Лабораторная работа № 4 Частичный кислотный гидролиз дрожжей. Качественные реакции на продукты гидролиза.

Ход работы: В круглодонную колбу, снабженную холодильником, помещают 4 г дрожжей и 20 мл 10% раствора H₂SO₄. Содержимое колбы кипятят в течении 1-1,5 часа. После прекращения нагревания жидкость охлаждается и фильтруется. В фильтрате доказывают присутствие компонентов нуклеопротеидов.

1. Биуретова реакция для полипептидов.

К 1 мл гидролизата приливают 2 мл 10% NaOH и одну каплю 1% раствора сульфата меди. Жидкость окрашивается в розовый цвет

2. Серебренная проба на пуриновые основания.

К 1 мл гидролизата приливают 1 мл аммиачного р-ра нитрата серебра. Через 3-5 минут осаждается легкий серый осадок серебряных производных пуриновых оснований:

3. Качественная реакция с Фелинговой жидкостью на пентозу.

При взаимодействии равных обьемов Фелинга А и Фелинга Б образуется комплексная соль меди с винной кислотой. Уравнение реакции:

К 1 мл гидролизата приливают по 2 мл раствора Фелинга А и Фелинга Б и пробирку нагревают. Появление красного осадка доказывает присутствие рибозы в растворе. Медь (II) фелинговой жидкости окисляет альдозу и восстанавливается до меди (I) образуя красный осадок закиси меди. Уравнение этой реакции:

4. Молибденовый реактив на фосфатную кислоту.

К 1 мл гидролизата добавляют 1 мл молибденовой жидкости раствора молибдата аммония в азотной кислоте и нагревают несколько минут. Раствор окрашивается в лимонно-желтый цвет. При охлаждении образуется желтый кристаллический осадок комплексного соединения фосфорномолибдата аммония. Уравнение:

H₃PO₄+12(NH₄)₂MoO₄+21HNO₃→(NH₄)₃PO₄·12MoO₃↓+21NH₄NO₃+ +12H₂O

Клинико-диагностическое значение

Реакцией с фелинговой жидкостью обнаруживается глюкоза в моче.

Контрольные вопросы к теме:

1. Что такое нуклеиновая кислота? Какие вещества образуются при полном гидролизе нуклеиновых кислот?

2. Какие существуют виды нуклеиновых кислот? Каковы их различия химического состава?

3. Какие азотистые основания присутствуют в ДНК? Отметьте какие из низ являются производные пуринов, какие производные пиримидина. Напишите структурные формулы пуриновых производных?

4. Напишите таутомерные превращения тимина и цитозина.

5. Напишите формулы таутомерных форм гуанина и уроцила.

6. Приведите пример минорных оснований.

7. Напишите структурные формулы открытой и циклической форм Д-рибозы.

8. Напишите структурные формулы гуанозина, риботимидина, дигидроуридина.

9. Напишите структурные формулы: Уф, фУ, фффУ.

10. Напишите формулы динуклеотидов следующего строения: У А и д(ГТ).

11. Напишите структурную формулу фрагмента ДНК: д(фТфГфЦфА).

12. Напишите структурную формулу фрагмента РНК: ГфАфУф.

13. Выберите один неправильный ответ.

Виды РНК различаются:

А. Первичной структурой

Б. Молекулярной массой

В. Способом соединения нуклеотидов в полинуклеотидную цепь

Г. Строение 5΄ и 3΄ концов

14. Виды ДНК? Места их локализации в клетке.

15. Классификация РНК, их функции, локализации в клетке.