БИОИНЖЕНЕРИЯ

ДНК-полимеразы

 Т4 полимераза (Enterobacteria phage T4 DNA

Polymerase)

Одна единица ДНК-полимеразы I полимеризует 10 наномоль свободных нуклеотидов за 30 минут при 37 градусах Цельсия

Обладает полимеразной и 3' - 5' экзонуклеазной активностью

Заполнение 5'-выступающих концов ДНК с образованием "тупых" концов

Удаление 3'-выступающих концов с образованием "тупых" концов

ДНК-полимеразы

 Обратная транскриптаза вируса миелобластоза

птиц (AMV Reverse Transcriptase)

Одна единица обратной транскриптазы M-MuLV полимеризует 1 наномоль дизокситимидин трифосфата (dTTP) за 10 минут при 37 градусах Цельсия, используя политимидиновый олигонуклеотид в качестве праймера

Синтез цепи ДНК на матрице одноцепочечной РНК или ДНК

Обладает 5' - 3' и 3' - 5' экзонуклеазной активностью

Расщепляет РНК в РНК-ДНК гибридах

ДНК-полимеразы

 Обратная транскриптаза вируса лейкемии

мышей Молони (M-MuLV Reverse Transcriptase)

Одна единица обратной транскриптазы M-MuLV полимеризует 1 наномоль дизокситимидин трифосфата (dTTP) в конечном объеме реакции 50 мкл за 10 минут при 37 градусах Цельсия, используя политимидиновый олигонуклеотид в качестве праймера

Синтез цепи ДНК на матрице одноцепочечной РНК или ДНК

Отсутствует 3' - 5' экзонуклеазная активность

Расщепляет РНК в РНК-ДНК гибридах

ДНК-полимеразы

 Терминальная трансфераза из тимуса теленка

(Terminal Transferase)

Выполняет полимеризацию дезоксинуклеотидов вне зависимости от матрицы, присоединяя их к 3' -гидроксильному концу молекулы ДНК.

Используется для введения меченных нуклеотидов в 3' – концы ДНК

РНК-полимеразы

 РНК полимераза бактериофага SP6 (SP6 RNA

Polymerase)

Одна единица РНК-полимеразы бактериофага SP6 полимеризует 1 наномоль АТФ за 1 час при 37 градусах Цельсия

Узнает промотор ATTTAGGTGACACTATAGA

Синтез направляющей РНК для редактирования in vitro

Введение меченных нуклеотидов в состав РНК

Для in vitro трансляции и микроинъекции РНК

Изучение структуры РНК

РНК амплификация

РНК интерференция (anti-sense RNA)

РНК-полимеразы

 РНК полимераза бактериофага T7 (T7 RNA

Polymerase)

Одна единица РНК-полимеразы бактериофага SP6 полимеризует 1 наномоль АТФ за 1 час при 37 градусах Цельсия

Узнает промотор TAATACGACTCACTATAGG

Синтез направляющей РНК для редактирования in vitro

Введение меченных нуклеотидов в состав РНК

Для in vitro трансляции и микроинъекции РНК

Изучение структуры РНК

РНК амплификация

РНК интерференция (anti-sense RNA)