22. Возбудители холеры

23.Возбудители респираторных вирусных инфекций.

Сем PARAMYXOVIRIDAE(лат.para– около,myxa– слизь) включает три патогенных: Paramyxavirus (парагриппа и эпидемического паротита), Morbillivirus (корь) и Pneumovirus (респираторно–синтициальный).

Структура и хим состав.Вирионы сферичес­кой формы. В центре – нуклеокапсид со спиральным типом симметрии, окружен внешней оболочкой с шиловидными отростками. Односпиральная ­­­­­­­­«–» РНК. В составе нуклеокапсида есть несколько вирусспецифических ферментов, в том числе РНК-полимераза. Имеет суперкапсид и 3 вирусспецифических белка: 2 – гликопротеины NH (обладают гемагглютинирующей и нейраминидазной активностью), 3 – белок F (уча­ствует в слияниимембран с вирусной оболочкой).

АГ.2 видоспецифических АГ: внутренний S- (нуклеопротеин) и наруж­ный Y-АГ (гликопротеины шиповидных отростков). Общий АГ для всего семейства отсутствует. У ряда парамиксо­вирусов Y-АГ содержит 2 самостоятельных компонента –гемагглютинин (Н-АГ), др – нейраминидаза (N-АГ).

Репродукция.Парамиксовирусы с помощью рецепторов адсорбируются на клетках. Проникновение – путем рецепторного эндоцитоза или при слиянии вирусной оболочки с цитоплазматической мембраной. Репликация В! РНК – в цитоплазме. При форми­ровании вирионов происходит модификация отдельных участков мембраны-хозяина (снаружи встраиваются гликопротеины, изнутри – мембранный белок). К этим уча­сткам мембраны по актиновым нитям цитоскелета транспортируются вирусные нуклеокапсиды. Выход В! частиц – почкованием. В цитоплазме инфи­цированныхобразуются ацидофильные включения.

Экология и распространение.Высокочувствительны к действию детергентов, дезинфектантов, кt°С. ИСТОЧНИК –больные и вирусоносители. ПЕРЕ­ДАЮТСЯ аэрозольным, иногда контактным пу­тем. Наиболее тяжело протекает у детей раннего возраста. При паротите, кори больной опасен для окружающих начиная с инкубационного периода.

Диагностика.Вирус выделяют из материала (слюна, моча, кровь, смывы из зева и др.) в культуре клеток. Идентификацию ви­русов производят по характеру ЦПД и в серологических реак­циях (РСК, РВН, РТГА). Для обнаружения В! АГ в материале используют иммунофлюоресцентный метод.

Серодиагностика проводится в РСК, РВН, РТГА – с парными сыворотками больных.

ВИРУСЫ ПАРАГРИППА ЧЕЛОВЕКА (ВПГЧ)

Известно 5 серотипов вируса парагриппа (ВПГЧ-1– ВПГЧ-5).

Парагриппозные вирусы обладают гемадсорбирующей активностью, к/я проявляется в инфицирован­ных культурах при добавлении эритроцитов морской свинки. Имеют гемагглютинирующие свойства (у разных се­ротипов выражены по разному). Все серотипы обладают нейраминидазной активностью и умеренно выраженными гемолитическими и симпластобразующими свойствами. Репродуцируются в первичных, и перевиваемых культурах клеток человека и обезьян. Выра­женность ЦПД варьирует в зависимости от серотипа и штамма. Вирусы ВПГЧ-1 и ВПГЧ-4 типов наименее цитопатогенны.

Патогенез.Парагриппозные инфекции протекают по типу ОРЗ. Среди ОРЗ встречается примерно в 10% случаев. В! репродуцируются в эпителиальных клетках слизистой носоглотки → в кровь→ вирусемия.

Иммунитет.Типоспецифический гуморальный, сохраняется в течение нескольких лет. В сыворотке обнаруживаются комплементсвязывающие, вируснейтрализующие, антигемагглютинирующие АТ. Большое значение имеют SIgA.

Вакцинопрофилактика не применяется.

Сем ORTHOMYXOVIRIDAE (греч. orthos – правильный, myxa – слизь) – В!! гриппа типов А, В и С, как и парамиксовирусы, обладают сродством к муци­ну. В! типа А поражают человека и некоторых Ж!! и птиц. В! типов В и С патогенны только для людей.

При КЛАССИФИКАЦИИ – трудности, связанные с АГ изменчи­востью. В! подразделены на три типа А, В и С.

К ти­пу А отнесены несколько подтипов, отличающихся др от др по АГ (NH). По классификации ВОЗ В! гриппа типа А разделены на 13 подтипов по гемагглютинину (Н1–10) и на 10 по нейраминидазе (N1–10). Из них в состав В!! гриппа человека типа А входит 3 гемагглютинина (H1–3) и две нейраминидазы (N1 и N2). Но недостатком этой классификации является объединение в единый подтип H1 трех вирусов, отличающихся по характеру вызываемых ими пандемий и эпи­демий прошлых лет.

В!! типов В и С имеют стабильные АГ, хотя гемагглютинин вируса гриппа В так­же претерпевает во времени антигенный дрейф.

НОМЕНКЛАТУРА включает ряд обязательных показателей:

тип вируса (А, В и С);

естественный хозяин, если не человек животное;

географическое место выделения;

лабораторный номер штамма;

год выделения

у В! типа А в скобках указывается подтип гемагглютинина и нейраминидазы (Хабаровск/90/77 (H1N1)).

Стрк и хим состав.Имеет сфери­ческую форму, реже – ните­видные формы. Нуклеокапсид спиральной симметрии – это РНП тяж, уложен­ный в виде двойной спирали, которая составляет сердцевину вириона. С ней связаны РНК-полимераза (белок Р1) и эндонуклеазы (Р3). Сердцевина окружена мембраной, состоящей из белка M (соединяет РНП с липидным бислоем внешней оболочки и шиловидными отростками, состоящими из Н иN). Липиды и углеводы в составе внешней оболочки и имеют клеточное происхождение. Геном – фрагментированная РНК (В!! типов А и В имеют 8 фрагментов, из них 5 кодируют по одному белку, а 3 – по 2 белка).

АГ.В!! гриппа А, В и С отличаются по типоспецифическому АГ, связанному с РНП и М-матриксным белком, стабилизирующим структуру вириона. Эти АГ выявляются в РСК. Более специфичны для В! типа А два других АГ – Н и N. Гемагглютинин – сложный гликопротеид, обладает протективными свойствами, индуцирует в образование вируснейтрализующих АТ, выявляемых в РТГА. Изменчивость Н-АГ определяетАНТИГЕННЫЙ ДРЕЙФ И ШИФТВ! гриппа. АГ дрейф – незначительные изменения Н-АГ, вызванные точечными Мт. При накоплении изменений в потомстве → из­менение АГ свойств Н. АГ шифте – полная замена гена, в основе – рекомбинации между двумя вирусами. Это при­водит к смене подтипа Н илиN, и появлению принципиально новых АГ вариантов → крупные эпидемии и пандемии.

С помощью гемагглютинина В! адсорбируется на чувствительных клетках (в т.ч. эритроцитах → склеивание и гемолиз).

Нейраминидаза – фермент, катализирующий от­щепление сиаловой кислоты от субстрата. Обладает АГ свойствами, участвует в освобождении вирионов из хозяина.

Культивирование и репродукция.Культиви­руются в куриных эмбрионах и в культурах клеток (первичные культуры клеток почек эмбриона человека и некото­рых Ж!!) → слабовыраженное ЦПД.

Адсорбируются на гликопротеиновых рецепто­рах эпителиальных клеток → проникают путем рецепторного эндоцитоза. В ядре – транскрип­ция и репликация.

Патогенез.Первичная репродукция – в эпителиальныхдыхательных путей → в кровь (вирусемия) → повреждение эндотелиальныхкапилляров↑ их проницае­мость. В тяжелых случаях – кровоизлияния в легкие, ♥ и другие внутр органы. Попадая в лимфоузлы, повреждают лимфоциты → приобретенный иммунодефицит → вторичные Б! инфекций.

М.б. интоксикация организма различной степени тяжести.

Иммунитет.Механизм связан с неспецифической защитой (интерферон и НКК).

Специфический иммунитет – МКфаги и Т-киллеры (клеточный) + Ig (антигемагглютинины и антинейроминидазные АТ). Последние в отли­чие от антигемагглютининов только частично нейтрализуют вирус гриппа, препятствуя его распространению.

АТ обнаруживаются в сыворотке через 3–4 сут после начала заболевания, достигают Мах через 2–3 нед. Продолжительность специфического иммунитета – несколько десятилетий, т.е. напряженный, строго специфический к тому подтипу вируса (по Н- и N-АГ), который вызвал его образование.

У новорожденных – пассивный, обусловлен IgG к соответствующему подтипу вируса А, сохраняется в течение 6–8 мес.

Эпидемиология.Источник – больные и вирусоносители. Передача воздуш­но-капельным путем. Грипп относится к эпидемическим инфек­циям, возникают в зимние и зимне-весенние меся­цы. Примерно через каждые 10 лет эпидемии гриппа прини­мают характер пандемий, охватывающих население разных кон­тинентов. Объясняется сменой у гриппа А типа Н- иN-АГ вируса типа А (АГ дрейф и шифт). Например, вирус гриппа А с гемагглютинином HSW1 вызвал в 1918 г. пандемию «испанки» (20 млн погибло). В 1968 г. появился новый вариант – В! гриппа A (H3N2) «гонконгский», он продолжает циркули­ровать до настоящего времени. В 1977 г. к нему присоединился вирус типа А (H1N1).

Прекращение циркуляции В! объясняется коллективным иммунитетом насе­ления к данному варианту селекция вариантов, иммунитет к которым еще не сформиро­вался.

Возможно, что резервуаром вирусов являются дикие и домашние животные, особенно птицы. При этом в организме птиц происходят рекомбинации между птичьими и человеческими вирусами → новые АГ варианты.

По другой гипотезе В!! постоянно циркулируют среди населения, но становятся эпидеми­чески актуальными лишь при снижении коллективного иммуни­тета.

Вирусы типов В и С более стабильны, вызывают менее интенсивные эпидемии и локальные вспышки.

В! быстро разрушается под действием t°, УФ, дезинфектантов, детергентов, но сохраняются при низких температурах.

Специфическая профилактика.Для ПРОФИЛАКТИКИ используют ремантадин, который подавляет репродукцию вируса гриппа типа А. Для пассивной профилактики – проти­вогриппозный Ig из сыворот­ки доноров, иммунизированных гриппозной вакциной. Используют также человеческий лейкоцитарный интерферон.

Для ВАКЦИНОПРОФИЛАКТИКИ – живые и инактивированные вакцины. При введении живых вакцин формируется как общий, так и местный иммунитет. + индук­ция интерферона.

Получены ИНАКТИВИРОВАННЫЕ ВАКЦИНЫ раз­личных типов:

Вирионные – получают путем высококачествен­ной очистки вирусов, выращенных в куриных эмбрионах.

Субъе­диничные – очищенные поверхност­ные АГ (Н иN) – ↓ реактогенность и ↑ иммуногенность.

Расщепленные илидезинтегрированные –получают из очищенной суспензии инрионов путем обработки детергентами.

Инактивированные вакцины индуцируют иммунный ответ в системе общего и местного гуморального иммунитета, но в меньшей степени по сравнению с живыми вакцинами индуцируют синтез интерферона.

Вакцины неэффективны, т.к. вакцинные штаммы не соответствуют эпидемическим

Диагностика.ЭКСПРЕСС-МЕТОДЫ – выявление В! АГ в цитоплаз­ме эпителиальных клеток слизистой носа и носоглотки в мазках-отпечатках с помощью ИФА и иммуноферментного ана­лиза.

ВЫДЕЛЕНИЕ путем заражения вируссодержащим материалом (смывы из носоглотки в первые дни заболе­вания) куриных эмбрионов или культур клеток.

ТИПОВУЮ при­надлежность – РСК. Подтип гемагглютинина – РТГА, подтип нейраминидазы – в реакции ингибирования нейраминидазной активности.

Для СЕРОДИАГНОСТИКИ – парные сыворотки, взятые с интервалом в 8-14 дней: в начале заболевания и в период выздоровления. Нарастание титра вирусспецифических антител устанавливают в РСК и РТГА и др методами.