6.1. Возбудитель холеры

1. Зарисовка демонстрационных препаратов холероподобного и Эль-Тор вибрионов

Чистая культура холерного вибриона в мазках, окрашенных по Граму. Холерный вибрион в мазке, окрашенному по Граму, имеет форму изогнутой палочки длиной 1,5–3 мкм, шириной 0,5 мкм, грамотрицательные Вибрион Эль-Тор в мазке-отпечатке со слизистой кишечника погибшего от холера. Вибрион хорошо виден на фоне грамотрицательно окрашенных клеточных элементов слизистой и кишечного содержимого в виде скоплений и ли одиночно расположенных вибрионов (слегка изогнутые палочки с закругленными концами), окрашенных в розовый цвет.

2. Изучение схемы (схема 1) патогенеза холеры (зарисовать, установить связи)

Схема 1

Патогенез холеры

возбудитель дозы 1012 дозы 106	входные ворота пищеварительный тракт
	желудок нейтрализация желудочного сока
нейраминидаза	тонкий кишечник размножение, выделение экзотоксина		гибель холерного вибриона
белковый энтеротоксина - холерогена (экзотоксина)			Комплекс холероген-специфический рецептор активирует аденилатциклазу. Действия простагландинов увеличивается образование циклического аденозинмонофосфата (АМФ).
	Расщепление кислотные остатков ацетилнейраминовой кислоты, образование из ганглиозидов специфических рецепторов
АМФ регулирует посредством ионного насоса секрецию воды и электролитов из клетки в просвет кишечника.
Профузный понос изотонической жидкостью Гибель больного

3. Знакомство со схемой лабораторного диагноза холеры по схеме (зарисовать)

Материал для исследования – испражнения, рвотные массы, дуоденальное содержимое, предметы, загрязненные этими «субстратами» (постельное или нательное белье больных), трупный материал (отрезки тонкой кишки и жёлчный пузырь). Исследуемый материал следует брать до назначения больным химиопрепаратов, поскольку через 1-2 часа после их приема количество вибрионов в испражнениях значительно снижается и через 1-3 суток вибрионы, как правило, не обнаруживаются.

3.1. Бактериологический метод – основной, включает в себя выделение из материала больных чистой культуры, возбудителя с определением биотипа (классический или Эль-Тор) серотипа (Инаба, Огава, Гикошима) и фаготипа. Чистая культура холерного вибриона может быть выделена с прямого посева материала и в посевах со сред обогащения (среды с добавлением желчи). При ускоренном микробиологическом методе положительный ответ можно получить через 24 часа, отрицательный – через 36 часов.

3.2. Серологические методы диагностики

Используются для ретроспективного диагноза у переболевших. Проводится реакция агглютинации, РПГА или ИФА. Обычно исследуются парные сыворотки с интервалом 7–10 дней. Минимальным диагностическим титром РА считается 1:40 и выше или нарастание титра в 4 раза в парных сыворотках.

3.3. Экспресс-диагностика

Проводится в тех случаях, когда клиническая картина весьма подозрительна на таковую при холере. С помощью методов экспресс-диагностики можно через 15 минут–2 часа обнаружить возбудителя в исследуемом материале, провести ускоренную идентификацию.

1. Люминисцентно-серологический метод (реакция иммобилизации холерного вибриона)

2. РПГА с холерным антительным эритроцитарным диагностикумом

3. ИФА (ответ через 1,5–2 ч)

4. ПЦР (ответ через 4–5 ч)

Методы экспресс-диагностики являются сигнальными ориентировочными. Их результаты должны подтверждаться выделением возбудителя.