Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
KVAllium&Drosophila_MutagenEffect11.pdf
Скачиваний:
243
Добавлен:
17.03.2015
Размер:
1.99 Mб
Скачать

2.2.3. Статистическая обработка результатов

Проводилась статистическая обработка полученных данных. Для еѐ вычисления были задействованы методы статистической обработки результатов по Стьюденту

(Лакин, 1980; Тейлор, 1985). Рассчитывали значения среднего арифметического,

средней ошибки и нахождение разности между значениями мутаций, митотического и фазных индексов в опытном и контрольном варианте. Кроме того был проведен сравнительный дисперсионный анализ, чтобы выявить, достоверно ли распределены

значения между контрольной и опытными выборками.

Статистическая обработка

проводилась с использованием MS Excel 2007 и

STATISTICA 8.0.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Для всех значений рассчитывалось среднее значение ( ) и ошибка (m).

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Вычислялось среднее значение (

)для каждой величины по формуле:

 

 

 

 

 

 

 

 

(8)

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Хi – значение каждой величины, ΣXn – сумма вариант, n- количество проанализированных вариантов.

Считали кратность превышения MI и фазных индексов в опыте над контролем и других параметров:

(9)

Среднее квадратичное отклонение (σ) и ошибку среднего (m) вычислялись по формулам:

(10)

где n – количество проанализированных вариантов.

(11)

где m – ошибка среднего, σ – среднее квадратичное отклонение, n – количество проанализированных вариантов.

Для определения достоверности различий между средними значениями контрольного и опытного вариантов использовался t-критерий Стьюдента:

56

(12)

где Х0 – среднее арифметическое опытного варианта,

Хk – среднее арифметическое контрольного варианта,

Sd – ошибка отклонения, которая определяется при n1 ≠ n2.

(13)

отклонение считалось достоверным при p<0,05.

2.2.4. Интегральная оценка мутагенного эффекта

Для интегральной оценки мутагенной активности УВЧ излучения сотовых телефонов использовался показатель ВМЭ (выраженности мутагенного эффекта) (14).

ВМЭ определялась в тесте Allium cepa и в тесте ДЛМ у Drosophila melanogaster как кратность превышения процента индуцированных мутаций над контрольным значением (Прохорова И.М., 2005).

(14)

где ∑ индуцируемые мутации, % – частота индуцированных мутаций и

∑ Спонтанные мутации (контроль), % – частота спонтанных мутаций.

Для удобства восприятия цифровых данных баллы ВМЭ ранжированы на уровни мутагенного эффекта или характеристики оценки ВМЭ (таблица 6) (Прохорова И.М.,

2005).

Таблица 6 Оценка выраженности мутагенного эффекта

 

 

Уровень

 

Выраженность мутагенного эффекта

 

мутагенного

 

 

эффекта

 

Отсутствие достоверных различий с контролем

Отсутствие

0

Превышение контрольного уровня мутаций

до 5 раз

Слабый

1

Превышение контрольного уровня мутаций

от 5 до 10 раз

Средний

2

Превышение контрольного уровня мутаций более чем

в 10 раз

Сильный

3

2.2.5. Исследование зависимости эффектов от времени экспозиции (серия экспериментов №1)

Применялся сотовый телефон Motorola С650 (SAR 1,2 Вт/кг). Всего было

поставлено два варианта опыта. Для каждого варианта были подобраны луковицы в

57

количестве не меньшем, чем указано в классической методике (Прохорова И.М., 2005; Fiskesjo G., 1985). В каждом опыте луковицы помещались на 24 часа в стеклянные стаканчики с дистиллированной водой для проращивания корешков. Затем корневые меристемы луковиц помещались на расстояние 1 см как от задней, так и от лицевой панелей телефона и подвергались облучению в режиме связи с имитацией разговора (модулированное УВЧ излучение). При этом геометрия расположения луковиц относительно сотового телефона во время облучения сохранялась с течением времени. Подобным образом луковицы проращивались ещѐ 3 дня (временные интервалы между облучением – 24 часа).

Вусловиях опыта луковицы были разделены на три группы:

К– контрольная из 10 луковиц, не подвергавшаяся облучению.

3 – первая опытная из 6 луковиц, которая облучалась в день 1 час (суммарно 3 часа).

9 – вторая опытная из 6 луковиц, облучавшаяся в день 3 часа (суммарно 9 часов). После облучения корни фиксировались по методике (Прохорова И.М., 2005).

Измерялась и записывалась длина корешков. Всего было обработано 325 корешков. Препараты готовились из корневых меристем (всего 120 препаратов; не менее

30 препаратов для каждого варианта опыта и сопутствующего контроля). Повреждения в клетках оценивались под микроскопом с использованием анателофазного метода и микроядерного анализа (Прохорова И.Н., 2005; Калаев В.Н., 2004).

2.2.6. Исследование эффективности экранирования излучения (серия экспериментов №2)

Было произведено тестирование физического материала, который смог бы предотвращать или уменьшать мутагенный эффект путѐм экранирования организма от УВЧ излучения сотовых телефонов.

В качестве образца было выбрано изделие для индивидуальной защиты «Защитный экран», изготовленное по запатентованной технологии (патент РФ №84022) фирмой-производителем ООО «Квадро». Производителем заявлено, что экран представляет собой токопроводящую ткань, предназначенную для поглощения излучения мобильных телефонов, работающих на частоте стандарта GSM (900–1800).

То есть, ткань обладает свойствами поглощающей излучение решѐтки при данной частоте. Визуально данный образец представляет собой заламинированную темно-

синюю ткань, пронизанную по всей площади с двух сторон блестящими серебристыми нитями, перпендикулярно пересекающимися и образующими квадраты со стороной

~0,9 мм.

58

Для тестирования экрана был поставлен эксперимент, аналогичный первому (так же с имитацией разговора). Чтобы оценить экранирующую способность материала, была выбрана 9-часовая экспозиция, показавшая максимальный мутагенный эффект в предыдущем эксперименте. Обе группы луковиц облучались каждый день по 3 часа (проращивались 3 дня). Одна группа подвергалась прямому облучению (5 луковиц), а

вторая была отделена «Защитным экраном» (5 луковиц). Для обеспечения

равномерного распределения излучения между группами сотовый телефон через каждые 1,5 часа разворачивался. Таким образом, обе группы облучались и передней, и задней панелями телефона. Опыт так же сопровождался контролем (10 луковиц). В

данном эксперименте

применялся сотовый

телефон Sony Ericsson K550i

(SAR

1,4 Вт/кг). Полученные

корневые меристемы

обрабатывались, как и ранее

(всего

100 препаратов) (Прохорова И.Н., 2005; Калаев В.Н., 2004).

2.2.7. Исследование влияния на животный организм (серия экспериментов №3)

В данном эксперименте изучалось влияние УВЧ излучения на животный организм (на половые клетки самцов Drosophila melanogaster). Серия опытов проходила после экспериментов №2. В ней использовался тот же сотовый телефон

Sony Ericsson K550i (SAR 1,4 Вт/кг).

Эксперимент проводился по следующей методике. Для мух готовился корм (Изюмов Ю.Г., 1974). На дно стаканчиков наливали 5 мл питательной среды. Локализация стаканчиков относительно сотового телефона аналогична предыдущим экспериментам. В стаканчики помещали 10–15 трѐхдневных самцов на 72 часа. Стаканчики закрывали стерилизованной ватой. Каждый день в, одно и то же время, самцы подвергались 3-х часовому облучению, когда телефон включался в режим связи с имитацией разговора (суммарно 9 часов).

После облучения самцы скрещивались с интактными виргинными самками. Скрещивание проводили в чашках Петри, дно которых предварительно заливали полупрозрачной агарозной средой. Мухи находились в чашках трое суток. Через сутки отсаживали самцов, через двое суток – самок. Подсчет отложенных яиц проводился под бинокулярным микроскопом (Изюмов Ю.Г., 1974).

59

Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]