- •Минобрнауки россии
- •Введение
- •Правила работы и поведения в лаборатории
- •Список необходимого оборудования
- •Порядок выполнения работ и оформления лабораторного журнала
- •Тема 1. Техника микроскопирования (1 ч)
- •Тема 2. Приготовление препаратов микроорганизмов прижизненное изучение микроорганизмов (1 ч)
- •Тема 3. Питательные среды, их приготовление, разливка. Получение элективных культур (1 ч)
- •Тема 4. Экология микроорганизмов. Основы санитарно-бактериологического анализа
- •1000 Л – х микробов
- •Критерии для санитарной оценки воздуха жилых помещений (число микроорганизмов в 1 м3 воздуха) по а.И.Шафиру
- •Тема 5. Получение чистых культур. Изучение особенностей микроорганизмов с целью их идентификации (4 ч)
- •Обнаружение волютина
- •Обнаружение гликогена и гранулезы
- •Тема 6. Изучение ветвящихся и образующих плодовые тела форм бактерий методом элективных культур
- •Тема 7. Трансформация микроорганизмами соединений азота
- •Изучение культуры
- •Закладка элективной культуры азотобактера
- •Изучение культуры
- •Закладка элективных культур первой и второй фаз нитрификации
- •Изучение первой фазы нитрификации
- •Изучение второй фазы нитрификации
- •Закладка элективной культуры
- •Изучение культуры
- •Тема 8. Участие микроорганизмов в круговороте углерода (3 ч)
- •Закладка элективной культуры
- •Изучение культуры
- •Закладка элективной культуры
- •Закладка элективной культуры тионовых серобактерий
- •Закладка элективной культуры десульфатирующих бактерий
- •Изучение культур
- •Рецепты некоторых красителей, индикаторов и растворов
- •Литература
Закладка элективной культуры
Приготовить элективную среду для маслянокислых бактерий: вода – 100 мл, солод – 5 г, мел – 2 г, сахар – 5 г.
Смесь кипятить в течение 5 минут.
Среду заразить семенами гороха. Колбы закрыть плотно ватными пробками. Придать герметичность с помощью полиэтиленовых колпачков.
Инкубировать при t = 30-35ºС в течение 2-5 суток.
Изучение культуры
Изготовить препарат «раздавленная капля».
Окрасить раствором Люголя.
Промикроскопировать, пользуясь объективом х 40. Фиолетовое окрашивание бактериальных клеток подтверждает наличие гранулезы.
Изготовить фиксированный окрашенный препарат.
Изучить, пользуясь иммерсионной системой.
Выполнить рисунок.
При изучении преимущественно выявляются спорообразующие бактерии Clostridium pasteurianum.
Работа 31. Уксуснокислое брожение
Оборудование: пиво, настой чайного гриба, конические колбы, вата, предметные стекла, фуксин, микроскоп с иммерсией, спиртовки, петли.
Ход работы
Закладка элективной культуры
В колбы налить тонкий (0,5 см) слой пива.
Закрыть рыхлыми ватными пробками.
Инкубировать при t = 30ºС в течение 5-7 суток.
Изучение культуры
Изготовить фиксированные окрашенные препараты пленки, образовавшейся на пиве, а также препарат настоя и кусочков чайного гриба.
Изучить под микроскопом с иммерсией. Выполнить рисунки.
Описать характер образовавшихся на пиве пленок.
При микроскопировании выявляются дрожжиMycoderma vini и бактерии Acetobacter aceti, Acetobacter pasteurianum, Acetobacter xylinum.
Рис. 18. Уксуснокислые
бактерии
Тема 9. ТРАНСФОРМАЦИЯ МИКРООРГАНИЗМАМИ
СОЕДИНЕНИЙ СЕРЫ (2 ч)
Работа 32. Серобактерии
Оборудование: цилиндр на 200 мл, конические колбы на 100-150 мл, большие пробирки, гипс, сваренное вкрутую куриное яйцо, почва, ил, сточная вода, остатки водных растений, предметные и покровные стекла, красители, компоненты для элективных питательных сред, ил из серного источника, микроскопы с иммерсией, спиртовки, петли, пинцеты, соль Мора ((NH4)2SO4·FeSO4·6H2O), железный купорос (FeSO4·7H2O), парафин.
Ход работы
Закладка культур бесцветных собственно серобактерий
Высокий цилиндр заполнить доверху водой.
На дно опустить яйцо, немного гипса, остатки водных растений.
Заразить илом и сточной водой, закрыть марлей.
Инкубировать 1-1,5 месяца при комнатной температуре.
На поверхности среды развивается пленка из нитей серобактерий (например, p. Beggiatoa). В клетках видны отложения капельножидкой серы.
Рис. 19. Бесцветные бактерии, окисляющие сероводород.
А. Beggiatoa gigantean с включениями серы. Б. Розетки Thiothrix. В. Achromatium oxaliferum с включениями карбоната кальция и серы. Г. Thiovulum с включениями серы
Закладка элективной культуры тионовых серобактерий
Приготовить питательную среду: водопроводная вода – 100 мл, Na2S2O3 – 0,5 г, NaHCO3 – 0,1 г, K2HPO4 – 0,02 г, NH4Cl – 0,01 г, MgCl2 – 0,01 г.
Разлить по 30-50 мл в колбы. Заразить илом и сточной водой.
Инкубировать при t = 30ºС в течение 7-10 суток.
В среде может накапливаться свободная сера, а из среды выделяются чаще бактерии p. Thiobacillus.