Основы секционного курса и судебной ветеринарной медицины

Перед тем, как приступить к вскрытию полостей и извлечению органов,

трупу придают соответствующее положение. Трупы крупных животных вскрывают в боковом левом (крупный рогатый скот) или правом полубоковом (лошадь) положении. Трупы мелких животных (теленок,

свинья, овца, коза, собака, кошка, пушные звери и др.) вскрывают в спинном положении. Перед вскрытием полостей и внутренним осмотром патологоанатом-прозектор становится с правой стороны трупа (голова трупа должна находиться слева от него), помощник – встает с противоположной стороны. При вскрытии трупа свет должен быть направлен сверху-вниз и слева-направо.

При вскрытии трупов животных нередко возникает необходимость в проведении дополнительных лабораторных исследований патологического материала для подтверждения или установления диагноза. Поэтому в необходимых случаях определить или подтвердить причину заболевания или гибели животного (включая птиц, зверей, пчел, рыб и др.), при подозрении на инфекционную или инвазионную болезнь или на отравление вскрывающий и его помощник обязаны взять соответствующий патологический материал и направить его в ветеринарную лабораторию для специального исследования.

Во всех случаях взятия и отправки патологического материала необходимо руководствоваться «Правилами взятия патологического материала, крови,

кормов и пересылки их для лабораторного исследования», а также соответствующим инструкциями по борьбе с болезнями животных,

утвержденными Главным управлением ветеринарии Министерства сельского хозяйства.

Патологический материал необходимо отбирать от свежих трупов или вынужденно убитых животных не позднее 12 часов, а летом – двух-трех часов после смерти животного из тех органов или тканей, где обнаружены патологические изменения, а также наиболее пораженные и измененные органы сообразуясь предполагаемому диагнозу. Для гистологического исследования из разных участков патологически измененных органов и

тканей вырезают небольшие кусочки толщиной не более 2 см. Вместе с пораженными участками ткани захватывают и пограничную с ней визуально неизмененную ткань, чтобы имелась возможность для сравнения. При иссечении кусочка учитывают микроскопическое строение (структуру)

взятого органа или ткани. Например, материал из почки, надпочечников,

лимфатических узлов берут с таким расчетом, чтобы в кусочке были совмещены оба слоя – корковый и мозговой; в головном мозге – серое и белое вещество; в селезенке – красная и белая пульпа; в легком – части органа с наличием бронхов и плевры. Из сердца берут несколько кусочков:

из мышцы правого и левого желудочков, правого и левого предсердий,

папиллярных мышц и области клапанов. Во всех органах при их иссечении обязательно захватывают и капсулу. Из разных частей желудочно-кишечного тракта вырезают небольшие кусочки размером 2х3 см и перед погружением в фиксирующую жидкость их растягивают на картоне и прошивают белыми нитками.

При опухолях, очаговых некрозах, инфекционных гранулемах материал берут с измененного участка, причем вырезают более свежие очажки поражений с окружающей их здоровой тканью. При подборе материала необходимо учитывать особенности развития и локализации патологического процесса, свойственные диагностируемому заболеванию. Так, например, при чуме свиней следует брать кусочки из разных отделов головного мозга, где развиваются характерные для чумы периваскулярные клеточные лимфоидные скопления. При сальмонеллезе свиней важное диагностическое значение имеют очаговые некрозы и гранулемы в печени. Если материал не может быть быстро доставлен в лабораторию с нарочным, тогда его посылают в консервированном виде или фиксированном виде.

Взятый для гистологического исследования патологический материал следует предохранять от высыхания, его как можно быстрее необходимо поместить в заранее подготовленную фиксирующую жидкость. Выбор фиксации патологического материала зависит от цели и методов

исследования. Следует учитывать, что объем фиксирующей жидкости, как минимум, должен в 10 раз превышать объем патологического материала.

Если кусочки органов плавают на поверхности фиксирующей жидкости, то их накрывают одним слоем марлевой ткани (бинтом).

Самой простой и доступной фиксирующей жидкостью является 10%-ный раствор нейтрального формалина (1 часть продаваемого формалина – 40%-

ный раствор формальдегида на 9 частей водопроводной воды) Раствор формалина хорошо диффундирует в тканях. Через сутки от начала фиксации жидкость необходимо сменить на свежую порцию, и в дальнейшем в ней патматериал может храниться очень долгое время. В холодное время года,

профилактируя промерзание жидкости и патматериала при их отправке в лабораторию, перекладывают в 30-50%-ный раствор глицерина

(приготовленный на 10%-ном растворе формалина), либо в 70%-ный этиловый спирт или в насыщенный раствор натрия хлорида. При отсутствии формалина в качестве фиксирующей жидкости используют 96%-ный этиловый спирт или ацетон. При применении этанола толщина кусочков не должна превышать 0,5 см. Для гистохимических исследований патматериал можно фиксировать также в жидкости Карнуа (абсолютный этанол – 60 мл,

хлороформ – 30 мл и ледяная уксусная кислота – 10 мл) или жидкость Буэна

(концентрированная пикриновая кислота – 15 мл, формалин – 5 мл, ледяная уксусная кислота – 1 мл). Фиксирующую жидкость меняют каждые сутки до тех пор, пока она не станет прозрачной. Оптимальная температура фиксации

37 С.

Патологический материал фиксируют в стеклянной посуде. На банку с кусочками органов и тканей наклеивают этикетку, на которой указывают номер или кличку животного, кому принадлежит животное, а внутрь банки опускают кусочек плотной бумаги или картона с написанным на нем простым (не химическим) карандашом номером животного. Если в одну посуду необходимо поместить несколько объектов исследования от разных

животных, то каждый из них завязывают в марлю вместе с отдельной

дыхания, сердечно-сосудистой, мочеполовой, кроветворения и

иммуногенеза, органов эндокринной и нервной систем, в которых, в первую очередь, развиваются патологические процессы, и они в данном случае будут наиболее информативны при определении диагноза. Однако следует учитывать, что в каждом конкретном случае материал необходимо прежде всего брать от тех органов и тканей, в которых обнаружены при вскрытии трупа патологические изменения.

При взятии патматериала для отправки его в лабораторию с целью бактериологического или вирусологического исследования необходимо выполнить ряд условий. Так, поверхность органа или ткани, от которых предполагают получить патматериал, необходимо до разреза поверхности обжечь на пламени горелки или прижечь раскаленной металлической пластиной. Патологический материал берут стерильными инструментами в стерильную посуду с резиновыми или притертыми пробками, надежно упаковывая. Патологический материл следует брать как можно раньше после смерти животного, особенно в теплое время года, так как начавшееся разложение трупа отразится на качестве материала, и он будет не пригоден для дальнейшего исследования. В лабораторию патматериал отправляют в нефиксированном виде. Если же доставить патматериал в лабораторию в течение суток не представляется возможным, то его в этом случае необходимо законсервировать в 30%-ном водном растворе химически чистого глицерина на физиологическом растворе, который предварительно необходимо простерилизовать в автоклаве при 120 С в течение 30 минут. В

качестве консерванта можно также применить стерильное вазелиновое масло. Материал заливают консервантом в количестве в 4-5 раз превышающем объем взятых для исследования образцов. При

необходимости исследования на тельца Бабеш-Негри или другие вирусные включения необходимо использовать смесь Карнуа, спирт-формол или ацетон. Продолжительность фиксации в смеси Карнуа или в ацетоне не должна превышать 2-3 часа, а по истечении этого срока патматериал необходимо переложить в абсолютный или 96 этанол.

Для бактериологического исследования в лабораторию посылают отдельные органы, части органов, кости или полностью трупы мелких животных с нарочным. Некрупные по размеру трупы животных (телята, поросята, ягнята)

и мелких животных посылают в непроницаемой таре полностью без разделения на части.

Патологическим материалом для вирусологического исследования в лаборатории в зависимости от заболевания могут служить стенки и содержимое афт, папулы (узелки), везикулы (прозрачные пузырьки), пустулы

(гнойные пузырьки), кусочки головного мозга, печени, легких, селезенки,

лимфатических узлов или кусочки других органов и тканей, в которых вирус предполагаемого заболевания может содержаться в наибольшем количестве.

Трубчатые кости для исследования посылают в лабораторию целыми без повреждений эпифизов. Предварительно их необходимо очистить от мышечной ткани и сухожилий, завернуть в марлю или полотняную ткань,

смоченных дезинфицирующим раствором (5%-ный раствор карболовой кислоты). Кости можно также обсыпать натрия хлоридом и затем завернуть в марлю или полотняную ткань.

Кишечник до проведения бактериологического или вирусологического исследования предварительно освобождается от содержимого, а его конечные части необходимо перевязать. Для исследования отправляются части кишечника с наиболее характерными патологическим изменениями.

Патматериал помещается в стеклянные банки с 30-40%-ным водным раствором глицерина или насыщенным водным раствором натрия хлорида.

Объем консервирующей жидкости должен в 5-7 раз превышать объем взятого для исследования материала.

Каловые массы для исследования отправляют в стерильных пробирках, либо в стаканах или банках, которые закрывают пергаментом. От трупов животных можно послать кал в отрезке не вскрытого кишечника,

перевязанного на его концах.

Для исследования кожи берут наиболее пораженные ее участки размером

10х10 см и помещают эти пласты в стерильную герметически закрываемую посуду. Кровь, гной, слизь, мочу, желчь и другой жидкий патологический материал, предназначенный для бактериологического или вирусологического исследования отправляют в запаянных пастеровских пипетках, стерильных пробирках или во флаконах, плотно закрытых резиновыми пробками. Кроме того, выделения из различных полостей, естественных отверстий,

предназначенных для микроскопического исследования посылают в виде мазков.

При подозрении на сибирскую язву для бактериологического исследования посылают толстую каплю крови на предметном стекле, взятую из уха с той стороны, на которой лежал труп. Место разреза кожи предварительно прижигают пламенем горелки. Взятый материал заворачивают в чистую марлю, обертывают пергаментной или вощеной бумагой, упаковывают в металлическую коробку или в прочный, можно двойной, полиэтиленовый пакет и отправляют в ближайшую ветеринарную лабораторию с нарочным.

Наиболее простым и эффективным методом сохранения биологических свойств вирусов в патологическом материале при его отправке в лабораторию для вирусологического исследования является охлаждение. Для этого отобранный патматериал, помещенный в плотно закрытую посуду

(флаконы, пробирки, банки), пересылают в обычных бытовых термосах.

Флаконы с материалом заворачивают в вату или упаковочную бумагу и плотно укладывают в термос, на треть заполненный снегом или льдом.

Термос закрывают пробками и опечатывают. При этом способе отправки материала в термосе в течение 12-24 часов удерживается температура от +2

до -6 С, при которой вирусы сохраняются практически без изменений.

После получения патматериала лабораторией, термосы и его пробки должны быть подвергнуты обеззараживанию путем их автоклавирования.

При подозрении на отравление животного в лабораторию отправляют материал от трупов павших животных химико-токсикологического и патогистологического исследований. Одновременно для определения предполагаемого источника отравления посылают все корма (по 1 кг корма каждого вида), которые скармливали животным. Обязательно посылают остатки кормов из кормушки. Подозрение на отравление могут вызвать следующие признаки:

а) характерный запах содержимого желудка (горько-миндальный,

чесночно-хлороформенный и др. при исключении запаха использованных для лечения животных лекарственных средств);

б) окрашивание содержимого желудка в различные цвета (желтое (от азотной и пикриновой кислот, солей хрома), зеленое или синее (от солей меди) или его окрашивание в другие непривычные цвета;

в) кровянистое содержимое желудка;

г) подозрительные включения в содержимом желудка, например, белые кристаллы сулемы и стрихнина, нарастворившиеся белые кристаллы мышьяка;

д) набухшие, увеличенные, дряблые органы, легко разрывающаяся слизистая оболочка желудка, окрашиваемая всеро-желтый цвет, почки и сердце;

е) поражения начальных отделов пищеварительного канала (ротовая полость, пищевод, желудок);

ж) изменение консистенции и цвета крови.

Для проведения химико-токсикологического исследования в лабораторию отправляют в отдельных банках следующий материал:

1) часть пищевода и пораженную часть желудка с содержимым в количестве 0,5 кг, а от крупного и мелкого рогатого скота и верблюдов отправляют часть пищевода, сычуга и небольшое количество содержимого из

разных мест сычуга и рубца. Желудок и его содержимое отбирают в следующем порядке. При вскрытии трупа животного после осмотра внутренних органов перевязывают лигатурами пищевод и двенадцатиперстную кишку вблизи стенки желудка (по две лигатуры) и

перерезают между ними. Желудок извлекают и размещают его в кювете,

после осторожно вскрывают. Содержимое желудка предварительно перемешивают (нельзя использовать металлические предметы), а затем отбирают определенную часть материала;

2)отрезок тонкого кишечника (длиной до 40 см) в наиболее пораженной части вместе с содержимым (до 0,5 кг);

3)отрезок толстого кишечника (длиной до 40 см) в наиболее пораженной части вместе с содержимым (до 0,5 кг);

4)часть печени (0,5-1,0 кг) с желчным пузырем (от крупных животных),

целиком печень от мелких животных;

5)часть почки в наиболее пораженной части в количестве 0,5 кг – от крупных животных, и целиком почку – от мелких животных;

6)образец мочи в количестве 500 мл;

7)образец скелетных мышц в количестве 0,5 кг.

Кроме того, в зависимости от особенностей предполагаемого отравления

дополнительно отправляют:

1)при подозрении на отравление через кожный покров (путем инъекции)

–часть кожи, подкожной клетчатки и мышечной ткани со стороны предполагаемого введения ядовитого вещества;

2)при подозрении на отравление некоторыми жидкостями (сульфид углерода и др.) отбирают трахею, часть сердца, наиболее полнокровную часть легкого в количестве 0,5 кг, часть селезенки и головного мозга, а также

200 мл крови. У мелких животных, в том числе птиц, отбирают органы целиком. При вскрытии выкопанного из земли трупа животного отбирают сохранившиеся внутренние органы в количестве до 1,0 кг, скелетные мышцы в количестве 1,0 кг, землю изпод трупа из двух-трех мест.

Для проведения патогистологического исследования материала при предполагаемом отравлении в лабораторию направляют небольшие кусочки органов и тканей, полученных из печени, почек (обязательно с наличием коркового и мозгового вещества), сердца, легкого, селезенки, языка,

пищевода, желудка, тонкого и толстого кишечника, скелетной мышцы,

измененных лимфатических узлов, головного мозга (одну из половин в стерильной банке) размером 1х3х5 см. Кусочки органов и тканей берут из пораженных участков на границе с непораженными участками и далее помещают их в 10%-ный раствор формалина (из расчета на 1 часть патологического материала не менее чем 10 частей раствора формалина).

При подозрении на отравление веществами, употребляемыми для борьбы

ссельскохозяйственными вредителями, минеральными удобрениями,

отправляют пробы в количестве от 100 до 1000 г.

От больных животных при подозрении на отравление посылают рвотные массы, желательно первые порции, мочу (все количество, которое удалось получить), каловые массы в количестве 0,5 кг, содержимое желудка,

полученное через пищеводный зонд, корма и вещества, которые могли явиться причиной отравления. Если есть подозрение, что отравление возможно наступило вследствие поедания ядовитых растений, то для ботанического анализа берут пробы растений. Для этого деревянную рамку с внутренним размером 1м2 накладывают на травостой луга или пастбища в местах выпаса скота. Все оказавшиеся внутри рамки растения срезают под корень, если травостой однотипный, пробу с 1 га луга или пастбища берут в

3-5 местах, при разнотипном травостое количество проб увеличивают с целью как можно большего охвата получения различных растений. Если пробу трав, взятых для исследования, можно доставить в лабораторию в течение нескольких часов, траву посылают в сыром виде. В противном случае пробы необходимо высушить и в сухом виде доставить в лабораторию. Отправляют пробы трав, упаковывая их в коробки либо в плетеные корзины.

Материал, взятый для химико-токсикологического исследования, нельзя промывать и держать вместе с металлическими предметами, его отправляют в незаконсервированном виде, при этом он должен быть упакован в чистые широкогорлые стеклянные или глиняные банки, плотно закрывающиеся стеклянными притертыми пробками, а если таких нет, тот то чистыми, не бывшими в употреблении корковыми пробками или чистой писчей или восщеной бумагой. Сверху пробки банка завертывается в чистую бумагу,

обвязывается тонким шпагатом (или толстой крепкой ниткой), концы которого скрепляют сургучной печатью. На каждую банку наклеивают этикетку, на которой тушью записывают, какие органы и в каком количестве

(по массе) помещены в банку, вид и кличка животного, кому принадлежит животное, даты падежа и вскрытия трупа животного, указывают, на какое предположительно отравление следует провести исследование. Взятый материал без задержки отправляют в лабораторию с нарочным. Трупы мелких животных, части трупов крупных животных, а также отдельные органы в свежем виде (не фиксированном) отправляют для исследования в лабораторию только с нарочным. Посылаемый материал, особенно от животных с подозрением на инфекционную болезнь, необходимо тщательно упаковывать в плотный деревянный или металлический ящик, чтобы предупредить возможность рассеивания возбудителя на пути следования.

Перед упаковкой материал заворачивают в холст или мешковину, смоченную дезинфицирующим раствором (фенольным креолином, лизолом,

известковым молочком), оборачивают полиэтиленовой пленкой и укладывают в ящик со стружками, опилками или мякиной. В случае отправки почтой или с нарочным патологического материала от животных с подозрением на инфекционное заболевание, либо явно инфицированное каким-либо возбудителем упаковка должна быть прочной и гарантировать доставку материала в целостности с полным исключением возможности рассеивания возбудителя инфекции в окружающей среде. На лицевой стороне посылки вверху должны быть выполнены надписи: «Осторожно