Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Руковод иммун прак ЛЕЧ .doc
Скачиваний:
108
Добавлен:
17.03.2016
Размер:
1.32 Mб
Скачать

Характеристика наиболее часто встречающихся причин аналитических ошибок при проведении рид и ифа

Характери­стика ошибки

Метод

Возможные причины

Мероприятия по устранению ошибок

Занижение результатов

РИД

1. Изменение физи-ко-химических сво-йств аналита (полимериза­ция)

1. Контроль пра­вильности хранения образцов для иссле­дования

2. Неправильное раз­ведение анти-сыво­ротки, низкий угол крутизны калибровки

2. Предварительный подбор антисыво­рот-ки и правильное раз-ведение стандар­тов

3. Неидентичность структуры стандар-тов и образца

3. Контроль адек­ват-ности стандарт­ных материалов, парал-лельное ис­следова-ние другим методом

4. Незавершенность инкубаци

4. Контроль време­ни инкубации (элек­трофорез и др.)

ИФА

1. Неподготовлен­ность измеритель-ного прибора

1. Подготовка фо­тометра (прогрев не менее 15-20 мин.)

2. Сокращение времени проведения ре­акции на этапе суб­стратной смеси

2. Проявление реак­ции в течение 10-15 мин. (характер и кон-центрация хро­могена и субстрата), как ука-зано в инст­рукции

3. Неправильное предварительное раз­ведение стан-дартов и образцов

3. Использование откалиброванных пипеток, одноразо­вых наконечников и т.п.

4. Захват пузырьков воздуха при пипети- ровании

4. Тщательное пе­ремешивание кон­трольных материа­лов щадящее пипети-рование, контроль

Завышение результатов

РИД

1. Мономерные фор­мы Ig

1. Контроль образца другим методом для выявления парапротеина

2. Высокий угол на-­ клона калибровки

2. Повторная калиб­ровка

3. Низкие значе-ния стандарт-ных образ­цов

3. Соответствие кон-­ центраций стандар­ та и образцов

4. Длительная инку­ -бация, высокая тем­ пература инкубации

4. Стандартизация температуры и вре­ мени инкубации

5. Неправильность разведения образцов

5. Контроль разве­дения, использова­ния откалиброванных пипеток, одно­ разо-вых наконечни­ков

6. Несоблюдение ус­ ловий хранения об­ разцов до исследо-ва­ния

6. Правильность хранения образцов до исследования

ИФА

1. Некачественная отмывка планшет

1.Тщательная по­вторная отмывка

2. Изменение конце-н­трации детергента в отмывающем рас-тво­ре

2. Контроль пра­вильности разведе­ния отмывающих растворов

3. Удлинение сроков инкубации субстрат­ной смеси

3. Подбор инкуба­ции на этапе суб­стратной смеси с контролем преды­дущего опыта (срав­нение результатов

4. Изменение крутиз­ны калибровки

4. Повторная калиб­ровка

5. Изменение качест­ва субстратной смеси в результате хранения

5. Предварительный визуальный кон­троль цвета суб­стратной смеси (при необхо-димости за­менить)

6. Изменение кон-цен­трации контро-льных материалов

6. Тщательное пе­ре-мешивание об­разцов

7. Захват пузырьков воздуха при пипети- ровании

7. Щадящее пипети-рование

Таким образом, основным правилом работы лабора­тории является проведение внутрилабораторного контроля качества по описанным выше критериям. Внешняя эксперти­за лабораторных исследований обязательна для всех лабора­торий и не заменяет внутрилабораторного контроля качества. Внутри лабораторный контроль выявляет преимущественно случайные ошибки, внешний – систематические ошибки исследований лаборатории. Ряд фирм, включая отечественные, представляет компьютерные программы по проведению кон­троля качества лабораторных исследований.

8. Определить воспроизводимость (В) результатов ИФА (записать в тетрадь оформить протокол)

10 образцов сыворотки крови поставлены в 5 повторах. При этом один слабоположительный образец в 4 случаях дал положительный результат, а в 1 случае – отрицательный, и один отрицательный образец в 3 случаях дал отрицательный результат, а в 2 случаях – положительный, остальные результаты воспроизвелись все 5 раз. Заключение: воспроизводимость (В) тест-системы ИФА при этом составит:............... %

5. Подведение итогов занятия 5 мин