- •Балашовский институт (филиал)
- •Оглавление
- •1 Влияние факторов окружающей среды на микроорганизмы
- •3 МикробиологическИе исследованиЯ водНОй среды
- •Экологическая классификация категорий качества питьевых вод, расфасованных в емкости (по СанПиН 2.1.41116–02)
- •Методы отбора, хранения и транспортировки воды (по мук 4.2.1018–01)
- •Санитарно-экологические нормативы качества и исследования воды
- •4 МикробиологическИе исследованиЯ воздуха и объектов окружающей среды
- •5 МикробиологическИе исследованиЯ почвЕнной среды
- •6 МикробиологическИе исследованиЯ пищевых продуктов
- •7 МикробиологическИе исследованиЯ продуктов детского питания
- •8 Правила сбора и хранения отходов лечебно-профилактических учреждений
- •9 СоВременные методики эколого-микробиологических исследований окружающей среды
- •10 Тесты для самоконтроля
- •11 Ответы на вопросы тестов
- •Библиографический список
- •Приложение
- •(По СанПиН 2.3.2.1078–01)
- •(По СанПиН 2.3.2.1078–01)
- •(По СанПиН 2.3.2.1078–01)
- •410031, Г. Саратов, ул. Московская, 62
(По СанПиН 2.3.2.1078–01)
Наимено-вание продукта
|
Возраст детей
|
Обработка перед употреб-лением
|
Отсутствие в массе продукта (в г) |
Васillиs cereus, КОЕ/г, не более |
Плесневые грибы, КОЕ/г, не более |
Дрожжи, КОЕ/г, не более |
Ацидофильные бактерии, КОЕ/г, не менее | |||
БГКП |
Еscherichia соli |
Патогенные микроорганизмы, в т.ч. сальмонеллы |
Staphylococcus aureus | |||||||
Ацидофильные продукты | ||||||||||
Росток |
С первых дней жизни до года |
Восстанов-ление при 45–50 °С |
1,0 |
10,0 |
100,0 |
10,0 |
100,0 |
50,0 |
10,0 |
1×105 |
Росток-1 |
С первых дней жизни до 3-х месяцев |
1,0 |
10,0 |
100,0 |
10,0 |
100,0 |
50,0 |
10,0 |
1×105 | |
Продукты с содержанием бифидобактерий* | ||||||||||
Бифидолакт |
С первых дней жизни до года |
Восстанов-ление при 45–50 °С |
1,0 |
10,0 |
100,0 |
10,0 |
100,0 |
50,0 |
10,0 |
– |
Примечание: *в «Бифидолакте» бифидобактерий содержится не менее 1×106 КОЕ/г.
таблица 7 – Этапы эколого-микробиологических исследований проб воды
ОМЧ |
БГКП |
Споры сульфитредуцирующих клостридий |
Колифаги |
Исследуемую пробу воды (300,0 мл) разбивают на З объема по 100,0 мл и фильтруют. Фильтры помещают на среду Эндо. Чашки инкубируют при 37 °С в течение 24 часов |
При анализе засевают 3–4 десятикратных объема (3,0; 30,0; 300,0 мл) на среду Эндо |
Пробы объемом 20,0 мл прогревают на водяной бане и фильтруют, фильтры помещают в чашки Петри с тонким слоем железосульфитного агара. Посевы культивируют при 44 °С в течение 16–18 часов |
100,0 мл разливают по 20,0 мл в чашки Петри с МПА и с культурой Scherichia coli. Чашки с застыв-шим агаром помещают дном вверх в термостат и инкубируют при 37 °С в течение 18–24 часов |
таблица 8 – Начальные этапы эколого-микробиологических исследований проб воздуха
ОМЧ |
Staphylococcus aureus |
Дрожжи, грибы |
Производят забор 1,0 м3 воздуха и засевают на 2 %-ный питательный мясопептонный агар. Посевы инкубируют при 37 °С в течение часа |
Проводят забор 1,0 м3 воздуха и засевают на желточно-солевой агар. Посевы инкубируют при 37 °С в течение 24–48 часов |
Проводят забор 1,0 м3 воздуха и засевают на среду Сабуро. Посевы инкубируют при 37 °С в течение 120 часов (5 дней) |
таблица 9 – Начальные этапы эколого-микробиологических исследований проб почвы
Показатель |
Алгоритм исследований |
ОМЧ |
Из пробы готовят суспензию почвы, берут по 1,0 мл различных разведений и засевают в чашки Петри с МПА. Посевы инкубируют при 37 °С в течение 24 часов. |
БГКП |
Из первого разведения почвенной суспензии (1:10) 10,0 мл и засевают во флаконы с 50,0 мл лактозного бульона среды Кесслера-Свенертона. Посевы инкубируют при 37 °С в течение 24 часов. |
Clostridium perfringens |
Почвенную суспензию титруют путем 10-кратных разведений. Из каждого разведения берут по 1,0 мл и засевают в пробирки 5,0 мл молока. Посевы прогревают на водяной бане при 80 °С в течение 18–20 часов. |
Энтерококки |
В чашки Петри вносят по 0,01 мл разведений почвенной суспензии на среду Калины. Посевы инкубируют 24 часа при 37 °С |
Сальмонеллы |
01–0,5мл взвеси средней пробы засевают на 3–5 чашек с висмут-сульфит агаром, к посевам добавляют 50,0 мл желточного бульона. Посевы инкубируют про 37 °С в течение 24 часов. |
Термофиллы |
Посев производят из разведений (1:10–1:106на 2–3 параллельные чашки Петри с МПА. Посевы инкубируют при 60 °С в течение 24 часов. |
Нитритфи-цирующие бактерии |
Производят посев почвенных разведений (0,1 мл суспензии) на среду Виноградского. Посевы инкубируют при 28 °С в течение 14–15 суток. Первый просмотр на 5-й день. |
Escherichia coli |
Через мембранные фильтры пропускают 5,0–10,0 мл почвенной суспензии первого разведения (1:10). Фильтры помещают на среду Эндо. Посевы инкубируют при 37 °С в течение 24 часов. |
таблица 10 – Начальные этапы эколого-микробиологических исследований пищевых продуктов
Показатель |
Алгоритм исследований |
КМАФАнМ |
Для их определения выбирают разведения, при посевах которых на чашках вырастает не менее 30 и не более 300 колоний. Из каждой пробы делают посев на 2–3 чашки из различных разведений в количестве 1,0 см3в одну чашку с МПА. Посевы инкубируют при 30 °С в течение 72 часов. |
БГКП |
Посев проводят в среду Кесслера с лактозой и поплавком с соблюдением соотношения 1:10. Посевы инкубируют при 30 °С в течение 24 часов. |
Сальмонеллы |
Навеску продукта помещают в фосфатный буфер, учитывая соотношение 1:10 (среды для обогащения), добавляют 0,1 %-ный раствор бриллиантового зеленого и перемешивают, затем инкубируют при 37 °С в течение 24–26 часов, после чего 10,0 см3переносят в пробирку с 10,0 см3магниевой среды. Посевы инкубируют при 37 °С в течение 24 часов. |
Листерии |
Навеску исследуемого продукта массой 25,0 г или объемом 25,0 см3вносят в 225,0 см3среды для обогащения (соотношение 1:10). Посевы инкубируют при 37 °С в течение 24–26 часов, после чего 1,0 г обогащенной навески засевают в бульон Фразера с эскулином в соотношении 1:9. Посевы З7 °С течение 48 часов. |
Протей |
0,5 мл анализируемой взвеси вносят в конденсационную воду свежескошенного МПА. Посевы инкубируют при 37 °С в течение 24 часов. |
Staphylococcus aureus |
10,0 г продукта разводят в фосфатном буфере для обогащения и инкубируют при 37 °С в течение 18–24 часов, после чего 1,0 см3 из пробирки переносят в соленой бульон. Посевы инкуруют при 37 °С в течение 24 часов. |
Clostridium botulinum |
Навеску продукта массой 20,0–25,0 г засевают в пробирку с высоким столбиком среды (анаэробные условия) агара для анаэробов. Посевы инкубируют при 37 °С в течение 24–48 часов. |
Pseudomonas aeruginosa |
100,0 см3исследуемого материала из разведений 1:10 вносят в стеклянный флакон объемом 200,0 см3, содержащим 100,0 см3 МПБ с глюкозой. Первичный посев инкубируют при З7 °С в течение 24–48 часов. |
Escherichia coli |
10,0 г продукта растворяют в колбе с 90,0 см3разбавленного фосфатного буфера ля обогащения и выдерживают в термостате при 37 °С в течение 24 часов, после чего 1,0 см3из колбы засевают в 9,0 см3среды Кесслера с лактозой (посевы инкубируют при 44 °С в течение 24 часов). |
таблица 11 – Начальные этапы эколого-микробиологических исследований продуктов детского питания
Показатель |
Алгоритм исследований |
КМАФАнМ |
По 1,0 см3каждого соответствующего разведения пробы продукта вносят в 2 чашки Петри с МПА. Выбирают те разведения, при которых вырастает не менее 30 и не более 300 колоний. Посевы инкубируют при 37 °С в течение 24 часов. |
БГКП |
10,0 г сухого продукта детского питания растворяют в колбе в 90,0 см3фосфатного буфера для обогащения. На следующий день 1,0 см3засеивают в колбу с 9,0 см3среды Кесслера с поплавком. Посев инкубируют при 44 °С в течение 24 часов. |
Плесневые грибы, дрожжи |
Из каждой пробы продукта делают посев по 1,0 см3продукции или 1,0 см3разведений 1:10 и 1:100 на 2 чашки Петри на среду Сабуро. Посевы инкубируют при температуре 24 °С в течение 120 часов (5 суток). |
Escherichia coli |
10,0 г сухого продукта детского питания растворяют в колбе в 90,0 см3фосфатного буфера для обогащения. Навеску выдерживают в термостате при 37 °С в течение 24 часов, после чего по 1,0 см3из колб засевают в 9,0 см3среды Кесслера с лактозой. Посевы инкубируют при 44 °С в течение 24 часов. |
Staphylococcus aureus |
10,0 г или 1,0г продукта помещают в колбы с 90,0 см3или 9,0 см3фосфатного буфера для обогащения и инкубируют при 37 °С в течение 24 часов, после чего по 1,0 см3смеси переносят в пробирку с соленым бульоном. Посевы инкубируют при 37 °С в течение 24 часов. |
Сальмонеллы |
При посеве продукта соблюдают соотношение массы продукта и буферного раствора 1:10. Смесь помещают в термостат ири 37 °С до 24 часов. Затем 1,0 см3выдержанной в термостате смеси переносят в пробирку с 10,0 см3магниевой среды или среды Мюллера и инкубируют при 37 °С в течение 24 часов. |
Васillиs cereus |
0,1 см сухого продукта детского питания из разведения 1:10 засевают на поверхность питательной среды Донована. Посевы инкубируют при 37 °С в течение 24–26 часов. |
Подписано в печать 10.06.2010
Формат 60х84 1/16. Бумага офсетная. Гарнитура Times.
Усл. печ. л. 6,0. Тираж 300. Заказ 347/2010
_________________________________________________________
Типография ОООп «Орион»