Chastnaya_mikrobiologia

нии дрожжевой формы мелкие, блестящие, выпуклые, иногда складчатые, плотной консистенции, окрашенные в белый, серый, желтый, коричневый цвет. Клетки гриба овальной формы, размером 1,5-3,5мкм, размножаются только почкованием; почки образуются на одном или на двух полюсах, иногда аполярно. Может образовываться псевдомицелий: почкующиеся дрожжеподобные клетки располагаются цепочками и нитями.

Серологический метод - постановка РИФ, РА, РИД и РСК с сывороткой крови больного гистоплазмозом и антигенами возбудителя гистоплазмоза (гистоплазмином, полученным из гифов гриба, или антигенами дрожжевой формы гриба) с целью определения антител к

Histoplasma capsulatum.

Аллергический метод - постановка внутрикожной аллергической пробы с гистоплазмином. Методы иммунодиагностики имеют второстепенное значение в связи с наличием перекрестных реакций и позднего появления положительного результата.

Биопроба - внутрибрюшинное заражение исследуемым материалом белых мышей или золотистых хомячков. Через 1 мес после заражения животных умерщвляют и внутренние органы исследуют микологическим методом с целью выделения и идентификации чистой культуры гриба

Генодиагностика. Разработаны методы ПЦР-диагностики гистоплазмоза.

Кокцидиомикоз

Возбудителем эндемичного микоза - кокцидиоидоза является почвенный гриб Coccidioides immitis, который относится к диморфным грибам класса фикомицетов и встречается в тканевой, паразитарной форме в организме больных, а также в мицелиальной (весьма контагиозной форме) в почве и в чистых культурах на искусственных питательных средах. Заражение кокцидиоидозом происходит при вдыхании артроспор, находящихся в воздухе. Гриб вызывает тяжелые системные микозы у людей в виде гриппоподобного заболевания, кавернозного поражения легких, кожи, подкожной клетчатки, мозговых оболочек и других тканей организма.

Исследуемым материалом являются гной, мокрота, кровь, спинномозговая жидкость, биопсийный (операционный) материал.

Микроскопический метод - исследование нативных и окрашенных (по Романовскому-Гимзе и т.д.) препаратов с целью выявления шаровидных образований (сферул), размером 20-60 мкм, с двухконтурной оболочкой, наполненных мелкими (2-4 мкм) округлыми эндоспорами (рис. 35). Встречаются также разрушенные сферулы. В биопсийном материале обнаруживаются гранулемы, состоящие из полиморфноядерных лейкоцитов, лимфоцитов, эпителиоидных и гигантских клеток.

Рис. 35. Возбудитель кокцидиомикоза (Coccidioides immitis) в исследуемом материале.

131

ются дрожжеподобные почкующиеся клетки, диаметром 2-8мкм, и так называемые «астроидные» тела — грибковые клетки, окруженные эозинофильными комплексами антиген-антитело.

При микроскопическом исследовании обнаруживают также септированный мицелий, размером 10-50 мкм, с характерными конидиями споротриксов в виде гроздей, напоминающих цветки маргаритки, а также небольшие (2-5 мкм), заостренные на концах, овоидные или сигароподобные конидии, расположенные попарно или в виде розеток на концах мицелия.

Для экспресс-диагностики споротрихоза также применяется РИФ.

Микологическое исследование. Для выделения чистой культуры посевы производят на плотные и жидкие питательные среды, которые инкубируют при температуре 250 С или 370 С.

В культурах споротрихум встречается в мицелиальной и дрожжевой формах.

Дрожжевые формы вырастают при температуре 370 С на 4-6 день в виде гладких колоний желтого цвета, в которых при микроскопическом исследовании обнаруживают овал ь- ные и удлиненные толстостенные клетки, размером 1-2х4-8мкм; могут встречаться также круглые почкующиеся клетки, иногда связанные друг с другом длинной клеткой. Позднее колонии медленно увеличиваются в размерах, становятся серыми, складчатыми, редко сливаются.

Колонии гриба вырастают на 20 —25-е сутки. При бактериоскопии обнаруживают ветвистый, септированный мицелий шириной 2 — 6 мкм коричневого цвета и овальные споры, расположенные на стеригмах размером 2 — 5 мкм. При 370 С споротрихумы растут в дрожжевой форме — в виде единичных овальных клеток.

Мицелиальная форма гриба растет при температуре 250 С в течение 20-25 дней. Встречаются складчатые, крупнобугристые, многопетлистые, возвышающиеся колонии, окрашенные водонерастворимым пигментом сначала в кремовый, затем в желтый, коричневый и черный цвет. Мицелий гриба ветвистый, септированный, диаметром 1,0-2,5х10-30 мкм. Конидии овальные, круглые, грушевидные или цилиндрические, часть из них имеют заостренные концы, размеры конидий 2-8х1,5-З,0 мкм мкм. Конидии располагаются обычно попарно одна против другой по бокам мицелия или группами по 5-10 спор на конце, иногда в виде розетки. Встречаются также коремии - анастомозирующие нити мицелия в виде тонких усиков или завитков с микроконидиями на воздушных концах. В старых культурах обнаруживаются хламидоспоры.

Биопроба – интратестикулярное заражение белых мышей. При микроскопии пораженных тканей отмечается трансформация мицелиальной формы гриба в дрожжевую. Мышей, крыс, морских свинок можно заражать также внутрикожно. Хороший результат дают аллергические пробы со споротрихином.

Серологический метод - выявление антител в сыворотке крови больных к антигенам возбудителя споротрихоза с помощью РА, РСК и ИФА.

Аллергический метод – постановка внутрикожной аллергической пробы с аллергеном гриба - споротрихином

Хромомикоз

Возбудителями хромомикоза являются «черные плесени», Phialophora verrucosa, Fonsecaea compacta, Fonsecaea pedrosoi, Exophiala jeanselmei - диморфные грибы, относящиеся к дейтеромицетам. Гриб обнаруживается в почве, а также на растениях.

Заболевание у человека имеет хроническое течение (от10 до 30 лет), характеризуясь возникновением на конечностях бородавчатых и папилломатозных разрастаний (наподобие цветной капусты), покрытых корками, а также наличием мелких и крупных абсцессов, гранулематозных очагов. Заболевание спорадическое, встречается преимущественно в тропической и субтропической зонах. Материалом для исследования служат гной, соскобы пораженной ткани, биоптаты.

Микроскопический метод. При исследовании нативных препаратов из материала от больного микроскопии обнаруживают золотисто-коричневые округлые клетки гриба с толстой двухконтурной оболочкой, размером 4-15 мкм, часто в окружении гигантских склероциев - клеток с продольными и поперечными перегородками. Между клетками можно обнаружить

133

нити мицелия. В препаратах, окрашенных по Романовскому—Гимзе стенки клеток окрашиваются в зеленый цвет, по Цилю—Нильсену — в красный.

Микологический метод - выделение культур на среде Сабуро или других средах при температуре 25-280 С. Рост колоний появляется на 3-5-й день в виде темно-серых пушистых точек, к 10-17-му дню колонии становятся округлыми, конусовидными, ворсистыми или пушистыми, приобретая зеленовато-сероватый цвет. Колонии могут сливаться в сплошную массу, окруженную мелкими пушистыми разбросанными колониями темного цвета. В жидкой среде образуется складчатая пленка и рыхлый войлоко-подобный осадок в виде черного комка на дне пробирки. Выделенные культуры идентифицируют на основании морфологических свойств и характеру спорообразования.

Мицелий гриба септирован мало, конидиеносцы более септированы и на их расширенных концах располагаются конидии. Скопления спор кистеподобные, встречаются также одиночные или расположенные группами желто-бурые хламидоспоры, диаметром 10-12мкм, с толстыми темными стенками. Выделяют следующие типы споруляции возбудителя хромомикоза: hormodendrum, acrotheca, phialophora.

Тип hormodendrum имеет концевые конидиофоры с усеченными мелкими выпуклостями, к которым прикреплены яйцевидные, одноили двухклеточные споры оливкового цвета, размерами 1,5-3,0x3,0-5,0 мкм, расположенные в виде цепочек.

Тип acrotheca также представлен концевыми конидиофорами, однако они напоминают по форме дубинку и образуют латеральные конидии, диаметром 2-З мкм.

Тип phialophora характеризуется овальными или удлиненными конидиями, расположенными в бокаловидных конидиеносцах.

Культивирование гриба при температуре 370 С приводит к формированию на 5-6 сутки желтоватых колоний, состоящих из дрожжеподобных клеток гриба, размером 2-7 мкм.

Другие методы исследования. Применяются также методы серологической диагностики (с сыворотками крови больных ставят РП и РСК, используя специфические антигены возбудителя хромомикоза); применяют также аллергические пробы. В ряде случаев используют биопробу - интратестикулярное заражение самцов морских свинок.

Лабораторная диагностика эпидермомикозов Рубромикоз (руброфития).

Возбудитель - Trichophyton rubrum поражает кожу стоп, ногтевые пластинки пальцев стоп и кистей, крупные складки, кожу туловища и конечностей. Руброфития относится к широко распространенным заболеваниям. Источником инфекции является больной человек. Нередко встречаются ассоциации красного трихофитона с плесневыми грибами, кандидами, бактериальной флорой. Исследованию при руброфитии подвергают чешуйки кожи, соскобы из глубоких слоев ногтя.

Микроскопический метод позволяет найти в нативных препаратах споры и мицелий гриба, однако требует подтверждения выделением чистой культуры гриба.

Микологический метод - посев на плотную среду Сабуро с целью выделения культуры руброфитона. Сначала на среде образуются белые пушистые (реже кожистые или мучнистые) колонии, которые через 1-2 недели приобретают ярко-красный цвет. При микроскопии культуры обнаруживают тонкий мицелий, микроконидии грушевидной, реже овальной и палочковидной формы.

Эпидермофития паховая.

Возбудитель - Epidermophyton floccosum. Паховая эпидермофития относится к широко распространенным и весьма контагиозным заболеваниям, которым чаще болеют мужчины. Поражается кожа паховых и межъягодичных складок, реже — подмышечных складок и под молочными железами, в ряде случаев – ногти. Диагностика проводится микроскопическим методом и выделением культуры гриба.

При микроскопическом исследовании соскоба пораженных участков кожи обнаруживают переплетенные разветвляющиеся короткие (2-4мкм) нити мицелия и артроспоры прямоугольной формы в виде цепочек.

134

Микологический метод - на среде Сабуро вырастают округлые, куполообразные или плоские колонии, часто с углублением в центре. Поверхность колоний мучнистая, отмечается их радиальная складчатость, цвет - серый или желтовато-зеленый. При микроскопии культуры обнаруживают септированный мицелий с характерными макроконидиями, напоминающими связки бананов или дубинки.

Эпидермофития стоп.

Микоз стоп может вызывать также Trichophyton interdigitale (T.mentagrophytes var. interdigitale). Заболевание весьма распространенное, передается от человека человеку чешуйками с пораженных участков кожи или ногтей больного.

Микроскопический метод диагностики эпидермофитии позволяет определить в нативных препаратах из материала от больного нити мицелия и споры гриба (рис. 36).

Микологический метод. Возбудитель эпидермофитии образует на среде Сабуро быстро растущие разнообразные по культуральным характеристикам колонии (бархатисто-мучнистые, пушистые, ровные, куполообразные, складчатые или бугристые). Цвет колоний обычно белый, однако встречаются желтые, розовые, красные, коричневые колонии. При микроскопичеком исследовании культур находят длинный ветвистый септированный мицелий, на концах которого

Рис. 36. Элементы гриба (нити мицелия и споры гриба) в чешуйках кожи при эпидермофитии

расположены длинные завитки и спирали, а также полиморфные хламидоспоры. Обильные Микроконидии, диаметром 2-Змкм, располагаются в обилии по бокам мицелия и на его концах, часто располагаясь гроздьями. Макроконидии выглядят характерно: размерами 20-З0х5-7 мкм, разделены поперечными перегородками на 5-6 клеток, средние из которых наиболее широкие.

ТРИХОМИКОЗЫ

Трихофития

Повсеместно распространенное заболевание, вызываемое антропофильными и зоофильными трихофитонами различных видов. Инфицирование происходит через пораженные грибами волосы, чешуйки кожи и разрушающиеся ногтевые пластинки. Чаще болеют дети. При поверхностной трихофитии поражается гладкая кожа и волосистая часть головы, при хронической могут также поражаться ногти, глубокие слои кожи, внутренние органы. Пораженные трихофитонами волосы короткие (1-2мм и короче), беловатые, сухие, ломкие, выглядят в виде черной точки или запятой, находятся в мелкой чешуйке.

Наиболее часто среди антропофильных трихофитонов встречаются Trichophyton tonsurans

и T.violaceum, среди зофильных - T.mentagrophytes.

135

Микроскопический метод. При микроскопии нативных препаратов гриб в пораженном волосе встречается в виде спор и мицелия. Размеры и расположение спор является важным моментом в дифференциации различных видов гриба.

По отношению к волосу трихофитоны подразделяют на 3 группы:

endothrix (обычно антропофильные трихофитоны, вызывающие поверхностную трихофитию) - крупные круглые споры расположены только внутри волоса и не выходят за его пределы, напоминая пробирку, заполненную горохом;

ectothrix (обычно зоофильные трихофитоны, вызывающие глубокую трихофитию) - крупные или мелкие споры несколькими слоями окружают волос и его основание, создавая широкий (у крупноспоровых) или более узкий (у мелкоспоровых) чехол;

neoendothrix, когда гриб располагается и в волосе, и вне его.

Наряду со спорами, в пораженном волосе встречаются цепочки из округлых спор, изредка – нити мицелия.

Микроскопия соскоба пораженных участков кожи позволяет обнаружить нити мицелия, а также цепочки и кучки круглых или овальных спор диаметром 4-5мкм. В ногтевых пластинках элементы гриба имеют вид ветвящегося мицелия, цепочек из округлых и многогранных спор, а также крупных (5-8мкм) двухконтурных клеток.

Микроскопический метод позволяет быстро поставить диагноз трихофитии и отдифференцировать зоофильные трихофитоны от антропофильных, что имеет важное практическое значение. При необходимости при трихофитии выполняется культуральное исследование.

Микологический метод. На среде Сабуро рост T.tonsurans появляется на 4-5-й день, колонии гриба плотные, морщинистые, крупноскладчатые с пупкообразным или вдавленным центром (наподобие кратера вулкана) или же плоские, сухие, изрезанные. Поверхность колонии покрыта порошком наподобие пудры, колонии окрашены в различные цвета - от бело-серого до желтого и коричневого. При микроскопии культуры находят микроконидии, длиной 3-7мкм, реже макроконидии, мицелий.

Колонии T.violaceum на среде Сабуро появляются только к 3-4 неделе. Поверхность колонии складчатая, кожистая, маслянистая или матовая с хорошо ограниченными краями, диаметр - 2,5-3,0 см, цвет от фиолетового до бледно-сиреневого, иногда окраска отсутствует. Микроскопия культуры гриба дает возможность выявить септированный мицелий длиной 2- 4мкм, а также хламидоспоры.

Из зоофильных трихофитонов наибольшее значение имеет вид T.mentagrophytes. Колонии на среде Сабуро появляются на 2-3 день после посева, колонии плоские, поверхность порошкообразная или изрезанная. Цвет колоний белый, кремовый, реже красно-коричневый. При микроскопии обнаруживают ветвящиеся нити септированного мицелия, закрученные в спирали или в виде штопора, округлые или реже грушевидные микроконидии, располагающиеся вдоль гиф в виде гроздьев. Макроконидии многокамерные (от 2 до 8 камер), размером от 8 до 4050мкм. В старых культурах обнаруживаются хламидоспоры.

Методы генодиагностики. Разработаны методы ПЦР-диагностики трихофитии.

Микроспория.

Возбудителями микроспории чаще всего являются зоофильный гриб Microsporum canis, вызывающий заболевание у кошек, собак и человека, а также антропофильный гриб

M.ferrugineum.

Люди (чаще дети), заражаются от больных бродячих животных или больных людей. Поражаются кожа, волосы и очень редко ногти. При микроспории, вызванной зоонозными видами гриба, на волосистой части головы возникает крупный очаг, в котором волосы обломаны на высоте 5-8мм над поверхностью кожи. В очагах поражения имеются и непораженные волосы. Рядом с крупным очагом видны множественные мелкие очаги. Вокруг пеньков волос имеется чехол из спор гриба. При микроспории, вызванной антропонозными видами гриба, на гладкой коже появляются четко отграниченные множественные кольцевидные шелушащиеся очаги розового цвета. признаком Для микроспории характерно появление зеленого свечения пораженных волос при лю-

136

минесцентном освещении очага поражения в темном помещении. Лабораторная диагностика микроспории включает следующие методы исследования.

Микроскопический метод. Пораженный при микроспории волос характеризуется наличием многочисленных мелких круглых спор гриба, диаметром 2-З мкм, сплошь окружающих волос в основании и тесно прилегающих друг к другу в виде мозаики. Внутри волоса можно обнаружить септированный мицелий. В чешуйках пораженной кожи или в ногте мицелий гриба выглядит в виде тонких ветвящихся септированных нитей. Споры гриба в пушковом волосе располагаются мозаично, вне волоса или же по типу эндотрикса, сплошь заполняя волос параллельными цепочками из мелких спор.

Микологический метод состоит в посеве исследуемого материала на среду Сабуро или другие среды для грибов.

Колонии М.canis крупные, серого цвета или белые, мучнистые или пушистые. Мицелий напоминает ствол бамбука, состоит из утолщенных на одном конце клеток ракетообразной формы. Имеются многоклеточные макроконидии в виде веретена, покрытые ворсистой оболочкой, небольшое количество микроконидий, округлые хламидоспоры; концы мицелия заканчиваются образованиями, напоминающими гребешки.

Рост M.ferrugineum характеризуется появлением плоских, бугристых или кожистых куполообразных изрезанных на сектора колоний желтого, коричневого, реже красного цвета. Могут встречаться желтые строчковидные, восковидные, а также беловато-мучнистые мелкобугристые или складчатые колонии. В культурах обнаруживают широкий мицелий, хламидоспоры, цепочки из полиморфных клеток. Макроконидий, как правило, нет, микроконидии встречаются редко.

Фавус (парша).

В настоящее время этот микоз встречается крайне редко. Возбудителем в подавляю-

щем большинстве случаев является гриб Trichophyton schonleini (Achorion schonleini). Ис-

точником заражения людей (чаще всего детей), является больной фавусом человек, пути заражения - прямой контакт или через загрязненные предметы (расчески, полотенца и т.д.).

При фавусе поражаются гладкая кожа, волосы и ногти. Характерным элементом являются скутулы - круглые, плоские или в виде блюдечка образования желтого цвета, 2-3 см в диаметре, крошковидной консистенции, плотно спаянные с кожей и состоящие из элементов гриба, а также поврежденных клеток эпидермиса. Скутулы могут сливаться друг с другом, при этом образуются корки зеленовато-желтого или желто-бурого цвета. Характерным признаком фавозных скутул является их «амбарный», или «мышиный» запах. Пораженные грибом волосы сухие, мутные, серого цвета, спаяны в толще скутулы. Крайне редко поражаются при фавусе лимфатические узлы, легкие, слизистая кишечника, кости и мозг. Применяются следующие методы лабораторной диагностики фавуса.

Микроскопический метод. При фавусе элементы гриба полиморфны - наряду с тонким (2-Змкм) септированным мицелием встречается более широкий (4-6мкм) мицелий, распадающийся на прямоугольные клетки с двухконтурной оболочкой, а также цепочки и кучки из круглых и многогранных спор, при этом волос никогда не заполняется элементами гриба сплошь. Наличие пузырьков воздуха и капелек жира не является характерным признаком микоза. В зрелой скутуле находят большое количество крупных многогранных и округлых спор, расположенных кучками или короткими цепочками; клеточных элементов кожи почти не видно. В пораженных ногтевых пластинках элементы гриба расположены неравномерно в виде одиночных клеток или нитей мицелия или в виде ветвящегося мицелия в большом количестве с цепочками или кучками полиморфных спор.

Микологический метод – выделение чистой культуры гриба на среде Сабуро. Колонии Trichophyton schonleini на этой среде сначала гладкие, желтовато-белые, затем высокие, похожи на строчок или губку, коричневого цвета, крошковидной консистенции. Описаны также кратерообразные, гипсовидные, складчатые, бархатисто-мучнистые колонии. При микроскопии культур обнаруживают септированный мицелий с ветвлениями в виде рогов северного оленя или канделябров, на концах которого расположены крупные округлые хламидоспоры, а

137

также тупоконечные длинные и широкие веретенообразные образования. Кроме того, встречаются булавовидные вздутия и широкие сплющенные клетки, похожие на шляпку гвоздя («фавозные гвозди»), и крупные грушевидные микроконидии, располагающиеся кучками по бокам и на концах мицелия или вне его.

Лабораторная диагностика поверхностных микозов

При поверхностных микозах (кератомикозах) патологический процесс локализуется преимущественно в поверхностных слоях эпидермиса, не вызывая при этом видимой воспалительной реакции в дерме. В эту группу входят следующие микозы.

Разноцветный лишай (отрубевидный лишай). Возбудителем является дрожжепо-

добный гриб Pityrosporum orbicutare (Malasseria furfur). Заболевание чаще возникает у лиц молодого возраста при чрезмерной потливости, при сахарном диабете, ожирении, длительной лихорадке. Очаги поражения локализуются на коже груди, спины, живота, шеи, плечах, проявляясь в виде коричнево-красных пятен, сопровождающихся шелушением.

Диагностика проводится микроскопическим методом. В нативных препаратах соскоба кожи элементы гриба в чешуйках рогового слоя выглядят в виде коротких нитей мицелия, а также скоплений округлых почкующихся клеток с толстой стенкой, размером до 8мкм в диаметре. При посеве материала от больного на среду Сабуро при на 4 -8-й день культивирования при температуре 370 С появляются белые или кремовые колонии с блестящей поверхностью, состоящие из почкующихся дрожжеподобных клеток.

Черный микоз (кладоспориоз). Возбудитель - Cladosporium werneckii вызывает появ-

ление на коже ладоней или подошв светло-коричневых или черных пятен, шелушение отсутствует. При микроскопии нативных препаратов элементы гриба обнаруживаются в роговом слое эпидермиса в виде коричневого ветвящегося септированного мицелия и почкующихся клеток.

Пьедра. Заболевание кутикулы волоса, характеризующееся образованием на волосе узелков белого или черного цвета.

Белая пьедра (трихоспороз), встречается в виде спорадических случаев в странах с умеренным климатом, возбудителем является Trichosporon beigelii (Trichosporon cutaneum).

При микроскопии пораженных волос находят мицелий и артроспоры, прямоугольной, овальной или круглой формы, а также скопления спор. Узелки локализуются на волосах подмышечной и паховой областей, на бороде и волосистой части головы.

Черная пьедра, наоборот, встречается в странах с жарким климатом. Возбудитель — Piedraia hortai — имеет аски, в которых находятся от 2 до 8 аскоспор размером от 5 до 80мкм.

Лабораторная диагностика микозов, вызываемых условно-патогенными грибами (оппортунистические микозы)

Условно-патогенные грибы обычно являются сапрофитами, обитающими во внешней среде, а также на коже и слизистых оболочках человека. Оппортунистические микозы возникают при длительном контакте человека с возбудителем, на фоне иммунодефицита, нерациональной антибиотико- и химиотерапии, приводящей к дисбактериозу и т. д. Некоторые грибы в благоприятных для них условиях способны размножаться в пищевых продуктах (например, в злаках) и накапливать сильнодействующие микотоксины, вызывающие тяжелые пищевые отравления (алиментарные микотоксикозы).

Кандидоз (кандидамикоз)

Возбудителями кандидоза – повсеместно распространенного заболевания являются дрожжеподобные грибы рода Candida (наиболее часто встречается вид Candida albicans, реже - Candida tropicalis, Candida pseudotropicalis, Candida krusei, Candida glabrata и т.д.). Кандидоз отно-

сится к типичным аутоинфекциям, проявляясь избыточным ростом дрожжеподобных грибов, заселяющих кожу, ногти, слизистые оболочки, внутренние органы. Обычно это заболевание возникает при патологии, связанной с формированием иммунодефицита (сахарный диабет, другие эндокринные болезни, гипо- и авитаминозы, иммунодепрессивная и лучевая терапия, СПИД и т.д.), при дисбактериозе, обусловленном длительным приемом антибиотиков. Наиболее подвержены кандидозу дети и старики.

138

Выделяют поверхностный кандидоз слизистых оболочек, кожи, ногтевых валиков и ногтей. Кандидоз слизистых оболочек полости рта или влагалища (молочница) характеризуется появлением белого налета, напоминающего свернутое молоко

Хронический генерализованный кандидоз обычно развивается у детей с иммунодефицитными состояниями, имеет медленно прогрессирующее течение с возникновением пневмоний, гастритов, гепатитов и др.

При висцеральном кандидозе поражаются желудочно-кишечный тракт, органы дыхания, мочевыделительная система, ЦНС.

Аллергические формы кандидоза развиваются на фоне имеющегося первичного очага кандидомикоза в результате сенсибилизация организма, при этом могут возникать новые очаги воспаления, в которых возбудитель отсутствует.

Материалом для исследования при кандидозе являются чешуйки кожи и соскоб с ногтей, отделяемое и пленки со слизистой оболочки губ, полости рта, влагалища, мочеиспускательного канала, наружного слухового прохода, а также с конъюнктивы. При висцеральном кандидозе исследуют кровь, спинномозговую жидкость, мокроту, испражнения, мочу, желчь, мазки со слизистых оболочек, биоптаты тканей, пунктаты абсцессов, секционный материал.

Лабораторная диагностика кандидоза включает микроскопию нативных препаратов, выделение чистой культуры гриба, обнаружение в материалах антигенов или нуклеиновых кислот, постановку серологических реакций, аллергических проб.

Микроскопический метод - изучение неокрашенных и окрашенных по Граму, Романовско- му-Гимзе, Цилю-Нильсену препаратов из исследуемого материала, в которых обнаруживают круглые или овальные почкующиеся дрожжеподобные клетки, размером от 3-6 мкм, и псевдомицелий в виде цепочек удлиненных клеток (рис. 37). Некоторые виды дрожжеподобных грибов (C.albicans) образуют терминальные хламидоспоры.

По Граму грибы рода Candida окрашиваются в темно-фиолетовый цвет, по Цилю-Нильсену - в синий с розово-желтыми включениями липидов, по Романовскому-Гимзе — в розовато-желтый цвет с темно-фиолетовыми включениями волютина и красным хроматиновым веществом.

Микологическое исследование. Выделение чистой культуры дрожжеподобных грибов производят на плотных средах (обычно среде Сабуро, сусло-агаре, Кандида-агаре или др.) с добавлением антибиотиков (пенициллин, стрептомицин и т.д.) для подавления роста сопутствующих бактерий. Через 2-3 дня культивирования при 30-370 С образуются круглые, диаметром до 1 см, выпуклые сметанообразные гладкие колонии белого цвета с ровными краями и глубоким врастанием в среду ветвистого древовидного псе вдомицелия.

Выделенную чистую культуру пересевают в жидкие среды ( картофельную, кукурузную среды, морковно-картофельный отвар и др.) для выявления псевдомицелия, появляющегося обычно на 3-5 день культивирования (реже на 10-15 день и позже) В жидких питательных средах Candida образуют равномерное помутнение, осадок или пленку на поверхности среды. Наряду с псевдомицелием, у этих грибов можно найти истинный мицелий и хламидоспоры (крупные двухконтурные споры с зернистым содержимым) при посеве на рисовый или Хлами- доспор-агар с последующим культивированием гриба в условиях пониженной температуры и концентрации кислорода..

139