Диагностика иерсиниоза

Схема 4

Диагностика холеры

Бактериологическая диагностика чумы

ЗАНЯТИЕ 17

ТЕМА. Возбудители зоонозных заболеваний: Туляремия, бруцеллез, сибирская язва. Francisella tularensis, Brucella, Bacillus anthracis. Морфология, биология, культуральные свойства возбудителей туляремии, бруцеллеза, сибирской язвы. Лабораторный диагноз туляремии, бруцеллеза, сибирской язвы. Специфическая профилактика туляремии, бруцеллеза, сибирской язвы

Цель занятия. Ознакомить с основными свойствами возбудителей Francisella tularensis, Brucella, Bacillus anthracis. Рассмотреть эпидемиологию туляремии, бруцеллеза, сибирской язвы. Разобрать этапы бактериологической диагностики туляремии, бруцеллеза, сибирской язвы. Ознакомиться с препаратами, применяемыми для специфической профилактики, лечения туляремии, бруцеллеза, сибирской язвы

Методические указания к практической работе

Продолжительность занятия: 3 академических часа (135 минут)

Место проведения занятия: учебная аудитория

Материально-техническое оснащение – таблицы, стенды, микроскопы, микропрепараты, вакцины

Хронометраж практического занятия:

1. Вводное слово преподавателя – 5 мин

2. Проверка исходного уровня знаний (тест-контроль) – 15 мин

3. Разбор теоретических вопросов по теме «Возбудитель бруцеллеза» – 20 мин

1. Морфология, биологические свойства бруцелл

2. Эпидемиологические особенности бруцеллёза

3. Патогенез бруцеллёза

4. Исследуемый материал при бруцеллезе

5. Лабораторная диагностика бруцеллёза

6. Специфическая профилактика бруцеллёза

4. Разбор теоретических вопросов по теме «Возбудитель туляремии» – 20 мин

1. Морфология, биологические свойства возбудителя туляремии

2. Эпидемиологические особенности туляремии

3. Патогенез туляремии

4. Исследуемый материал

5. Лабораторная диагностика туляремии

6. Специфическая профилактика туляремии

5 . Разбор теоретических вопросов по теме «Возбудитель сибирской язвы» – 20 мин

1. Морфология, биологические свойства возбудителя сибирской язвы

2. Эпидемиологические особенности сибирской язвы

3. Патогенез сибирской язвы

4. Исследуемый материал

5. Лабораторная диагностика сибирской язвы

6. Специфическая профилактика сибирской язвы

6. Выполнение практической работы

Практическая работа

6.1. Возбудитель туляремии

1. Изучение палочек туляремии в мазке из органов (зарисовать)

Туляремийная палочка при бактериоскопическом исследовании обнаруживается в мазках-отпечатках из органов, окрашенных по Романовскому-Гимзе. Бактерии туляремии представляют собой очень мелкие микроорганизмы коковидной или палочковидной фор­мы, окрашенные в красновато-фиолетовый цвет на фоне клеточных элементов органов, окрашенных в фиолетовый цвет.

2. Знакомство со схемой лабораторного диагноза туляремии (зарисовать схему 7, оформить протокол)

Бактериологические, серологические исследования проводятся в лаборатории отдела ООИ.

2.1. Аллергические методы диагностики

2.1.1. Внутрикожная проба с тулярином (положительная с 4–6 дня болезни). После в/кожного введения тулярина 0,1 мл учет реакции через 24 и 48 часов. Если гиперемия и инфильтрат не менее 0,5 см – проба положительная. При появлении только гиперемии и исчезновении ее через сутки – проба расценивается как отрицательная 2.1.2. Реакция лейкоцитолиза (РЛ) – аллергический метод диагностики.

Аллергическая реакция на введение может вызвать ухудшение состояния больного. Поэтому н/кож, в/к проба с тулярином должна применяться с осторожностью.

2.2. Серологические методы диагностики:

2.2.1. РА – диагностический титр 1:100 и выше (с 10–15 дня болезни) 2.2.2. РМА (реакция микроагглютинации).

2.2.3. РПГА – диагностический титр 1:100 и выше (с 7–10 дня болезни) 2.2.4. ИФА (с 6–10 дня болезни) – диагностический титр 1:200 и выше 2.2.5. РНИФ – титр 1:40 и выше.

При отрицательной, сомнительной реакции, при низких разведениях сыворотки – повторное исследование в динамике, вторая сыворотка – через 7–10 дней после первой. Нарастание титра антител в 2–4 раза и выше свидетельствует о свежем случае туляремии и подтверждении диагноза. Максимальное нарастание титра антител достигает на 4–6 неделе болезни.

2.3. Бактериологический метод диагностики:

Посев на питательные среды. Материал для исследования являются: пунктат бубона, соскоб со дня язвы, кровь, отделяемое конъюнктивы. Посеву, как правило, предшествует биологический метод. Биологическая проба – заражение лабораторных животных в/брюшинно и п/к (белые мыши, морские свинки). Реакция иммунофлюоресценции (РИФ), прямой метод.

3. Знакомство с препаратами для специфической диагностики, профилактики и лечения туляремии (записать в тетрадь)

1). Живая туляремийная вакцина (Н.А. Гайский, Б.Я.Эльберт). Живая туляремийная вакцина представляет собой взвесь куль­туры вакцинного штамма, выращенного на искусственной питательной среде и высушенного в условиях вакуума. Вакцинный штамм получен путем лабораторного ослабления вирулентности возбудителя, содержит уменьшенное количество Vi -антигена, обладает высокой иммуногенностью и безвреден для человека. Вакцина вводится накожно или внутрикожно. Создает иммунитет длительностью 6 лет. Вакцинация осуществляется планово в природных очагах туляремии, по эпидемическим показаниям лицам, выезжающим в эндемичные районы или работникам предприятий, перерабатывающих сырье из эндемичных районов (зерно, солома, шкурки животных).

2. Тулярин (туляремийная аллергия). Тулярин выпускают для внутрикожной и накожной пробы. Для постановки внутрикожной пробы применяют корпускулярный тулярин – убитая нагреванием взвесь бактерий в изотоническом растворе натрия хлорида с добавлением 3% глицерина; в 1 мл препарата содержится 500 млн. микробных клеток, поэтому он прозрачен. Для постановки накожной аллергической пробы используют тулярин, в 1 мл, которого содержится 10 млрд. убитых микробных клеток, поэтому препарат мутный.