Частини рослини і хімічний склад

Частини рослини	Хімічний склад	Вміст %
насіння	кодтесин	0,25
	Жирне масло	7,4
	β-ситостерин	~ 0,013
	Поновлюючі цукрц	~5
	сахароза	~0,29
	Азотні речовини	0,8-1,5
	Жирне масло	6,5
	сорбіт	0,5-0,7
	Дубильні речовини	8-13,7
плоди	Флавоноїд-гиперозід	1-2
	Трітерпенові сапоніни:	0,8-0,93
	Урсолова кислота
	Олеанолова кислота
	Кавова кислота
	Хлорогенова кислота
	Аскорбінова кислота	38,3
	каротіноїди	0,2
	Ефірне масло	~0,16
	Флавоноїдні з’єднання:	~2
	Гиперозід
	Кверцетин
квітки	Вітексин
	Трітерпенові сапоніни:	1,3-2,5
	Кавова кислота
	Хлорогенова кислота
	Аміни:	13-18
	Тріметиламін
	Холін
	ацетилхолін
	Флавоноїди:	4-5
	Гиперозід
	Ацетил рамнозид вітексину
	Вітексин
	Кверцетин
	Ефірне масло	~0,8
листя	Дубильні речовини	6-10
	каротин	1,2-2,5
	Аскорбінова кислота	25-29
	Трітерпенові кислоти	1,11-2,9
	Урсолова кислота
	Кратеголова кислота
	Окантолова систола
	Хлорогенова кислота
	Неотеголова кислота

Суми флавоноїдів в перерахунку на гіперозид не менше 0,06%; вогкість не більш 14%; золи загальної не більш 3%; золи, нерозчинної в 10% розчині хлористоводородной кислоти, не більш 1%; плодів, що підгоріли, не більш 2%: плодів недостиглих (буро-зелених) не більш 1%; плодів, пошкоджених шкідниками, роздроблених, окремих кісточок гілочок, плодоніжок, у тому числі відокремлених при аналізі, не більш 5%; органічної домішки не більш 1%; мінеральної домішки не більш 0,5%.

Якісні реакції. Проводять екстракцію і очищення суми флавоноїдів на колонці з поліамідним сорбентом згідно методиці, описаній в розділі "Кількісне визначення". На стартову лінію хроматографічної пластинки "СилуФол" (15x15см) наносять макропіпеткою 0.05 мл розчини А у вигляді смуги завдовжки 2 см і шириною 0.5-0.6 см. Поряд, на відстані 1.5 см від краю смуги, на стартову лінію наносять у вигляді крапки 0.005 мл 1% розчину Державного стандартного зразка (ГСО) гіперозида. Пластинку з нанесеними пробами висушують на повітрі протягом 20 мін. потім помішають в камеру з сумішшю розчинників хлоросЬорм -метиловий спирт (8:2) і хроматографірують висхідним способом (камеру заздалегідь насищають не менше 40 мін). Коли фронт розчинників пройде до кінця пластинки, її виймають з камери, висушують у витяжній шафі протягом 2 хв і переглядають в УФ-світлі при довжині хвилі 360 нм.

На рівні плями ГСО гіперозида повинна з'явитися смуга темно-коричневого кольору. Потім пластинку обробляють 5% спиртним розчином алюмінію хлориду і нагрівають її протягом 2-3 мін в сушильній шафі при температурі 100-105° С. При цьому пляма придбаває яскраво-жовте забарвлення у видимому і яскраву жовто-зелену флюоресценцію в УФ-світлі.

Кількісне визначення. Аналітичну пробу сировини подрібнюють до розміру частинок, що проходять крізь сито з отворами діаметром 2 мм Близько 5 г (точне навішування) подрібненої сировини помішають в круглодону колбу з шліфом місткістю 100 мл. додають 50 мл 95% спирту, зважують з погрішністю ±0.01 г. приєднують до зворотного холодильника і нагрівають на киплячій водяній бані протягом 1 ч. Після охолоджування до кімнатної температури колбу знов зважують і доводять до первинної маси 95% спиртом.

Вміст колби фільтрують через воронку діаметром 5 см з вкладеним ватяним тампоном завтовшки не більше 0,5 см, відкидаючи перші 15 мл фільтрату; 25 мл фільтрату переносять в груглодону колбу з шліфом місткістю 50 мл і упарюють насухо під вакуумом на ротаційному випарнику. Сухий залишок двічі обробляють 10 мл гарячого 10% розчину натрію хлориду, кожного разу нагріваючи вміст колби на киплячій водяній бані протягом 2 хв. Розчин охолоджують, фільтрують через воронку з ватяним тампоном, змоченим водою, на колонку з поліамідним сорбентом.

Колонку промивають 30 мл води, з них 10 мл використовують для промивання фільтру, який після цього прибирають. Коли над сорбентом залишиться шар рідини завтовшки 7-10 мм. водний елюат відкидають. Елюювання суми флавоноїдів проводять 25 мл 95% спирту, який додають в колонку поступово, порціями по 5 мл. Перші порції елюата (безбарвні і прозорі) збирають в градуйовану пробірку місткістю 10 мл₅ діаметром близько 1 см. Коли елюат придбає забарвлення і об'єм забарвленого елюата в пробірці досягне 1 мл, мірну пробірку прибирають (межа розділу безбарвного водного і забарвленого спиртного шарів елюата в пробірці добре помітна візуально). Елюат з пробірки відкидають. Подальші порції елюата збирають в мірну колбу місткістю 25 мл. Об'єм елюата в колбі доводять 95% спиртом до мітки і перемішують (розчин А). В мірну колбу місткість 10 мл переносять 2 мл розчини А і доводять об’єм розчину 95% спиртом до мітки (розчин Б). Оптичну густину розчину б вимірюють на спектрофотометрі при довжині хвилі 365 нм в кюветі з товщиною шару 10 мм на фоні розчину порівняння.

Паралельно вимірюють оптичну густину елюата розчину ГСО гіперозида: 2 мл 0.1% розчину ГСО гіперозида поміщають в кругло дону колбу місткістю 50 мл з шліфом і упарюють насухо під вакуумом. Вміст колби двічі обробляють 10 мл гарячого 10% розчину натрію хлориду, кожного разу нагріваючи вміст колби на водяній бані протягом 2 мін і зливають розчин на колонку з поліамідним сорбентом через воронку з ватяним тампоном, змоченим водою. Елюат для вимірювання оптичної густини стандартного зразка гіперозиду аналогічно елюату суми флавоноїдів.

Вміст суми флавоноїдів в перерахунку на гіперозид і абсолютно суху сировину у відсотках (Х) обчислюють по формулі:

де D - оптична густина елюата випробовуваного розчину: D₀ - оптична густина елюата розчину ГСО гіперозида в грамах; m₀ - маса ГСО гіперозида в грамах; m – маса сировини в грамах; W – втрата в масі при висушуванні сировини сировини у відсотках.

Примітки. 1. В ході аналізу використовують 3 колонки з поліамідним сорбентом: для отримання випробовуваного розчину, розчину порівняння і розчину ГСО гіперозида.

Приготування колонки: 1 г поліаміду для колоночної хроматографії (ТУ 6-09-10-822-73) поміщають в стаканчик місткістю 50 мл. підливають 30 мл води, перемішують і виливають через воронку в колонку діаметром 1.5 см і заввишки 25 см. В нижню частину колонки заздалегідь поміщають невеликий ватяний тампон, змочений водою. Колонку заповнюють при відкритому крані. Елюювання проводять із швидкістю 4 мл/мі н. не допускаючи оголення поверхні сорбента. Товщина шару рідини над сорбентом повинна бути не менше 4-5 мм

3. Приготування розчину порівняння: розчин порівняння одержують через колонку в мірну колбу місткістю 25 мл. об'єм розчину доводять 95% спиртом до мітки і перемішують.