БИОИНЖЕНЕРИЯ

Мегануклеазы интронов I группы

Мегануклеазы интеинов

Мегануклеазы интронов II группы

Кристаллическая структура 5 семейств мегануклеаз

A – LAGLIDADG

B – PD-D/E-XK

C – His-Cys Box

D – GIY-YIG

E - HNH

Механизмы репарации двухцепочечных разрывов

Механизм редактирования генома с помощью мегануклеаз

ДНК-полимеразы

 ДНК-полимераза I (Escherichia coli DNA

Polymerase I)

Одна единица ДНК-полимеразы I полимеризует 10 наномоль свободных нуклеотидов за 30 минут при 37 градусах Цельсия

Обладает 5' - 3' и 3' - 5‘ экзонуклеазной активностью

Используется для ник-трансляции (nick-translation): ДНКаза+ДНК полимераза 1+меченые нуклеотиды

Синтез второй цепи в комплементарной ДНК (кДНК)

ДНК-полимеразы

Фермент Клёнова (Escherichia coli DNA Polymerase I, Large (Klenow) Fragment)

Одна единица ДНК-полимеразы I полимеризует 10 наномоль свободных нуклеотидов за 30 минут при 37 градусах Цельсия

Обладает полимеразной и 3' - 5‘ экзонуклеазной активностью

Секвенирование ДНК методом Сенгера

Синтез второй цепи в комплементарной ДНК (кДНК)

Заполнение 5'-выступающих концов ДНК с образованием "тупых" концов

Удаление 3'-выступающих концов с образованием "тупых" концов