- •Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии
- •Часть 1
- •Методические указания к практической работе
- •Практическая работа
- •1. Ознакомиться с иммерсионной системой микроскопа
- •8. Просмотр фильмов: «Живая клетка», «l-формы бактерий», «Спора»
- •9. Просмотр фильма: «Жизнь бактериальной клетки»
- •2. Изучение мазка из культуры Bac.Anthracis, окрашенного по Гутштейну (клеточная стенка)
- •3. Изучение устройства фазово-контрастного микроскопа
- •Методические указания к практической работе
- •5. Изучение устройства темнопольной микроскопии
- •Методические указания к практической работе
- •3. Изучение и зарисовка демонстрационных препаратов грибов Mucor, Aspergillus, Penicillium
- •1. Изучение методики приготовления пластинчатого агара
- •Характеристика роста исследуемых культур
- •3. Изучение методики посева культуры на пестрый ряд
- •1. Знакомство со средами и аппаратурой для культивирования анаэробов
- •4. Итоговая контрольная работа по теме: «Физиология микроорганизмов (химический состав, питание, дыхание, питательные среды, ферменты, размножение, стерилизация, дезинфекция)»
- •Характеристика типовых штаммов, входящих в задачи
- •Характеристика выделенных культур
- •1. Знакомство с методикой забора водопроводной воды для бактериологического исследования
- •Расчет наиболее вероятного числа бактерий (нвч) в 100 мл питьевой воды централизованного хозяйственно-питьевого водоснабжения
- •Расчет наиболее вероятного числа бактерий (нвч) в 100 мл воды водоемов
- •5. Знакомство с методикой определения количество микроорганизмов в воздухе
- •2. Знакомство с устройством и работой автоклава, сухожаровой печи
- •2. Изучить методы, доказывающие спонтанные мутации у бактерии:
- •4. Зарисовать схему строения бактериофага
- •5. Определить титр бактериофага
- •Результаты титрования фага по методу Грациа
- •Интерпретация значений диаметров зон задержки роста при определении чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам (Среда агв)
- •Допустимые пределы диаметров зон задержки роста
- •Эталонных штаммов при контроле воспроизводимости
- •И точности результатов диско-диффузионного метода
- •(Среда агв)
- •Определение степени чувствительности кишечной палочки к стрептомицину
- •1. Изучение окрашенных по Граму мазков-отпечатков из органов
- •6.1. Возбудитель холеры
- •1. Зарисовка демонстрационных препаратов холероподобного и Эль-Тор вибрионов
- •Патогенез холеры
- •4. Нарисовать колонии вибрионов на средах сэдх и tcbs
- •6.2. Возбудитель чумы
- •1. Изучение мазка из чистой культуры Yersinia pestis, окраска метиленовым синим
- •2. Изучение Yersinia pestis в мазке-отпечатке из органов, окрашенном по Граму
- •3. Изучение колоний вакцинного штамма палочки чумы на среде Туманского
- •Диагностика иерсиниоза
- •Диагностика холеры
- •Бактериологическая диагностика чумы
- •Практическая работа
- •6.1. Возбудитель туляремии
- •6.2. Возбудитель бруцеллеза
- •6.3. Возбудитель сибирской язвы
- •Бактериологическая диагностика туляремии
- •Бактериологическая диагностика бруцеллеза
- •Бактериологическая диагностика сибирской язвы
- •Список сокращений
1. Изучение окрашенных по Граму мазков-отпечатков из органов
При микроскопическом изучении препарата обращают внимание на соответствие обнаруживаемых в мазке микробов культуре, взятой для заражения. В полях зрения в органах обнаруживаются крупные грамположительные палочки. Мазок зарисовать.
Изучение мазков из гноя, окрашенных по Граму
Для приготовления мазка гной наносят на середину предметного стекла, вторым стеклом каплю закрывают, перемещая стекло так, чтобы мазок занимал две трети стекла. Взяв за концы, стёкла раздвигают, получив два больших равномерных мазка. Мазки высушивают на воздухе, фиксируют в смеси Никифорова, окрашивают по Граму. При наличии в гное стафилококков или стрептококков в мазке обнаруживают грамположительные кокки, расположенные одиночно, короткими цепочками или небольшими скоплениями и лейкоциты, окрашенные грамотрицательно. Иногда видна картина незавершенного фагоцитоза (кокки расположены внутри лейкоцитов). Мазок зарисовать.
2. Изучить технику вскрытия белой мыши, зараженной вакцинным штаммом сибиреязвенного микроба. Зарисовать схему приготовления мазков-отпечатков на предметном столе
Труп белой мыши фиксируют брюшком вверх и дезинфицируют, после обработки спиртом и обжига на шерсти делают продольный разрез кожи от лобка до нижней челюсти, затем дополнительные разрезы в стороны конечностей. Отсепаровывают кожу, изучают состояние подкожных лимфатических узлов. Ножницами отсекают грудину таким образом, чтобы стали доступны изучению легкие и сердце.
Из сердца забирают кровь, для этого раскаленным пинцетом прижигают наружную стенку сердечной мышцы, (фиксируют сердце пинцетом), пастеровской пипеткой прокалывают стенку сердца, в силу капиллярности кровь поступает в пипетку, тут же делают посев ее на МПБ. Из крови сердца и легких готовят мазки отпечатки, для чего стерильными ножницами вырезают кусочек органа и срезом на стекле делают отпечаток. Из парных органов делают два отпечатка. Далее вскрывают брюшную стенку, предварительно простерилизовав, инструменты, готовят мазки из печени, почек, селезенки в определенном порядке:
лимфоузлы
сердце
легкие
печень
почки
селезенка
Для выделения чистой культуры возбудителя делают также посевы из органов на МПБ и МПА.
3. Ознакомиться с методами определения некоторых токсинов микробов (гемолизина), ферментов патогенности (коагулазы, лецитиназы). Оформить протокол. Зарисовать
4. Рейтинговая контрольная работа по теме: «Антагонизм микроорганизмов. Антибиотики. Фаги. Генетика».
5. Подведение итогов занятия – 5 минут
ЗАНЯТИЕ 16
ТЕМА. Возбудители особо опасных и зоонозных инфекций. Холера. Морфология, биология, культуральные свойства Vibrio cholerae. Методика взятия материала от трупа. Транспортировка материала. Методика посева рвотных масс и испражнений на элективные среды. Методы идентификации холерных вибрионов. Бактериологический диагноз холеры. Чума. Yersinia pestis. Морфология, биология, культуральные свойства возбудителя чумы. Лабораторный диагноз чумы. Специфическая профилактика чумы
Цель занятия. Ознакомить с основными свойствами возбудителей холеры и чумы. Рассмотреть эпидемиологию холеры и чумы. Разобрать этапы бактериологической диагностики холеры и чумы. Ознакомиться с препаратами, применяемыми для специфической профилактики, лечения
Методические указания к практической работе
Продолжительность занятия: 3 академических часа (135 минут)
Место проведения занятия: учебная аудитория
Материально-техническое оснащение – таблицы, стенды, микроскопы, микропрепараты, вакцины
Хронометраж практического занятия:
1. Вводное слово преподавателя – 10 минут
2. Проверка исходного уровня знаний (тест-контроль) (Возбудители холеры, чумы, псевдотуберкулеза, кишечного иерсиниоза) – 15 минут
3. Разбор теоретических вопросов по теме: «Возбудитель холеры» –25 мин.
Морфология, биологические свойства Vibrio cholerae
Эпидемиологические особенности холеры
Патогенез холеры
Исследуемый материал при холере
Лабораторная диагностика холеры
Специфическая профилактика холеры
4. Разбор теоретических вопросов по теме: «Возбудитель чумы» –25 мин
Морфология, биологические свойства Yersinia pestis
Эпидемиологические особенности чумы
Патогенез чумы
Исследуемый материал при чуме
Лабораторная диагностика чумы
Специфическая профилактика чумы
5. Разбор теоретических вопросов по теме: «Возбудитель псевдотуберкулеза и кишечного иерсиниоза» – 25 мин
Морфология, биологические свойства возбудителей
Патогенез кишечного иерсиниоза и псевдотуберкулеза
Исследуемый материал при кишечном иерсиниозе и псевдотуберкулезе
Лабораторная диагностика кишечного иерсиниоза и псевдотуберкулеза
Специфическая профилактика кишечного иерсиниоза и псевдотуберкулеза
6. Выполнение практической работы – 35 мин
Практическая работа: