Вызывает выработку антител и В-клеток иммунной памяти. Профилактика дифтерии у детей старше 6 лет и взрослых.

Сывороточные препараты (лечебные):

5. Противодифтерийная лечебная лошадиная очищенная концентрированная

жидкая. белковая фракция сыворотки крови лошадей, гипериммунизированных

дифтерийным анатоксином, содержит антитоксические антитела иммуноглобулины сыворотки крови доноров, иммунизированных дифтерийным анатоксином (содержит

антитоксические антитела). Нейтрализация дифтерийного токсина в организме больного. лечение дифтерии.

6. Противодифтерийный донорский антитоксический иммуноглобулин. белковая фракция

сыворотки крови лошадей, гипериммунизированных дифтерийным анатоксином, содержит антитоксические антитела иммуноглобулины сыворотки крови доноров, иммунизированных дифтерийным анатоксином (содержит антитоксические антитела). Нейтрализация дифтерийного токсина в организме больного. лечение дифтерии (диагностические)

7. Дифтерийная антитоксическая для реакции преципитации (кроличья). антитоксические

антитела сыворотки кроликов, иммунизи- рованных дифтерийным анатоксином. Реакция преципитации в агаре (бактериологический метод диагностики). для определения токсигеннности возбудителя дифтерии

17. Микобактерии, классификация, характеристика биологических свойств возбудителя туберкулеза, виды микобактерий, факторы патогенности. Иммунитет, его особенности, методы микробиологической диагностики, специфическая профилактика туберкулеза.

Туберкулёз (от лат. tuberculum – бугорок) - хроническая инфекция человека и животных, характеризующаяся образованием специфических воспалительных изменений, часто имеющих вид маленьких бугорков и проявляющаяся поражением органов дыхания, лимфатических узлов, костей, суставов, кожи, мочеполовых органов и др.

Характеристика микобактерий:

• Семейство – Mycobacteriaceae

• Род - Mycobacterium

• Род Mycobacterium включает в настоящее время около 100 видов МБ, из них патогенные - M.tuberculosis, M.bovis, M.africanum M.leprae, остальные условно- патогенные и сапрофитные

Морфологические и тинкториальные свойства: грамположительные, неподвижные, полиморфные (от длинных до кокковидных форм), прямые или изогнутые палочковидные бактерии. Длиной от 1 до 10 мкм и шириной от 0,2 до 0,6 мкм.

Культуральные свойства микобактерий туберкулеза:

_ Строгие аэробы

_ Требовательны к питательным средам: необходимы аминокислоты, витамины и пр. (среда Ливенштейна-Йенсена содержит глицерин, картофельный крахмал, аминокислоты, яичный желток, малахитовый зеленый для задержки роста сопутствующей микрофлоры)

_ Растут медленно (2-3 недели)

_ Колонии кремового цвета, сухие, морщинистые, трудно снимаются с агара

Особенности химического состава микобактерий: липиды составляют более 40 % от массы клетки; Липидная фракция содержит: *жирные кислоты и их эфиры (миколевая, туберкулостеариновая, фтиоидная);*фосфатиды;*воска (воск Д)*гликолипиды (корд - фактор)

• Особенности химического состава микобактерий определяют следующие свойства:

_ Устойчивость к кислотам, щелочам и спирту

_ Трудная окрашиваемость красителями

_ Относительно высокая устойчивость к высушиванию и действию солнечных лучей

_ Устойчивость к действию обычных дезинфицирующих веществ

_ Высокая гидрофобность

_ Патогенность туберкулёзных бактерий

• Устойчивость микобактерий туберкулеза:

_ В молоке погибает через 15-20 минут при температуре 600С

_ В мокроте сохраняется до часа при аналогичной температуре

_ При кипячении погибает через 5 минут

_ Прямой солнечный свет действует губительно через 45-55 минут

_ Рассеянный свет – через 8-10 суток

_ Хорошо сохраняется при высушивании (до нескольких недель)

_ Обычные химические дезинфектанты относительно мало эффективны (5% р-р фенола убивает M.tuberculosis через 5-6 часов)

• Антигенные свойства возбудителя туберкулеза:

_ В антигенном отношении однороден

_ Носители антигенных свойств: липиды (выполняют функцию адъювантов), полисахариды, корд-фактор

_ Основной носитель антигенных свойств: белок – туберкулин; вызывает в организме иммунный ответ (гиперчувствительность замедленного типа - ГЗТ); используется в качестве диагностического препарата (туберкулиновая проба Манту)

• Патогенность возбудителя туберкулеза:

_ Патогенность связана с химическим составом клетки

_ Корд-фактор препятствует фагоцитозу, нарушает функцию митохондрий, тормозит миграцию лимфоцитов, способствует формированию «жгутов» и «кос»

_ Жирные кислоты, воск Д и пр. компоненты обладают токсическими свойствами

ПАТОГЕНЕЗ ТУБЕРКУЛЕЗА

Микобактерии при вдыхании попадают на слизистую дыхательных путей

Происходит захват возбудителя фагоцитами (но фагоцитоз незавершенный)

Фагоциты мигрируют в лимфоузлы корня легкого, где развивается воспаление в виде

гранулемы (бугорка - туберкулы): в центре – творожистый некроз и возбудитель, вокруг –

эпителиоидные клетки и гигантские многоядерные клетки Пирогова-Лангханса, по

периферии – лимфоциты, плазмоциты и моноциты

Через 2-3 недели после попадания возбудителя в организм, развиваются защитные

реакции (ГЗТ) и первичный очаг постепенно заживает.

При недостаточной выраженности защитных реакций организма микобактерии

размножаются в первичном очаге: развивается некроз и формируется полость (каверна);

гематогенная диссеминация микобактерий контакт с бронхом

с оседанием в органах (легких, почках, костях и т.д.)

и формированием множественных очагов выделение возбудителя

с мокротой

ИММУНИТЕТ ПРИ ТУБЕРКУЛЕЗЕ

· Клеточный - гиперчувствительность замедленного типа (ГЗТ)

· Нестерильный

· Основа иммунной защиты - незавершенный фагоцитоз

· Антитела - «свидетели» инфекционного процесса

ЛАБОРАТОРНЫЕ МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ ТУБЕРКУЛЁЗА:

1. Микроскопический – микроскопия мокроты, окрашенной по Цилю-Нильсену; люминисцентная микроскопия.

2. Бактериологический – посев мокроты на элективные среды (Левенштейна-Йенсена) с последующей идентификаций выделенных микобактерий. Особенности бактериологического метода при диагностики туберкулеза: длительность исследования; предварительная обработка мокроты серной кислотой с целью подавления сопутствующей микрофлоры; определение чувствительности к химиотерапевтическим препаратам и антибиотикам только методом серийных разведений;

3. Биологический – заражение морских свинок материалом от больного; через 5-10 суток развивается лимфаденит, через 3-4 недели – положительная туберкулиновая проба; через 1-2 месяца – генерализованный m ___K_процесс приводит к гибели животного

4. Иммунологический – выявление антигенов микобактерий из патологического материала: иммунофлюоресценция (ИФ), иммуноферментный анализ (ИФА).

5. Аллергический – выявление ГЗТ с целью отбора контингента на ревакцинацию; с целью выявления заболевших и инфицированных. Суть метода: введенный внутрикожно очищенный туберкулин вызывает ГЗТ; размер папулы и гиперемии зависит от выраженности защитных реакций, что позволяет судить о выраженности противотуберкулезного иммунитета и возможного заболевания.

6. Генетический – полимеразная цепная реакция (ПЦР)

ИММУНОПРОФИЛАКТИКА ТУБЕРКУЛЕЗА

• Плановая массовая иммунизация живой вакциной БЦЖ - BCG (Bacille Calmette-Guerin) на 5-й день с момента рождения; механизм заключается в формировании нестерильного иммунитета

• Ревакцинация – 7 – 12 – 17 – 22 и 27-30 лет (лица, отрицательно реагирующие на пробу Манту)

Иммунобиологические препараты, используемые для диагностики и профилактики

Туберкулеза

1. Вакцина БЦЖ. Живые микобактерии аттенуированного штамма БЦЖ-I. Нестерильный

иммунитет; гиперчувствительность замедленного типа. иммунизация детей и взрослых.

2. Противотуберкулезные люминисцентные сыворотки. Антитела сывороки кроликов, меченые флюорохромом. Связывание с антигенами туберкулезной палочки. Выявление

туберкулезных палочек в патологическом материале методом иммунофлюоресценции.

3. Противотуберкулезные сыворотки, меченные ферментом. Антитела сыворотки кроликов, меченные ферментом. Связывание с антигенами туберкулезной палочки. Выявление антигена туберкулезных палочек в патологическом материале с помощью

Иммуноферментного анализа.

4. Очищенный туберкулин (ППЛ-Л), жидкий. Раствор туберкулина в 0,85% растворе хлорида натрия с фосфатным буфером. В месте введения вызывает гиперчувствительность замедленного типа. для отбора контингента для ревакцинации и выявления инфицированных туберкулезом лиц.

18. Микобактерии лепры, биологические свойства, факторы патогенности, лабораторная диагностика.

Род Mycobacterium M. Leprae

Возбудитель лепры – хроническое инфекционное заболевание, встречающееся только у людей. Характеризуется генерализацией процесса, поражением кожи, слизистых оболочек, переферических нервов и внутренних органов.

Прямые или слегка изогнутые палочки. В пораженных тканях располагаются внутри клеток.ю образую плотные шаровидные скопления – лепрозные шары. Кислотоустойчивы, окрашиваются по Цилю-Нильсену в красный цвет. На искусственных питательных средах не выращиваются.

Антигены:

Термостабильный полисахаридный (групповой для микобактерий)

Термолабильный белковый (специфичный для лепрозных бактерий)

Патогенность и патогенез:

Высокое содержание липидов. Инкубационный период от 3-5 лет до 20-35. Заболевание развивается медленно, в течение многих лет. 2 клинические формы:

1. Лепроматозная: на лице, предплечьях, голени множественные инфильтраты-лепромы, в которых содержится большое число возбудителей. В дальнейшем лепромы распадаются с образованием медленно заживающих язв. Поражаются кожа, слизистые оболочки, лимфатические узлы, нервные стволы, внутренние органы.

2. Туберкулоидная. Поражается кожа, нервные стволы и внутренние органы реже. Высыпания на коже в виде мелких папуо сопровождаются анестезией. В очагах поражений возбудители обнаруживаются в незначительном количестве.

Иммунитет:

По мере развития болезни снижается число и ативность Т-лимфоцитов, утрачивается способность реагировать на антигены микобактерий лепры. Реакция Мицуды на введение в кожу лепромина у больных лепроматозной формой отрицательная. У здоровых лиц и у больных туберкулоидной формой – положительная. Эта проба отражает тяжесть поражения Т-лимфоцитов и используется как прогностическая, характеризующая эффект лечения. Гуморальный иммунитет не нарушается. В крови больных обнаруживаются в высоких титрах антитела к микобактериям лепры, но они не обладают протективными свойствами.

Источник: больной человек. Заражение происходит при длительном и тесном контакте с больным.

Лабораторная диагностика: бактериоскопический метод. Исследуют соскобы с пораженных участков кожи и слизистых оболочек.

Профилактика и лечение: специфической профилактики нет. Для лечения применяют сульфоновые препараты (дапсон, диацетилсульфон, сесульфон и др.) вместе с десенсибилизирующими средствами и биостимуляторами.