Задача №38

Лаборант приготовил три раствора: глюкозы, сахарозы, мальтозы и перепутал этикетки на флаконах с реактивами.

Задания

1. Предложите качественные реакции и последовательность, с помощью которых можно идентифицировать эти растворы.

2. Назовите мономеры и связи, участвующие в образовании сахарозы и лактозы.

3. Расскажите принцип метода обнаружения глюкозы.

4. Расскажите принцип метода обнаружения мальтозы.

Эталон ответа к задаче № 38

1. Реакция Троммера, проба Велька. Реакция Троммера будет отрицательной с сахарозой, а с глюкозой и лактозой – положительной ( так можно определить в каком флаконе находится раствор с сахарозой). С оставшимися двумя растворами надо проделать пробу Велька – она положительна только с мальтозой. Раствор, который даст отрицательную пробу Велька, содержит глюкозу.

2. Сахароза построена из мономеров (+), D- глюкозы и (-), D- фруктозы; лактоза из (+), D- глюкозы и (+), D-галактозы. В обоих дисахаридах мономеры связаны альфа-гликозидными связями.

3. Глюкоза в щелочной среде при нагревании восстанавливает окись меди в закись, а сама окисляется до глюконовой кислоты. При этом образуется кирпично-красный осадок.

4. Проба Велька. Мальтоза в щелочной среде при нагревании с аммиаком даёт окрашенное соединение красного цвета.

Задача №39

В лабораторию поступила моча пациента И. с целью обнаружения в ней углеводов. Были проведены качественные пробы: Селиванова, Биаля, Велька, Гайнеса –Акимова. Из проделанных проб была положительной только проба Селиванова.

Задания

1. Назовите углевод, обнаруженный в моче пациента И.

2. Расскажите принцип пробы Селиванова.

3. Дайте краткую характеристику углеводу, обнаруженному в моче.

4. Назовите причину, по которой данный углевод нельзя обнаружить с помощью реакции Троммера.

Эталон ответа к задаче № 39

1. Фруктоза.

2. При нагревании фруктозы с резорцином в кислой среде образуются соединения, окрашенные в красный цвет.

3. (-), D-фруктоза (фруктовый сахар) составная часть свекловичного сахара, является кетозой, хорошо растворяется в воде, содержится в большом количестве во фруктах, мёде, семенной жидкости. Фосфорный эфир фруктозы в организме является основным промежуточным продуктом в метаболизме глюкозы.

4. Реакция Троммера положительна у углеводов, которые имеют свободную альдегидную группу. Фруктоза не обладает восстановительными свойствами, так как не имеет альдегидной группы.

Задача № 40

В аналитической характеристике к набору реактивов для определения общего холестерина указан коэффициент вариации не более 7%. На практическом занятии бригада в количестве 9 студентов с этим набором определяла общий холестерин в контрольной сыворотке «HYMATROL N». Каждый студент проводил по одному определению. Данные результатов:

1- 4.53ммоль/л.; 2- 4,32ммоль/л; 3- 4,12ммоль/л; 4- 5,0ммоль/л; 5- 4,71ммоль/л; 6- 4,92ммоль/л; 7- 4,32ммоль/л; 8- 4,75ммоль/л; 9- 4,45ммоль/л.

Задания

1. Оцените результаты, применяя терминологию.

2. Рассчитайте коэффициент вариации и оцените воспроизводимость.

3. Дайте общую характеристику холестерину.

4. Расскажите этапы обработки химических пробирок многоразового использования для биохимических исследований.

Эталон ответа к задаче № 40

1. Везде нормохолестеринемия.

2. Хср.= 4,568; S= 0,296; V= 6,48%. Воспроизводимость хорошая.

3. Холестерин циклический одноатомный спирт, нерастворим в воде. Входит в состав клеточной мембраны, препятствует гемолизу эритроцитов, является изолятором нервных клеток, предшественником желчных кислот, стероидных гормонов, витамина D_3.

4. Содержимое пробирок сливают в ёмкость с дез. раствором (3% аламинол )- экспозиция 1 час; пробирки кипятят в растворе детергента, затем промывают каждую пробирку проточной водой 8-12 раз, промывают в дистиллированной воде 2-3 раза, высушивают в сушильном шкафу.

Задача № 41

В кардиореанимации находился больной З. с диагнозом обширный инфаркт миокарда. При исследовании ферментного спектра, в частности ЛДГ были получены следующие результаты: ЛДГ общая – 185 Е/л.; мочевино-стабильная фракция ЛДГ – 118,4 Е/л.

Задания

1. Дайте общую характеристику ферменту ЛДГ.

2. Рассчитайте процентное соотношение сердечных фракции ЛДГ и оцените результаты.

3. Назовите единицы активности ферментов и поясните что понимают под единицей активности фермента.

4. Перечислите оптимальные условия протекания ферментативной реакции.

Эталон ответа к задаче № 41

1. ЛДГ цитозольный цинксодержащий фермент, обратимо катализирующий окисление L- лактата в ПВК. Коферментом ЛДГ является НАД⁺, играющий роль акцептора водорода. Фермент присутствует в почках, сердце, скелетных мышцах, поджелудочной железе, селезёнке, печени, лёгких, эритроцитах. В сыворотке крови выявлено пять изоферментов ЛДГ₁, ЛДГ₂, ЛДГ₃, ЛДГ₄, ЛДГ_5. Каждый из изоферментов представляет собой тетрамер, образованный субъединицами H и M.

2. Гиперферментемия. Сердечные фракции ЛДГ составляют – 64%, а в норме должны составлять 25-36%.

3. Международные единицы – (U) юнит, система СИ – катал. Под единицей активности фермента понимают, то количество субстрата, которое может преобразовать фермент в единицу времени.

4. Насыщение фермента субстратом, оптимум температур (35ºC - 45ºC), оптимум рН, наличие активаторов.

Задача № 42

Показатели оптической плотности при определении общего холестерина следующие: Еоп. – 0,126 ; Ест. – 0,159; концентрация ХС в стандартном растворе – 5,18ммоль/л. Показатели оптической плотности при определении холестерина ЛПВП в той же сыворотке: Еоп – 0,134 ; Ест – 0, 142 ; концентрация ХС в стандартном растворе – 1,3ммоль/л.

Задания

1. Рассчитайте концентрацию общего холестерина, холестерина ЛПВП, индекс атерогенности.

2. Оцените результаты.

3. Дайте характеристику ЛПВП и поясните их функцию в организме.

4. Расскажите принцип определения ЛПВП.

Эталон ответа к задаче № 42

1. Общий ХС: С_опыт = ( Е_опыт: Е_{стандарт}) • С_{стандарт} =0,126 : 0,159 • 5,18 = 4,1(ммоль/л);

ХС ЛПВП: С_опыт = ( Е_опыт: Е_{стандарт}) • С_{стандарт} =

0,134 : 0,142 • 1,35 =1,22(ммоль/л);

ИА = (Об.ХС ЛПВП – ХС ЛПВП) : ХС ЛПВП

=(4,1 - 1,22) : 1,22 = 2,36

2. Все показатели в норме.

3. ЛПВП – надмолекулярные комплексы, состоящие из липидов и апопротеинов. Белков в ЛПВП содержится 35-50%. ЛПВП участвуют в транспорте холестерина от клеток в печень для утилизации.

4. Хиломикроны, ЛПОНП, ЛПНП осаждаются фосфорновольфрамовой кислотой и ионами магния; в супернатанте остаются ЛПВП, в которых определяют ХС ЛПВП энзиматическим методом.

Задача № 43

Больной Т. находился в нефрологическом отделении Д. с нефротическим синдромом. Лабораторные данные следующие:

Общий белок – 58г/л; мочевина 23ммоль/л; креатинин 167мкмоль/л.; белковые фракции – значительное уменьшение содержания альбумина, повышение концентрации альфа-2 и бета – глобулинов, умеренное снижение гамма-глобулинов.

Задания

1. Оцените лабораторные показатели, применяя терминологию.

2. Дайте определение диспротеинемии. Какая патология сопровождает данный тип диспротеинемии?

3. Расскажите принцип электрофореза на плёнках из ацетатцеллюлозы.

4. Назовите методы количественной оценки белковых фракций.

Эталон ответа к задаче № 43

1. Гипопротеинемия, уремия, гиперкреатининемия.

2. Количественное изменение белковых фракций. Данная диспротеинемия свойственна нефротичекому синдрому.

3. Белки, имеющие заряд, передвигаются в электрическом поле к одному из полюсов. Скорость передвижения белков зависит от молекулярной массы белковой молекулы, заряда, носителя и напряжения электрического поля. За одно и тоже время разные белки передвигаются на разные расстояния. После выделения отдельных фракций их исследуют количественно.

4. Количественная оценка белковых фракций может осуществляться колориметрическим методом или с помощью денситометра.

Задача № 44

При проведении внутрилабораторного контроля качества измерялось содержание хлоридов в контрольной сыворотке одной серии в течение 20 дней. Были получены следующие результаты измерения в ммоль/л:

№ П/П	Результат	№ П/П	Результат	№ П/П	Результат
	110	9.	105	16.	107
	100	10.	101	17.	107
	108	11.	101	18.	110
	105	12.	111	19.	105
	105	13.	102	20.	108
	101	14.	110	21.	101
	96	15.	107

Задания

1. Рассчитайте среднее значение (Х_ср); среднеквадратическое отклонение (S); коэффициент вариации (V%).

2. Постройте карту Шухарта и нанесите на неё предупредительные и контрольные границы.

3. Назовите этапы внутрилабораторного контроля качества.

4. Дайте определение сходимости.

Эталон ответа к задаче № 44

1.Х_ср=105ммоль/л,S=4ммоль/л,V%=3,8

117		хср +3S
113		хср +2S
109		хср +1S
105		хср
101		хср -1S
97		хср -2S
93		хср -3S

2.

3. Преаналитический этап. Ааналитический этап. Постаналитический этап.

4.Сходимость - качество измерений, отражающее близость друг к другу результатов измерений, выполняемых в одинаковых условиях.

Задача № 45

В конце рабочего дня в лабораторию была доставлена с опозданием пробирка с цельной кровью для определения глюкозы. Лаборант оставил пробирку в холодильнике до следующего дня. Утром он достал кровь из холодильника, отделил сыворотку и приступил к определению глюкозы вместе с вновь поступившими пробами.

Задания

1. Оцените действия лаборанта.

2. Дайте определение анаэробному распаду глюкозы, перечислить его виды.

3. Дайте определение глюконеогенеза и назовите источники этого процесса.

4. Назовите гормоны, регулирующие углеводный обмен.

Эталоны ответов к задаче № 45

1. Лаборант должен был отделить сыворотку от эритроцитов, как только доставили кровь, а сыворотку можно было оставить в холодильнике до следующего дня. При естественном гемолизе, который имеет место в данном случае, из эритроцитов выходят различные ферменты, в том числе и глюкозооксидаза, она окисляет сывороточную глюкозу, уменьшая тем самым ее количество. Результат окажется ниже истинного.

2. Анаэробный распад глюкозы осуществляется без доступа свободного кислорода при гипоксии и условно может быть разделен на спиртовой, молочнокислый, уксуснокислый.

3. Глюконеогенез – это процесс синтеза углеводов из неуглеводных компонентов, которыми могут быть пируват, лактат, глицерол, гликогенные аминокислоты.

4. Углеводный обмен регулируют инсулин, понижающий уровень глюкозы в крови и контринсулярные гормоны, повышающие уровень глюкозы в крови

глюкагон, глюкокортикоиды, адреналин,тироксин

Задача № 46

В инструкции к набору реактивов для определения глюкозы предусмотрено колориметрирование при длине волны 540 нм. Лаборант колориметрировал пробы при длине волны 405 нм.

Задания

1. Оцените действия лаборанта

2. Объясните влияние инсулина на уровень глюкозы в крови.

3. Расскажите о действии контринсулярных гормонов и назовите их.

4. Объясните, как интерпретировать результаты теста толерантности к глюкозе.

Эталоны ответов к задаче № 46

1. При колориметрировании необходимо устанавливать длину волны, указанную в инструкции. Длина волны всегда подбирается таким образом, чтобы оптическая плотность раствора была максимальной. Лаборант выбрал ошибочный светофильтр, следовательно, можно предположить изменения результатов, которые будут значительно меньше истинных.

2. После выброса инсулина в кровь уровень глюкозы в ней снижается, т.к. инсулин изменяет проницаемость клеточных мембран для глюкозы, увеличивает её способность поступать в клетки, где происходят её дальнейшие превращения.

3. Контринсулярные гормоны объединены в группу соединений, активность которых направлена против действия инсулина. На самом деле контринсулярные гормоны способствуют накоплению глюкозы в кровяном русле, чтобы в дальнейшем она могла поступить в клетки. Организм может существовать в условиях гипергликемии, а от гипогликемии погибает через 5 минут, поэтому инсулин единственный, а его антагонистов – много. К группе контринсулярных гормонов относятся глюкагон, адреналин, кортизол. Кроме этого апосредованно на выработку контринсулярных гормонов влияют АКТГ, ТТГ и др.

4.Гликемические кривые могут быть следующих типов:

Нормогликемические – уровень глюкозы натощак в норме, через 1 час после нагрузки не превышает 40% исходного и через 2 часа возвращается к норме.

Гипергликемические – уровень глюкозы натощак - верхняя граница нормы или незначительная гипергликемия, через час после нагрузки - концентрация глюкозы повышается на 80-100% от исходной, через 2 часа после нагрузки медленное снижение, но не возвращается к исходному уровню. Возможна глюкозурия.

Гипогликемические – уровень глюкозы натощак – нижняя граница нормы или гипогликемия, все значения получаемые после нагрузки, не превышают средней нормы.