§ 3. Род Hepacivirus.

Название рода происходит от греческого слова hepar – печень. Род включает 2 вида вирусов – вирус гепатита С и вирус гепатита G.

Вирус гепатита С (ВГС)

История открытия. ВГС был открыт в 1975 г. Фейнстоуном и коллегами.

Особенности вирусов. Вирионы сферической формы, диаметром 50 нм. Имеют суперкапсид, состоящий, как минимум, из 2 гликопротеинов – Е и М. Капсид сферической формы, 30 нм в диаметре, состоит из С-белка. Геном представлен однониточной линейной несегментированной «+»-РНК длиной 9,4-9,5_*10³ нуклеотидов. Геном имеет 1 большую открытую рамку считывания, кодирующую большой полипротеин, нарезаемый протеазами на 3 структурных (С, Е1, Е2) и 5 неструктурных белков (NS1-5), участвующих в регуляции репродукции вируса. Геном нестабилен, очень часты мутации, в связи с чем выделено 12 генотипов, подразделенных более чем на 100 подтипов. Подтипы разделяются на индивидуальные изоляты, которые отличаются друг от друга по строению генома на 10 %; а индивидуальные изоляты подразделяются на индивидуальные геномы, отличающиеся на 2 %. Коллекция вариантов внутри индивидуального изолята называется квазивидом. Репликация ВГС мало изучена, но идентична таковой для родов Flavivirus и Pestivirus. Геномная РНК реплицируется вирусной полимеразой, которая лишена функции подтверждения считывания.

Резистентность. ВГС чувствительны к хлороформу, эфиру.

Культивирование в клеточных культурах неэффективно.

Эпидемиология. ВГС распространены повсеместно. Источник инфекции – больной человек и вирусоноситель. Механизм передачи – перкутанный, реализуемый парентеральным, половым, трансплантационным и трансплацентарным путями. К ВГС чувствительны шимпанзе. Вирус содержится в крови, мокроте, сперме, экссудатах.

Патогенез. ВГС попадают в сыворотку крови и в В-лимфоциты, после чего начинается острая инфекция с поражением лимфатических узлов. В крови, мокроте и моче обнаруживается РНК ВГС. Печень поражается диффузно, возникает перипортальный отек гепатоцитов с образованием псевдолимфатических фолликулов. ВГС циркулируют в крови в очень малых концентрациях. Элиминацию вируса из макрооорганизма осуществляют CD₈-лимфоциты. В 60-80 % инфекция переходит в хроническую форму, у 20 % больных с хронической формой развивается хронический активный гепатит С и цирроз. ВГС способны индуцировать первичную карциному печени. Гепатокарцинома развивается у 50 % больных циррозом печени после перенесенного острого вирусного гепатита С. Роль вирусов в канцерогенезе доказана, но до конца не изучена. ВГС персистируют и реплицируются в гепатоцитах во время злокачественной трансформации. Нуклеопротеид вирусов активирует протоонкоген с-myc и подавляет апоптоз. Нуклеопротеиды квазивидов ВГС имеют разный онкогенный и вирулентный потенциал.

Ядерный протеин ВГС способен активировать Fas-медиированный путь апоптоза. Этому может препятствовать CPP32 цистеиновой протеазы, которая участвует в эффекторном пути апоптоза ВГС и может способствовать иммунно-медиированному повреждению печени. В то же время ядерный протеин может преодолевать некоторые виды апоптоза и способствовать опухолевой трансформации.

Клиника. Инкубационный период составляет 2-10 недель при циклическом течении и до 10 лет и более – при ациклическом. Заболевание характеризуется интоксикацией, желтухой, увеличением печени и селезенки. ВГС способны вызывать цирроз печени и опухолевую трансформацию гепатоцитов.

Иммунитет обусловлен клеточными и гуморальными факторами. Диагностическое значение имеет обнаружение в крови Ig М и G.

Лабораторная диагностика. Материалом для исследования служит кровь больного. Для диагностики используются серологический (ИФА) и молекулярно-биологический (ПЦР) методы. ИФА применяют для выявления в сыворотке крови антител к антигенам вируса гепатита С. Обнаружение антител класса Ig М свидетельствует об остром течении гепатита, Ig G - о хроническом течении. Вирусоспецифические антитела появляются в крови, в среднем, через 1 месяц от момента инфицирования. В этот серонегативный период ПЦР позволяет выявлять специфические для ВГС последовательности геномной РНК.

Лечение. Показан α-интерферон.

Профилактика. Эффективной вакцины не существует в связи с высокой изменчивостью вируса.

Род Deltavirus.

Вирус гепатита Дельта (ВГД)

История открытия. Вирус был выделен Ризетто в 1977 г. из гепатоцитов больного вирусным гепатитом В.

Особенности вирусов. Вирион сферической формы, диаметром 36 (28-39) нм (рис. 1-2). Имеет суперкапсид, состоящий из HBs-антигена вируса гепатита В. Капсид сферический, диаметром 18 нм, состоит из белка – HD-антигена. Геном представлен однониточной кольцевой «+»-РНК, состоящей из 1678 нуклеотидов. В геноме имеется несколько открытых рамок считывания, как на геномных, так и на антигеномных нитях РНК. Причем, в отличие от вироидов и сателлитных вирусов растений, в РНК закодирован вирусоспецифический полипептид – HD-антиген (пятая открытая рамка считывания, локализованная на комплементарной зоне РНК). РНК нескольких изолятов вируса имеет частичную гетерогенность (72,1-92,0 % гомологии). Известно 3 генотипа, каждый из которых отличается на 35 %. Генотип 1 встречается во всем мире, генотип 2 – в Азии (Тайвань, Япония), генотип 3 – только в Южной Америке. РНК кодирует только 1 белок – HD-антиген, который представлен 2 видами – малый HD-антиген и большой HD-антиген.

Репродукция ВГД. Вирусы попадают в клетку путем взаимодействия HBs-антигена и клеточных рецепторов. Внутри клетки РНК ВГД реплицируется в отсутствие вируса гепатита В. РНК транспортируется в ядро HD-антигеном, где реплицируется без образования промежуточной ДНК. В репликации принимает участие клеточная РНК-полимераза II, которая образует антигеномную РНК, являющуюся матрицей для синтеза геномной РНК. Репликация связана с вирусом-хелпером – вирусом гепатита В. ВГД заимствует HBs-антиген у вируса гепатита В. Вначале синтезируется малый HD-антиген, в конце – большой HD-антиген. Малый HD-антиген необходим для репликации РНК, а большой – ингибирует репликацию, но необходим для сборки вириона. Капсид при сборке ВГД обеспечивает хелперный вирус, который в репликации дельтавирусной РНК не участвует. Сборка дельтавирионов происходит в цитоплазме гепатоцитов. ВГД обладают ЦПД.

Антигенная структура. Вирус имеет 2 антигена: HBs-антиген и HD-антиген. HD-антиген локализуется в ядрах инфицированных гепатоцитов, в ядрышках и/или нуклеоплазме.

Резистентность. При нагревании ВГД происходит укрепление связи HD-антигена с РНК, которая становится устойчивой к действию мочевины, гуанидина или меркаптоэтанола. Дельта-антиген устойчив к нагреванию, действию кислот и нуклеаз, но разрушается в присутствии щелочей и протеаз.

Культивирование. Культивирование ВГД в клеточных линиях, в том числе печеночного происхождения, с интегрированным геномом вируса гепатита В до сих пор были неудачны. Вместе с тем, описаны эксперименты по продукции ВГД в линии клеток гепатомы человека (HUH-7) и почек мартышек (COS7) после их трансфекции РНК ВГД.

Эпидемиология. Распространен повсеместно; эндемичен для районов Средиземноморья и Италии. Ареал вируса совпадает с ареалом вируса гепатита В. В развитых странах заболеваемость низкая. Источник инфекции – больной человек или вирусоноситель. Механизм передачи – перкутанный, реализуемый половым, трансплантационным, парентеральным и трансплацентарным путями.

Патогенез. ВГД всегда патогенны, они размножаются только у лиц, инфицированных вирусом гепатита В. Дельта-гепатит у людей протекает в 2 формах: 1) коинфекция, когда в организм одновременно проникают вирусы гепатита Дельта и В (рис. 3); 2) суперинфекция, когда дельта-инфекция наслаивается на уже явный у человека вирусный гепатит В (рис. 4). При этом, если имеет место острая форма гепатита В, то суперинфекция может закончиться либо выздоровлением, либо развитием печеночной комы. Если у заболевшего имелась хроническая форма гепатита В, то дельта-суперинфекция приводит к развитию цирроза печени. ВГД циркулируют в крови.

Клиника. ВГД вызывает у людей гепатиты, циррозы печени. Заболевание характеризуется интоксикацией, желтухой, гепатомегалией.

Иммунитет клеточного и гуморального типов.

Лабораторная диагностика. Серологический метод основан на выявлении антител к HD-антигену вируса в сыворотке крови методами ИФА и РИА. Класс иммуноглобулинов разрешает диагностику острой и хронической форм вирусного гепатита Дельта. Первый маркер инфекции - вирусоспецифические Ig M - появляются через 10-15 дней после развития клинических проявлений. Через 2-11 недель можно идентифицировать вирусоспецифические Ig G, постоянно циркулирующие у инфицированных лиц.

Лечение. Показаны интерфероны и их индукторы.

Профилактика. Используется генно-инженерная вакцина, содержащая HBs-антиген.