Занятие 3 Белки крови. Методы разделения белков.

Цель занятия: познакомить студентов с унифицированными методами определения белка в плазме крови, с клиническим значением этих методов

Вопросы к занятию

1.Многообразие белков. Глобулярные и фибриллярные белки, простые и сложные.

2.Классификация белков по их биологическим функциям.

3.Классификация белков на семейства (сериновые протеазы, иммуноглобулины).

4.Методы количественного определения белков.

5.Электрофорез белков сыворотки крови на бумаге, в ПААГ и на других носителях.

7.Белковый спектр крови в норме и патологии.

8.Иммуноглобулины, особенности строения, избирательность, взаимодействие с антигеном. Классы иммуноглобулинов, особенности строения и функционирования.

9. Функции простых белков (альбуминов, гистонов, глобулинов).

Практическая работа

Количественное определение белка в сыворотке крови биуретовым методом

Принцип метода. Реакция основана на том, что в щелочной среде в присутствиеи солей меди белки дают фиолетовое окрашивание, обусловленное образованием комплекса ионов меди с пептидной группировкой. Интенсивность окраски комплекса, которая зависит от количества белка в исследуемой пробе, измеряется на фотоэлетроколориметре (ФЭКе).

Ход работы. К 5 мл биуретового реактива, представляющегособойсмесь сульфата меди, сегнетовой соли, йодистого калия и щелочи, добавить 0,1 мл исследуемого белка. Через 30 минут пробу колориметрировать на ФЭКе в кювете шириной 10 мм при зеленом светофильтре против контроля, который готовят путем добавления к 5мл биуретового реактива 0,1 мл 0,9% NaCI. Количество белка в растворе определить по калибровочному графику.

Результат.

Вывод.

Причины развития гипопротеинемий:

- Недостаточное поступление белка с пищей (недоедание, голодание, опухоли, сужение пищевода, нарушение пищеварения и всасывания белка в ЖКТ. Это алиментарная гипопротеинемия.

- Понижение процессов биосинтеза белка (различные заболевания, лечение, приводящее к нарушению белоксинтезирующей функции).

- Потеря белков при острых и хронических кровопотерях, при увеличении проницаемости, при кровоизлияниях, отеках.

- Дефектопротеинемия, т.е. иногда встречающееся у больных, как правило, наследственные, нарушения синтеза отдельных белков. Например, врожденное отсутствие или недостаточное образование церулоплазмина в крови при болезни Вильсона.

- Потеря белка с мочой при патологии почек.

Причины развития гиперпротеинемий:

Следует заметить, что гиперпротеинемия – явление сравнительно редкое. Кратковременная относительная гиперпротеинемия наблюдается при сгущении крови из-за значительных потерь жидкости (профузные поносы, неукротимая рвота, усиленное потоотделение).

Незначительная абсолютная гиперпротеинемия наблюдается при токсических отравлениях РЭС, в клетках которой синтезируются глобулины. Стойкая гиперпротеинемия до 120 г/л и выше встречается при миеломной болезни, когда в плоских костях черепа появляются дополнительные очаги образования «ненормальных», патологических белков-парапротеинов.