Добавил:
ivanov666
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз:
Предмет:
Файл:Применение комбинированных препаратов (эмексид и смектовет) при послеродовом эндометрите у коров и желудочно-кишечных болезнях у телят. Монография
.pdf
хозяйствах и множественную устойчивость выделяемой
микрофлоры к большинству противомикробных средств
(DeFrancesco еt аl., 2004; Berge еt аl., 2006; Ruzauskas
еt аl, 2006; Davis еt аl., 2007; Garcia-Feliz еt аl., 2008;
Platt еt аl., 2008).
Некоторые исследователи сосредоточили свое внимание на выделении и изучении шига-токсинпродуцирующих штаммов эшерихий, некоторые из них связаны
с заболеваниями людей, т. е. имеют эпидемиологическое
значение (Arya еt аl., 2008; Oporto еt аl. 2008).
Зарубежные авторы сообщают о проводимых в последние годы исследованиях по индикации и идентификации
генов, ответственных за устойчивость микроорганизмов,
выделяемых при диарее телят, к противомикробным средствам (Kang еt аl., 2004; Ahmed еt аl., 2009; Harvey еt аl.,
2009; Harrera-Luna еt аl., 2009; Havlickova еt аl., 2009).
Некоторые из них указывают на схожесть плазмид,
выделенных от людей и животных (Mulvey еt аl., 2009).
В качестве средств, предотвращающих развитие диареи, рекомендуют использовать бактериофаги
(Jamalludeen еt аl., 2009), бета-глюканы (Stuyven еt аl.,
2009), микрокапсулированный иммуноглобулин У (Li еt
аl., 2009), гомеопатические (Kroupova еt аl., 2007) и другие средства, альтернативные антибиотикам (Sedlacek еt
аl., 1999; Pejsak еt аl., 2005; Vondruskova, еt аl., 2010).
* * *
Желудочно-кишечные болезни широко распространены среди телят в первую неделю жизни. Их причинами служат различные нарушения условий содержания
и кормления беременных животных и самих новорожденных. В результате этого происходит заселение кишечника новорожденных условно-патогенной микрофлорой,
71
которая в процессе жизнедеятельности вызывает заболевания, проявляющиеся диареей, интоксикацией, обезвоживанием.
В качестве средств профилактики рекомендуется использовать вакцинные и сывороточные препараты, а также пробиотики, способствующие формированию нормального микробиоценоза кишечника у телят в первую
неделю жизни.
Сдерживание развития условно-патогенной микрофлоры является главной задачей терапии при этих заболеваниях. Широко применяемые до последнего времени
антибиотические препараты теряют свою значимость, так
как в результате формирования устойчивости микрофлоры не обеспечивают эффективного лечения. Кроме того,
на первый план выходят вопросы высокого и длительного содержания остаточных количеств антибиотиков и их
метаболитов в продуктах животного происхождения.
Пробиотики в целом хорошо зарекомендовали себя
как средства восстановления нормофлоры кишечника
при возникновении дисбактериоза после применения
противомикробных средств. Но как средства лечения они
недостаточно эффективны.
Считаем, что перспективным в терапии желудочно-кишечных болезней, вызываемых условно-патогенной
микрофлорой у телят, является использование препаратов на основе комбинации сульфаниламид-триметоприм,
которая обладает бактерицидностью при отсутствии отрицательных свойств антибиотиков (побочное действие,
длительные сроки выбраковки продукции, дисбактериоз
и др.), с введением в их состав средств патогенетической
терапии.
72
2. КОМПЛЕКСНЫЕ ПРЕПАРАТЫ ЭМЕКСИД
И СМЕКТОВЕТ
2.1. Препарат эмексид для лечения
острого послеродового эндометрита у коров
2.1.1. Антимикробная активность
и токсикологические параметры эмексида
Эмексид – оригинальный комплексный препарат для
лечения острого послеродового эндометрита у коров,
разработанный совместно с ЗАО «Росветфарм». В его
состав входит антибактериальный компонент из группы фторхинолонов третьего поколения – энрофлоксацин
и противопротозойный компонент из группы нитроимидазолов – метронидазол.
2.1.1.1. Микробиоценоз влагалищно-цервикальной слизи
у коров при послеродовом эндометрите
При изучении этиологии острого послеродового эндометрита у коров нами было установлено, что ведущее
значение в его развитии играет условно-патогенная микрофлора. При бактериологическом исследовании влагалищно-цервикальной слизи от 30 коров преимущественно выделяли стрептококки, стафилококки и кишечную
палочку. Результаты бактериологических исследований
представлены в табл. 1.
В подавляющем большинстве случаев (90,32 %) высеивали ассоциации микроорганизмов, состоящие из 2– видов, причем Proteus vulgaris, Bacillus sp., Citrobacter sp.,
Clostridia sporogenes, Enterococcus faecium высеивали
исключительно в ассоциациях. При остром послеродовом эндометрите наиболее часто выделяли ассоциации
Escherichia coli + Streptococcus pyogenes, Staphylococcus
73
aureus + Streptococcus pyogenes и Proteus vulgaris + Staphy-
lococcus epidermidis.
Таблица 1
Микробиоценоз влагалищно-цервикальной слизи коров,
больных острым послеродовым эндометритом
Выделено
Выделенная
микрофлора
Streptococcus spp.
в том числе Strept.
pyogenes
Escherichia coli
в том числе патогенная
E. coli
Staphylococcus spp.
в том числе Staph. aureus
Proteus vulgaris
Bacillus sp.
Enterococcus faecium
Citrobacter sp.
Clostridia sporogenes
Всего 62 100 6 9,68 56 90,32
культур
кол-во %
18 29,03 1 1,61 17 27,42
13 20,97 1 1,61 12 19,36
18 29,03 3 4,84 15 24,19
5 8,07 3 4,84 4 6,45
12 19,36 2 3,23 10 16,13
5 8,07 1 1,61 4 6,45
5 8,07 - - 5 8,07
5 8,07 - - 5 8,07
2 3,23 - - 2 3,23
1 1,61 - - 1 1,61
1 1,61 - - 1 1,61
монокультур ассоциаций
кол-во % кол-во %
В том числе
Была определена чувствительность наиболее часто выделяемой микрофлоры (Streptococcus spp., Staphylococcus
spp., Enterococcus faecium, Escherichia coli) к широко используемым в хозяйствах антибактериальным препаратам.
Чувствительность микрофлоры определяли дискодиффузионным методом. Результаты исследования представлены в табл. 2.
Проведенная нами подтитровка показала высокую
устойчивость микрофлоры к бензилпенициллину, полимиксину, канамицину и фурадонину, совершенно не дав
задержки роста. К четырем антибиотикам (стрептомицин,
гентамицин, энрофлоксацин, тилозин) выделенная микро-
74
флора проявила высокую чувствительность, что в данном
случае может служить основанием к применению химиотерапевтических препаратов на основе этих антибиотиков
для лечения острого послеродового эндометрита.
Таблица 2
Чувствительность микрофлоры, выделенной
при остром послеродовом эндометрите, к антибактериальным
препаратам in vitro
Препарат
Полимиксин R R I R
Стрептомицин S S S S
Канамицин R R R I
Карбенициллин R S S S
Неомицин S R R R
Фурадонин R R R R
Тетрациклин S R R S
Линкомицин S S R R
Ванкомицин R S R R
Бензилпенициллин I R R R
Левомицетин R S S R
Ципрофлоксацин S R S S
Гентамицин S S S S
Цефазолин R R R I
Ампициллин S R R S
Метронидазол R R R R
Энрофлоксацин S S S S
Тилозин S S S S
Streptococ-
cus spp.
Staphylococ
cus spp.
Entero-
coccus
faecium
Escheri-
chia coli
Примечание. S – чувствителен, I – умеренно чувствителен, R – рези-
стентен.
Для установления этиологической роли возбудителей хламидиоза, кампилобактериоза и трихомоноза
в возникновении острого послеродового эндометрита
в ЗАО «Солнечное» ПУ «Новорогалевское» проведены
75
дополнительные лабораторные исследования, по результатам которых перечисленных выше возбудителей
не выявлено.
2.1.1.2.Антимикробная активность эмексида
Предварительные испытания антимикробной активности эмексида проводили дискодиффузионным методом.
Определяли чувствительность препарата к референтной
микрофлоре (Staph. aureus ATCC 6538 P, E. coli ATCC
25922, Enterobacter spp., Proteus vulgaris) и смешанной
микрофлоре, выделенной из влагалищно-цервикальной
слизи у 12 коров с острым послеродовым эндометритом.
Отбор проб проводили по методике М. А. Лучко (1988)
в трех хозяйствах Новосибирской области (ОАО племзавод «Учхоз Тулинское», ЗАО «Солнечное» ПУ «Новорогалевское», СПК «Кирзинское»). Результаты исследований представлены в табл. 3.
Таблица 3
Антимикробная активность эмексида
и его действующих веществ in vitro, мм
Микрофлора
Полевая микрофлора (n = 12) 39 ± 1,60 - 42 ± 1,10
Референтная микрофлора
Staph. aureus ATCC 6538
E. coli ATCC 25922 35 - 34
Proteus vulgaris 45 - 45
Enterobacter sp. 35 20 35
Энрофлок-
сацин
40 - 40
Метрони-
дазол
Эмексид
Как видно из полученных результатов, метронидазол,
входящий в состав эмексида, потенцирует антимикробное действие энрофлоксацина в отношении полевой микрофлоры, что выражается увеличением зоны задержки
роста на 16,38 %. Поскольку зона задержки роста при
76
тестировании эмексида была значительно больше (35–
45 мм), чем требуется (10 мм) для признания микрофлоры чувствительной, его следует считать высокоэффективным. Данное обстоятельство служит основанием для
рекомендации его к более глубокому изучению и к широкому внедрению в практику лечения острого послеродового эндометрита.
На следующем этапе одновременно с установлением
лечебной эффективности более подробно изучали активность препарата и его действующих веществ в отношении наиболее часто выделяемой микрофлоры из влагалищно-цервикальной слизи при остром послеродовом
эндометрите (табл. 4).
Следует отметить, что концентрацию действующего
вещества в эмексиде рассчитывали по энрофлоксацину.
Как видно из таблицы 4, комбинация действующих веществ и вспомогательных компонентов в препарате обладает выраженным антимикробным действием, причем
входящий в состав препарата метронидазол, не проявляя
антимикробного действия на микрофлору, оказывал потенцирующее влияние. Так, минимальная подавляющая
концентрация эмексида по сравнению с его основным
действующим веществом (энрофлоксацин) уменьшилась
по отношению к патогенной E. сoli в 20, к Staphylococcus
spp. в 25 раз, а к Streptococcus spp. в 50 раз.
Таблица 4
Чувствительность микрофлоры при остром послеродовом
эндометрите к эмексиду и его действующим веществам, мкг/мл
Выделенная
микрофлора
Streptococcus spp.
Escherichia coli (патогенная)
Staphylococcus spp.
Антибактериальный препарат
эмексид
0,185 9,375 0,185 3,75 0,375 9,375 -
77
энрофлок-
сацин
метрони-
дазол
2.1.1.3. Параметры острой токсичности эмексида
Токсикологические параметры эмексида определяли в соответствии с «Методическими указаниями по определению токсических свойств препаратов, применяемых в ветеринарии и животноводстве»
(1988), некоторые исследования проведены в соответствии с «Руководством по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических
веществ» (2005).
Острую токсичность изучали на 98 беспородных
белых мышах обоих полов массой 19–22 г, прошедших
предварительное карантинирование в течение 15 дней.
На предварительном этапе между дозами были взяты
широкие интервалы и на каждую дозу использовали по
3 животных. Для окончательного опыта дозы подбирали
так, чтобы минимальная не вызывала гибели животных,
а максимальная – 100 %-ю гибель, и между ними не менее четырех промежуточных доз. В качестве растворителя использовали дистиллированную воду.
Максимально переносимую и токсическую дозу препарата определяли на 18 мышах. Животных разделили на
6 групп по 3 мыши в каждой – 5 опытных и контрольную.
Эмексид вводили подопытным животным в желудок
однократно в дозах от 0,2 до 1,0 мл. Пересчет производили по действующему веществу (энрофлоксацин+метронидазол), содержание которых в 1 мл составляло 10
и 5 мг соответственно. По сумме действующих веществ
были исследованы следующие дозы: 150, 300, 450, 600
и 750 мг/кг массы тела. Животным контрольной группы
вводили по 0,5 мл дистиллированной воды. За мышами проводили наблюдения в течение 10 дней. При этом
установлено, что гибель мышей происходила в группах,
получивших по сумме действующих веществ дозы свы-
78
ше 300 мг/кг массы тела, а доза 750 мг/кг вызвала гибель
100 % животных.
Окончательный опыт был проведен на 80 мышах, которых разделили на 8 групп по 10 мышей в каждой – 7
опытных и контрольную. Эмексид вводили мышам в желудок однократно в следующих дозах по сумме действующих веществ: 300, 375, 450, 525, 600, 675 и 750 мг/кг
массы тела. Контрольной группе вводили дистиллированную воду в дозе 0,5 мл.
За животными в течение 15 дней проводили наблюдения, отмечали внешний вид и поведение, клиническую
картину отравления. Фиксировали число павших мышей.
Результаты представлены на рисунке.
Острая токсичность эмексида для белых мышей
Клиническая картина острого отравления характеризовалась следующими изменениями: в первые 1,5–2 ч –
угнетением, отказом от корма, диспепсическими явлениями, одышкой, повышенной возбудимостью, мышечной
дрожью с последующим развитием судорожных явлений.
Позднее отмечали гиподинамию, покраснение конъюнктивы, клонические судороги, вытягивание задних конечностей, парезы, через 3–4 ч коматозное состояние и гибель
79
подопытных животных. У выживших мышей признаки отравления исчезали через 3–4 дня. Расчетным путем были
определены параметры токсичности эмексида для белых
мышей при введении в желудок. Расчет LD50 осуществляли по методу Г. Н. Першина (1950). Они характеризовались
следующими величинами: МПД – 300 мг/кг; LD
–750,
100
расчетная LD50–495 мг/кг массы тела.
В соответствии с ГОСТ 12.1.007–76. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности,
эмексид относится к препаратам 3-го класса опасности –
вещества, умеренно опасные.
2.1.1.4. Параметры хронической
токсичности эмексида
Опыты проведены на 40 беспородных белых мышах
обоих полов массой 16–18 г, прошедших предварительное карантинирование в течение 15 дней. Мышей разделили на 4 группы по 10 голов – 3 опытные и контрольную.
Подопытным животным эмексид вводили внутрь в течение 10 дней в следующих дозах (по сумме действующих
веществ): мышам 1-й группы – 5 мг/кг (1/100 LD50), 2-й
группы – 10 мг/кг (1/50 LD50), 3-й группы –50 мг/кг (1/10
LD50). В качестве растворителя использовали дистиллированную воду. Контрольной группе вводили дистиллированную воду в дозе 0,5 мл. За животными проводили
наблюдения в течение 30 дней. Отмечали общее состояние, потребление корма и воды, состояние кожи и слизистых оболочек. Выявляли признаки отравления. Мышей,
погибших в течение опыта, подвергали вскрытию и проводили описание макроскопической картины повреждающего действия препарата.
Установлено, что введение эмексида мышам внутрь
в дозах 5 и 10 мг/кг в течение 10 дней не сопровождалось
80
Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]