зеленый практикуп по фозиологии

время полужизни мембранных белков составляет в среднем около 70

часов.

Задача №9.

Какова роль липидов в проявлении функциональной активности интегральных белков?

Эталон ответа.

Считается, что интегральные белки проявляют свою активность только в том случае, если они находятся внутри гидрофобной части бислоя мембран, где они приобретают необходимую для проявления своей активности пространственную - спиральную конфигурацию. За немногим исключением, гидрофобные участки интегральных белков связываются с окружающими их липидами нековалентно и собирают вокруг себя специфические липиды в форме “воротника” или ореола.

Изменение количества липидов в ореоле ведет к изменению пространственной конфигурации функциональной активности белков.

Задача №10.

Влияет ли на липидный состав мембран характер питания человека?

Эталон ответа.

Влияет, и существенным образом. Так увеличение в пище жирных кислот с ненасыщенными связями увеличивает более жирное состояние липидов мембран клеток различных тканей, изменяет соотношения фосфолипидов к сфинголипидам, липидов к белкам и приводит к улучшению функции мембраны клеток. Избыток холестерина в пище приводит к увеличению его содержания в мембранах, что сопровождается увеличением микровязкости бислоя,

понижению скорости диффузии некоторых веществ через мембрану в клетку, что отрицательно сказывается на функции клеток. В тоже

11

время, дефицит жирных кислот и холестерина в пище нарушает липидный состав мембран и функцию клеток.

Задача №11.

Оказывают ли витамины свое влияние на липиды бислоя?

Эталон ответа.

Витамины А, Е, С, Р и группы В улучшают обмен липидов в мембране клеток, снижают их микровязкость, регулируют активность различных ферментов, регулирующих обмен липидов в мембранах,

улучшают диффузию веществ через мембрану. Так, в эритроцитах, это приводит к повышению эластичности мембраны, что повышает их транспортную функцию.

Задача №12.

Опишите возможные механизмы, с помощью которых вода проникает через плазматическую мембрану.

Эталон ответа.

В основе аномально высокой проницаемости плазматической мембраны для полярных молекул воды лежат две основных причины.

Во-первых, наличие фиксированных водных каналов, которые могут быть образованы интегральными белками - аквапоринами. Во-вторых,

наличие лабильных водных каналов, которые могут образовываться между углеводородными цепями липидных молекул бислоя в результате их тепловых флуктуаций. Вода проходит через мембраны под действием осмотического давления, создаваемого активным транспортом солей. Данных о наличии истинно активного транспорта воды нет.

Задача №13.

12

Какие данные свидетельствуют о справедливости модели липидного бислоя плазматических мембран?

Эталон ответа.

В пользу липидного бислоя мембран свидетельствуют следующие данные:

1.Содержание липидов в мембране согласуется с концепцией бислоя, что впервые было показано Гортером и Гренделом (1925 г.).

2.Проникающая способность неэлектролитов соответствует их коэффициенту распределения в системе масло/вода, т.е. чем выше сродство молекул к липидной фазе, по сравнению с водой, тем легче они проходят через мембрану.

3.Электрическая емкость плазматических мембран (10-6ф/см2)

примерно равна емкости липидного слоя толщиной в две

фосфолипидных молекулы, расположенных “конец в конец” (т.е. 6-7,5

нМ).

4.Толщина липидного слоя, определяемая как удвоенная длина одной молекулы мембранного липида, примерно равна толщине внутреннего слабоконтрастного слоя (7,5 нМ) модели элементарной мембраны Д. Робертсона (1955 г.), видимой на электронных микрофотографиях.

5.Электронно-микроскопические исследования, с применением метода замораживание-скалывание и замораживание-травление,

показывают, что плоскость скола проходит обычно посередине мембраны, согласно представлению о разделении бислоя на два монослоя.

6. Основные свойства искусственных липидных бислоев в основном аналогичны соответствующим свойствам клеточных мембран.

Задача №14.

13

Перечислите основные физиологические функции биомембран клетки.

Эталон ответа.

Бислойные клеточные мембраны формируют не только различные поверхности клеточных органел, но и служат структурным каркасом,

на котором протекают различные биохимические превращения.

Мембраны ответственны за:

1.Клеточную и субклеточную компартментализацию.

2.Регуляцию состава внутриклеточной среды, опосредуемую селективной проницаемостью и транспортными механизмами.

3.Регуляцию клеточного метаболизма путем контроля за концентрацией кофакторов и субстратов ферментов, а так же активность самих ферментов, которые находятся в упорядоченном состоянии на поверхности мембран или погружены в нее.

4.Рецепцию и передачу различных химических сигналов от поверхностных рецепторов расположенных в мембране.

5.Электрическую активность, ответственную за передачу информации, и/или регуляцию транспорта веществ через мембрану.

6.Эндо - и экзоцитоз.

7.Формирование вне- и внутриклеточных контактов.

Задача №15.

Чем отличается облегченная диффузия от простой?

Эталон ответа.

Облегченная диффузия веществ через мембрану осуществляется с участием специализированных белковых переносчиков, за счет чего значительно ускоряется их транспорт. В отличие от простой диффузии, облегченная диффузия характеризуется кинетикой насыщения и укладывается в рамках кинетики Михаэлиса-Менте. Это

14

свидетельствует о том, что число транспортируемых молекул достигает максимума в соединении с существующим числом переносчиков. Кроме этого, транспорт веществ, посредством облегченной диффузии, можно предотвратить действием различных специфических блокаторов.

Задача №16.

Какие факторы влияют на скорость облегченной диффузии?

Эталон ответа.

1.На скорость облегченной диффузии влияют следующие факторы:

2.Разность концентраций переносимого вещества.

3.Разность электрического потенциала для переносимого вещества.

4.Количество в мембране переносчиков.

5.Состояние активности переносчиков.

6.Температура среды.

7.Стерические особенности транспортируемого вещества (L и D

изомеры).

Задача №17.

Какие факторы отличают простую диффузию веществ от облегченной?

Эталон ответа.

Основными факторами, отличающими простую диффузию веществ от облегченной можно считать:

1. Отсутствие в мембране специализированного белкового переносчика-транспортера. Молекулы растворенного в воде вещества,

контактирующие с липидным бислоем, могут погрузиться в липидную фазу в силу теплового движения и пересечь липидный бислой,

оказавшись, в конечном итоге, в водной фазе по другую сторону мембраны. Чтобы перейти из водной фазы в липидную, растворенная

15

в воде молекула должна сначала разорвать все водородные связи с водой, около 5 ккал на моль водородных связей. То есть, молекулы,

образующие с водой минимальное число водородных связей, будут быстро внедряться в липидный бислой (скорость процесса зависит от температуры). В то же время полярные молекулы, имеющие водородные связи с водой, вряд ли будут растворяться в бислое.

2. Пропорциональность между концентрацией во внеклеточной среде и скоростью проникновения вещества в клетку наблюдается в широком диапазоне концентраций, поскольку результирующая скорость переноса определяется в числе растворенных молекул,

соударяющихся с мембраной по разные ее стороны. Эта пропорциональность характеризуется кинетикой без насыщения, в

отличие от переноса, осуществляемого через каналы или с помощью переносчиков.

Задача №18.

Чем активный транспорт веществ, через плазматические мембраны,

отличается от облегченной диффузии?

Эталон ответа.

В отличие от облегченной диффузии, которая осуществляет транспорт веществ за счет потенциальной энергии, запасенной в форме разности концентрации вещества на противоположных сторонах мембраны,

активный транспорт веществ обеспечивает перенос через мембрану против концентрационного, а, в некоторых случаях, и против электрического градиентов, обеспечивая неравновесное распределение веществ, и требует метаболической энергии, которая обычно поступает в форме АТФ. Если поступление энергии блокируется ингибитором метаболизма (динитрофенол), то активный транспорт веществ подавляется, и их распределение по обе стороны

16

плазматической мембраны будет определяться процессами пассивной и облегченной диффузии. Системы, с помощью которых осуществляется активный транспорт веществ против их концентрационных градиентов, обобщенно называют мембранными насосами, а способность использовать энергию, высвобождающуюся при гидролизе АТФ ферментами, присутствующими в мембране -

АТФазами. При этом АТФазы могут быть как частью насоса, так и существовать отдельно. Наиболее известными и изученными мембранными насосами являются: Na+/K+-насос (Na+/K+-АТФаза), Са2+-насос (Са2+-АТФаза), H+/K+-насос (H+/K+-АТФаза).

ЗАНЯТИЕ № 2.

ТЕМА: БИОЭЛЕКТРИЧЕСКИЕ ЯВЛЕНИЯ В ОРГАНИЗМЕ. ПОТЕНЦИАЛ ПОКОЯ

1.Продолжительность занятия - 2 часa.

2.План и организация занятия.

1. Подготовительный этап занятия:

а) организационные мероприятия - 5 мин.

б) проверка и коррекция исходного уровня знаний, посредством разбора материала в устной форме или с использованием электронного учебника - 20 мин.

2. Основной этап занятия:

а) выполнение практических работ - 20 мин.

б) запись протокола исследования - 15 мин.

в) анализ результатов исследования - 10 мин.

3. Конечный этап занятия:

17

а) контроль конечного уровня усвоения учебного материала тестовым

контролем или решением ситуационных задач - 20 мин.

3. Учебные цели занятия.

ЗНАТЬ:

1.Учение о неравномерном распределении ионов в возбудимых тканях, о трансмембранном электрохимическом градиенте и равновесном потенциале. Уравнения Нернста и Гольдмана.

2.Мембранно-ионные механизмы происхождения, физические характеристики и физиологическую роль потенциала покоя.

3.Основные методы регистрации потенциала покоя.

4.Историю учения об электрических явлениях в возбудимых тканях.

УМЕТЬ:

1.Рисовать схему эквивалентной электрической модели плазматической мембраны.

2.Строить зависимость «сила-длительность», вычислять реобазу и хронаксию.

4. Методика проведения занятия.

1. Подготовительный этап занятия.

В начале занятия необходимо сформулировать его цели и задачи,

что студенты должны знать и уметь по окончанию занятия. Написать на доске тему и цели занятия. Объяснить студентам, что знание материала этой темы необходимо для понимания механизмов нервной регуляции и деятельности внутренних органов, а полученные практические навыки будут необходимы при изучении других разделов физиологии, при обучении на последних теоретических и клинических кафедрах.

Остальную часть подготовительного этапа занятия следует посвятить контролю и коррекции исходного уровня знания студентов.

18

В процессе разбора материала выяснить все вопросы занятия, при этом студенты могут пользоваться любой учебной литературой:

учебники, монографии, справочники, атласы, электронные учебники и др.

2. Основной этап занятия.

На этом этапе занятия студенты выполняют экспериментальные исследования. Перед проведением каждого исследования преподавателю необходимо четко сформулировать цель и продемонстрировать ход его выполнения. После проведения исследований проводится обсуждение полученных результатов,

делаются выводы и оформляются отчеты.

В ходе обсуждения полученных результатов необходимо еще раз обратить внимание на основные цели занятия, на достоинства и недостатки различных методов исследования, исторические аспекты развития представлений о природе биоэлектрических явлений.

3. Заключительный этап занятия.

На этом этапе занятия проводится контроль конечного уровня знания студентов, для чего рекомендуется использовать либо тестовый контроль знаний, либо ввести решений ситуационных задач.

При решении ситуационных задач, для расчета предельных значений Епп различных клеток, соответствующих их калиевым и натриевым равновесным потенциалам, рекомендуется использовать формулу Нернста в следующем виде:

Епп=Ек=61· lg[К+]нар/[К+]внутр

где Епп - значение мембранного потенциала покоя.

При рассмотрении факторов, от которых зависят Епп, рекомендуется пользоваться редуцированным уравнением постоянного поля Гольдмана:

19

Ем=61· lgPNa[Na+]нар/Pк[K+]внутр

где Ем - это Епп, а PNa+ и Pк+ - проницаемость мембраны для ионов калия и натрия в состояния покоя. При использовании редуцированных уравнений постоянного поля предполагается, что мембрана клетки проницаема только для ионов натрия и калия, и что концентрация калия вне клетки и ионов натрия внутри клетки практически равны нулю.

В заключение занятия преподаватель проверяет и подписывает отчеты студентов, задает задание для самостоятельной подготовки к следующему занятию.

Лабораторные работы.

1.Регистрация реобазы и хронаксии у человека.

2.Работа на ЭВМ с использованием электронной модели возбудимой клетки с целью построения графика зависимости

«сила-длительность».

3.Работа на ЭВМ по моделированию потенциала покоя.

4.Выполнение работ с использованием виртуального практикума.

5.Просмотр видеофильмов.

5. Ситуационные задачи для определения конечного уровня

знаний студентов.

Задача № 1.

Концентрация ионов калия внутри клеток в 10 раз выше, чем вне ее.

Мембрана клеток непроницаема для ионов хлора. Чему равно предельное значение ПП этой клетки? Почему в действительности ПП клетки не достигает этого значения?

Эталон ответа.

Предельное значение ПП клетки будет соответствовать значению ее калиевого равновесного потенциала, которое можно вычислить по

20