Гематологические исследования

1. Эритроциты: роль в организме. Морфология клеток эритроцитарного ростка, ростовые факторы.

2. Реактивные изменения в системе кроветворения при различных заболеваниях (вирусных, бактериальных, паразитарных инвазиях, хирургических вмешательствах).

3. Гипохромные анемии и перегрузка железом.

4. Клиническая значимость изменения СОЭ.

5. Мегалобластные анемии.

6. Современные представления о миелодиспластическом синдроме.

7. Гемолитические анемии.

8. Современная лабораторная диагностика лейкозов (иммунофенотипирование лейкозов).

9. Наследственные гемоглобинопатии.

10. Апластическая, наследственные дизэритропоэтические и симптоматические анемии.

11. Патологические состояния, обусловленные поступлением отдельных белков тканей в кровь и мочу: миоглобинемии и миоглобинурии, гемоглобинопатии и гемоглобиноурии.

12. Лимфопролиферативные заболевания.

2.1. Эритроциты: роль в организме. Морфология клеток эритроцитарного ростка, ростовые факторы

• высокоспециализированные клетки, основной функцией которых является транспорт кислорода из легких в ткани и транспорт диоксида углерода (CO2) в обратном направлении. Продолжительность жизни эритроцитов составляет в среднем 120 суток; разрушение их происходит в клетках ретикуло-эндотелиальной системы. В отличие от большинства клеток организма, у эритроцита отсутствуют клеточное ядро, рибосомы и митохондрии, что повышает содержание гемоглобина. У позвоночных, кроме млекопитающих, эритроциты имеют ядро, у эритроцитов млекопитающих ядро отсутствует.

• цитоплазма богата гемоглобином— пигментом красного цвета, содержащим атом железа, который способен связывать кислород и придает эритроцитам красный цвет.

Эритроциты

• При гематологических заболеваниях обследование начинают с общего анализа крови.

• Методы окрашивания мазков – по Райту, Маю-Грюнвальду с докраской по Гимзе – основаны на принципе Романовского.

• Округлая форма в мазках и однородность величины (средний диаметр 8 мкм).

• Незначительные колебания размеров – анизоцитоз, формы – пойкилоцитоз.

• Двояковогнутая форма (в центре – зона просветления).

• Основная функция эритроцитов – доставка кислорода к тканям и транспортировка углекислого газа из тканей в легкие.

• Обеспечивается белком Гемоглобином (Hb).

• Основная масса Hbвзрослого –HbA. Молекула состоит из двух пар полипептидных цепей: 2-хα- и 2-хβ-цепей, каждая из которых имеет собственную гемовую группу.

• К малым фракциям Hbвзрослых относятHbF(2α- и 2γ-цепи) иHbA2 (2α- и 2δ-цепи).

• У плода преобладает HbF. Существует 2 типаγ-цепей глобина –AγиGγ, различающиеся аминокислотой в 136 положении: в Аγэто аланин, вGγ это глицин.

• Гем синтезируется в митохондриях; цепи глобина синтезируются на полирибосомах.

• Зрелые эритроциты лишены митохондрий и ферментов, необходимых для окислительного фосфорилирования, поэтому зрелый эритроцит в обеспечении энергозатрат на поддержание объема, формы и гибкости полностью зависит от анаэробного гликолиза.

• Кроме того, эритроцит способен к образованию восстановителей: НАДН – в процессе анаэробного гликолиза и НАДФН – в процессе пентозофосфатного пути. Для связывания кислорода эритроцит должен содержать двухвалентное железо. Образующийся в процессе жизнедеятельности эритроцита метгемоглобин (в нем железо окисленно до трехвалентного) превращается в гемоглобин под действием восстанавливающих ферментов: НАДН- и НАДФН-метгемоглобинредуктаз.

• Для осуществления газообмена гибкому двояковыгнутому эритроциту диаметром 8 мкм нужно пройти через капилляры, диаметр которых составляет всего 3,5 мкм.

• Поскольку в зрелом эритроците обновление ферментов невозможно, по мере старения клетки постепенно нарушается е метаболизм и снижается жизнеспособность.

• Отжив свой срок жизни (в среднем 120 сут) и пройдя по сосудистому руслу почти 500 км, стареющие эритроциты разрушаются макрофагами селезенки и печени (внесосудистый гемолиз).

Гемоглобин (Hb)

• Hb F (fetus)

• Hb A (adult)

• А также патологические формы

• Основная биологическая роль гемоглобина– участие в газообмене между организмом и внешней средой. Гемоглобин обеспечивает перенос кровью кислорода от легких к тканям и транспорт углекислоты от тканей к легким.

• На долю Hb приходится около 98 % массы белков цитоплазмы эритроцитов(в отсутствии других структурных компонентов). Гемоглобин является тетрамером, в котором каждая белковая цепь содержитгем — комплекс протопорфирина IX с ионом двухвалентного железа, кислород обратимо связывается с ионом Fe2+ гемоглобина, образуяоксигемоглобинHbO₂:

Hb + O2   HbO₂

• Транспорт углекислого газа эритроцитами происходит с участием карбоангидразы, содержащейся в их цитоплазме. Этот фермент катализирует обратимое образование бикарбоната из воды и углекислого газа, диффундирующего в эритроциты:

• H₂O + CO₂H⁺+ HCO^3-

• Другой не менее важной функцией гемоглобинаявляется поддержание кислотно-щелочного равновесия в организме.

Морфология

• У большинства групп позвоночных эритроциты имеют ядро и другие органоиды.

• У млекопитающих зрелые эритроциты лишены ядер, внутренних мембран и большинства органоидов. Ядра выбрасываются из клеток-предшественников в ходе эритропоэза. Обычно эритроциты млекопитающих имеют форму двояковогнутого диска. У некоторых животных (например, верблюда) эритроциты имеют овальную форму.

• Содержимое эритроцитапредставлено главным образом дыхательным пигментом гемоглобином, обусловливающим красный цвет крови. Однако на ранних стадиях количество гемоглобина в них мало, и на стадии эритробластов цвет клетки синий; позже клетка становится серой и, лишь полностью созрев, приобретает красную окраску.

• Важную роль в эритроците выполняет клеточная (плазматическая) мембрана, пропускающая газы (кислород, углекислый газ), ионы (Na, K) и воду. Плазмолемму пронизываюттрансмембранные белки — гликофорины, которые, благодаря большому количеству остатков сиаловой кислоты,ответственны примерно за 60 % отрицательного заряда на поверхности эритроцитов(который необходим  для предотвращения спонтанной агрегации клеток).

• На поверхности липопротеидной мембраны находятся специфические антигены гликопротеидной природы — агглютиногены—факторы систем групп крови(на данный момент изучено более 15 систем групп крови: AB0,резус фактор, антиген Даффи, антиген Келл, антиген Кидд, обусловливающие агглютинацию эритроцитов при действии специфических агглютининов.

Эритропоэз

• Формирование эритроцитов (эритропоэз) происходитв костном мозге черепа, ребер и позвоночника, а у детей — также и в костном мозге в окончаниях длинных костей рук и ног.Прежде чем выйти в кровь, эритроциты последовательно проходятнесколько стадий пролиферации и дифференцировки в составе эритрона — красного ростка кроветворения.

Ростовые кроветворные факторы (РКФ)

• Пролиферация СКК и клеток-предшественников регулируется биологически активными веществами – индукторами роста и дифференцировки, способными действовать локально или через системный кровоток. Вещества синтезируются клетками стромы и самими кроветворными клетками (колониестимулирующие факторы, интерлейкины), почками (эритропоэтин), печенью (тромбопоэтин).

• РКФ являются гликопротеидами. Они обеспечивают самообновление СКК и пролиферацию и дифференцировку коммитированных клеток-предшественников, регулируют функции дифференцированных клеток.

• Факторы, стимулирующие образование клетками-предшественниками колоний в условиях invitro, называютсяКСФ.

• GATA-1(Eryf1, GATA-связывающий фактор 1) иGATA-2занимают центральное положение средиэритроид- специфичных транскрипционных факторов. Им отводитсяключевая роль в конечной дифференцировке и созревании эритроидной клетки.

• Факторы транскрипции (транскрипционные факторы) — белки, контролирующие процесс синтеза мРНК на матрице ДНК (транскрипцию) путем связывания со специфичными участками ДНК. Транскрипционные факторы выполняют свою функцию либо самостоятельно, либо в комплексе с другими белками.

• Главнымфактором роста клеток эритроидного ростка являетсяэритропоэтин.

• Эритропоэтин — физиологический стимулятор эритропоэза. Он активирует митоз и созревание эритроцитов из клеток-предшественников эритроцитарного ряда.Клетки-предшественникиэритропоэтин побуждает кпролиферации и дифференцировке, асозревающие клетки – к синтезу гемолглобина.