Раздел 1. Общая микробиология, морфология и ультраструктура микроорганизмов.

№1. У ребенка 1 месяца, находящегося на искусственном вскармливании, на внутренней поверхности щек, деснах и языке обнаружен беловатый налет, напоминающий свернувшееся молоко. Объективно: ребенок беспокоен, отказывается от еды, теряет в весе, у него отмечается неустойчивый стул. При микроскопии мазка со слизистой ротовой полости обнаружены почкующиеся, крупные, округлой и овальной формы клетки. Какое заболевание можно предположить у ребенка, и какие микроорганизмы причастны к этому процессу?

Заболевание: Кандидоз.

Микроорганизмы, причастные к процессу: Дрожжеподобные грибы рода Candida.

№2. Клинически больному поставлен диагноз «сепсис». При первичной микроскопии мазка крови во многих полях зрения обнаружено большое количество почкующихся клеток округлой и овальной формы. Назовите возбудителя. Какие еще заболевания он может вызывать при снижении резистентности организма?

Возбудитель: Klebsiella oxytoca.

Возможные заболевания: Инфекции мочевых путей, дыхательной системы, ЖКТ, внутрибольничные инфекции.

№3. У больного 40 лет на glans penis обнаружен ulcus durum (твердый шанкр). При микроскопическом исследовании отделяемого твердого шанкра обнаружены бактерии штопорообразной формы с мелкими равномерными первичными завитками. Ваш предполагаемый диагноз? Назовите возбудителя.

Диагноз: Сифилис.

Возбудитель: Treponema pallidum.

№4. Больному поставлен диагноз: лепра. Назовите возбудителя и метод микробиологической диагностики.

Возбудитель лепры – Mycobacterium leprae

Методы микробиологической диагностики:

1. Бактериоскопический метод при лепроматозной форме заболевания – окраска азков по Цилю-Нильсену;

2. Серологический метод: ИФА;

3. ПЦР.

№5. Ребенок 5 лет умер от менингита. При микроскопическом исследовании мазков-отпечатков с мягкой оболочки головного мозга обнаружены грамотрицательные бобовидной формы диплококки, большое количество лейкоцитов. Назовите возбудителя заболевания.

Возбудитель менингита – Neisseria meningitidis

№6. Больному установлен диагноз: брюшной тиф. Назовите возбудителя и метод лабораторной диагностики данного заболевания.

Возбудитель брюшного тифа – Salmonella typhi

Методы микробиологической диагностики:

1. Бактериологический метод: посев крови производят на желчный бульон, фекалии, мочу и желчь засевают на плотные питательные среды. Идентификацию чистой культуры проводят:

а) по биохимическим признакам (до рода) с помощью энтеротест-систем;

б) по антигенным признакам (до серогруппы, а затем до серотипа) в РА на стекле с диагностическими сыворотками;

в) фаготипированием (в эпидемиологических целях для установления источника инфекции).

2. Серологический метод: со 2-й недели заболевания сыворотку крови больного исследуют с помощью ИФА и в РНГА с O- и Vi-эритроцитарными диагностикумами.

№7. У больного в мокроте обнаружены кислотоустойчивые бактерии. Какое заболевание можно предположить? Назовите возбудителя и метод окраски для его выявления. Какие еще методы можно использовать для микробиологической диагностики этого заболевания?

Заболевание - туберкулёз

Возбудитель - Mycobacterium tuberculosis. Кислотоустойчивы за счет наличия в клеточной стенке высокого содержания липидов и миколовых кислот. По методу Циля-Нильсена окрашиваются в красный цвет.

Методы диагностики:

1. Бактериоскопический метод:

• световая микроскопия в окраске по Цилю-Нильсену;

• люминесцентная микроскопия.

Для повышения концентрации возбудителя в исследуемом материале используют методики обогащения, например, флотацию: мокроту гомогенизируют, затем добавляют ксилол, толуол или бензин, смесь встряхивают, добавляют дистиллированную воду. Ксилол вместе с микобактериями всплывает наверх в виде пленки. Из нее готовят мазки.

2. Бактериологический (основной) метод:

• посев на плотные питательные среды;

• использование автоматизированных систем (BACTEC и др.) – сочетание плотной и жидкой питательных сред.

3. ПЦР.

4. Аллергологический (туберкулинодиагностика) метод: ранняя диагностика туберкулеза у детей и подросток (внутрикожная проба Манту с туберкулином). Проба свидетельствует не о заболевании, а об инфицировании. В дополнение к пробе Манту применяют диаскинтест с аллергеном туберкулезным рекомбинантным, который содержит антигены только вирулентных штаммов M. tuberculosis. Положительная реакция на этот аллерген бывает только у лиц, инфицированных возбудителем туберкулеза, и отсутствует у лиц, вакцинированных БЦЖ.

№8. У мужчины 40 лет с подозрением на туберкулез почек в моче обнаружены кислотоустойчивые бактерии. Какие микроорганизмы предположительно могут присутствовать в моче обследуемого?

Палочка Коха - Mycobacterium tuberculosis

№9. Для приготовления мазка с плотной питательной среды лаборант нанес исследуемую культуру на предметное стекло и распределил круговыми движениями. Какие ошибки допустил лаборант при приготовлении мазка?

Нарушена техника приготовления мазка.

Необходимо было на обезжиренное стекло нанести каплю физиологического раствора, и только потом внести в эту каплю петлей небольшое количество культуры бактерий с плотной питательной среды и распределить параллельными движениями, чтобы клетки располагались в один ряд и не закрывали друг друга.

№10. Какими лабораторными методами диагностики можно подтвердить диагноз «бешенство» посмертно?

Посмертная диагностика:

Микроскопический метод, а именно вирусоскопический метод (обнаружение вирусов в исследуемом материале с помощью электронного микроскопа. При использовании светового микроскопа в материале от больного можно выявить характерные внутриклеточные включения, которые образуются в пораженных клетках при некоторых вирусных инфекциях.) Определение в мазках-отпечатках из области гиппокампа вирусных включений в окраске по Селлерсу. В пораженных вирусами нейронах обнаруживают розово-красные включения Бабеша-Негри на голубом фоне цитоплазмы.

РИФ: определение вирусного антигена в том же исследуемом материале.

Микробиологический метод, а именно вирусологический метод (заражение материалом от больного с подозрением на вирусную инфекцию куриного эмбриона (для диагностики гриппа), культур клеток (для диагностики аденовирусной инфекции, полиомиелита), лабораторного животного (для диагностики клещевого энцефалита, бешенства). Затем проводят идентификацию вируса;)

Внутримозговое заражение белых мышей. Материал на исследование: кусочки мозга из области гиппокампа и ткань слюнных желез.

Можно выделить еще один способ подтверждения биологический метод – обнаружение возбудителя путем заражения материалом от больного лабораторных животных. Используют для диагностики ботулизма, бешенства. Кроме того, этот метод применяют для создания экспериментальных моделей инфекционных заболеваний.

(занятие 1: стр. 6, 7, 9 характеристика методов; занятие 31 стр. 7 все про бешенство)