БИОИНЖЕНЕРИЯ

Фосфатаза

Щелочная фосфатаза креветки (rSAP)

Одна единица щелочной фосфатаза креветки гидролизует нуклеотидов 1 микромоль p-Nitrophenyl Phosphate в реакционном объеме 1 мл за 1 минуту при 37 градусах Цельсия

Катализирует неспецифическое дефосфорилирование 5' и 3' монофосфорилированных концов одно- и двуцепочечных молекул ДНК и РНК

Дефосфорилирование векторов для клонирования, чтобы предотвратить их повторное замыкание в кольцо в процессе лигирования

Гидролиз дНТФ после ПЦР с целью дальнейшего секвенирования или SNP анализа продуктов

Киназа

 Полинуклеотидкиназа бактериофага Т4 (T4

Polynucleotide Kinase)

За одну единицу активности Т4 полинуклеотидкиназы принимали количество фермента, необходимое для включения 1 нмоля [32P] в кислотонерастворимую фракцию за 30 мин при

37°С.

Катализирует перенос гамма-фосфата с АТР на 5'-концевую гидроксильную группу одноили двуцепочечных ДНК и РНК, олигонуклеотидов или нуклеозид-3'-монофосфатов

Обладает 3'-фосфатазной активностью

Используют для присоединения 5‘-фосфатов и удаления 3‘- фосфатов

РНК-нуклеазы

Эндорибонуклеаза H (RNase H)

Одна единица эндорибонуклеазы H гидролизует 1 наномоль РНК в дуплексе poly(rA).poly(dT) за 20 минут при 37 градусах Цельсия

Расщепляет РНК, находящуюся в виде гетеродуплекса РНК/ДНК

В результате активности рибонуклеазы Н образуется 5'- фосфорилированный продукт

Рекомбиназа

Cre рекомбиназа (Cre Recombinase)

Катализирует сайт-специфическую рекомбинацию между loxP сайтами

Используются для вырезания фрагмента ДНК между двумя loxP сайтами

Используется для объединения ДНК молекул, содержащих loxP сайты

Используется для инвертирования последовательности ДНК между loxP сайтами

Механизм сайт-специфической рекомбинации