§ 2. Род Enterovirus.

Название рода происходит от греческого слова enteron – кишечник. В род входят вирусы полиомиелита, Коксаки и ЕСНО, преимущественно поражающие кишечник людей и являющиеся высоко устойчивыми к низким значениям рН и ферментам желудочного сока. Отличительная особенность энтеровирусов – тропизм к нервной ткани.

Вирусы полиомиелита человека

Название «полиомиелит» происходит от греческих слов polios – серый и myelos – серое вещество спинного мозга. Термин «полиовирус» является аббревиатурой от «вируса полиомиелита».

История открытия. Вирусную этиологию полиомиелита впервые доказали К. Ландштейнер, Г. Поппер и Левадити в 1908 г., заразив обезьян полиомиелитом при инокуляции экстрактов спинного мозга умерших от полиомиелита людей. Вирусы полиомиелита были впервые выделены на тканевой культуре в 1936 г. А. Сэбиным и Олицким. В 1949 г. Д. Эндерс с коллегами продемонстрировали, что вирус можно вырастить в культурах клеток не нервного происхождения. С 1951 г. Брунгильдом, Ленсингом и Леоном выделено 3 группы (серотипа) полиовирусов. Впервые полная последовательность геномной РНК полиовируса была опубликована в 1981 г. Уиммером и соавторами, а первая атомная структура – в 1985 г. Хоглем. В середине 1960-х гг. созданы инактивированная (Солк) и живая аттенуированная (Сэбин) вакцины. В 1988 г. ВОЗ объявила о своем намерении ликвидировать заболевание до 2000 г. и имеется существенный прогресс в осуществлении этой цели.

Особенности вируса. Вирионы полиовирусов имеют размер 28-30 нм и типичное для пикорнавирусов строение (рис. 2). Гемагглютинирующими свойствами вирион не обладает. Способность полиовируса вызывать паралич также, по-видимому, связана с одним из белков оболочки. Белки определяют также иммуногенные свойства вируса. Геном представлен однониточной нефрагментированной «+»-РНК, состоящей из 7,5_*10³ нуклеотидов. Установлена зависимость между нейровирулентностью вируса и степенью активности регуляторного гена, который определяет интенсивность синтеза вирусных белков, особенно в нервных клетках.

Антигенная структура полиовируса. По антигенным признакам полиовирусы подразделяются на 3 типа: I, II, III (третий серотип подразделяется на А и В подсеротипы – IIIA и IIIB). Антигенность полиовируса I типа обеспечивается последовательностью 95-105 аминокислот VP1; полиовируса II типа - последовательностью 221-226 аминокислот VP1 и 164-172, 270 VP2; полиовируса III типа - складывается из 2 независимых участков, IIIA и IIIB. Антиген IIIA состоит из 58-60 аминокислот и 71-73 аминокислот VP3, тогда как антиген IIIВ состоит из 72 аминокислоты VP2 и 76-79 – VP3. Антигены I и II типов также могут быть подразделены, однако эти разделения менее существенны, чем у антигена III типа.

Все 3 серотипа имеют общий комплементсвязывающий антиген. Их дифференциация производится в реакции нейтрализации. Антигенная структура полиовирусов достаточно стабильна, возможны лишь редкие серологические вариации. Все типы полиовирусов вызывают полиомиелит.

Культивирование полиовирусов. Вирусы полиомиелита хорошо репродуцируются с выраженным ЦПД в первичных и перевиваемых культурах разного происхождения (фибробласты человека, клетки HeLA, Vero, Hep-2, клетки амниона человека). Во время размножения полиовирусов в культурах клеток ЦПД выражается в полной дегенерации монослоя клеток: клетки, которые содержат вирус, округляются, сморщиваются, изменяют свои светопреломляющие качества, в ядрах происходят пикнотические изменения (рис. 3). На заключительной стадии размножения вирусов клетки теряют отростчатость, полностью разрушаются и отслаиваются от стекла (табл. 1).

Дифференциация диких и аттенуированных вариантов вируса полиомиелита

Свойства	Дикие вирусы	Аттенуированные вирусы
Способность размножаться в культуре ткани при разных температурах	Размножаются при 40˚С, плохо размножаются при 35-36˚С	Пониженная способность размножения при 40˚С, хорошая – при 35-36˚С
Размножение в кислой среде	Не влияет	Пониженное

Резистентность. Полиовирусы устойчивы к действию эфира, поскольку лишены липидов; стабильны в широком диапазоне рН (2,5-11,0). Термостабильность их повышается в присутствии двухвалентных катионов. Полиовирусы сохраняют свои инфекционные свойства в сточных водах при 0˚С в течение месяца. Нагревание при температуре 50˚С инактивирует вирусы в течение 30 минут в воде, а при 55˚С – в молоке, сметане, масле и мороженом. Вирус устойчив к детергентам, но высоко чувствителен к ультрафиолетовым лучам и высушиванию, а также к содержащим хлор дезинфектантам (хлорная известь, хлорамин).

Эпидемиология. Полиовирусы распространены повсеместно, более часто заболевание регистрируется в странах Северного Полушария с умеренным климатом. Возбудители высоко контагиозны, особенно при наличии большого скопления людей и при нарушениях элементарных санитарных правил и гигиены.

Источником инфекции является только человек (больной или вирусоноситель). Основной механизм передачи – фекально-оральный, реализуемый водным, пищевым и контактно-бытовым путями. Не исключается возможность передачи полиовируса воздушно-капельным путем, поскольку вирусы способны размножаться в эпителиальных и лимфоидных тканях верхних дыхательных путей (однако пи полиомиелите катаральные явления отсутствуют). В окружающую среду вирус выделяется в огромном количестве с испражнениями с конца инкубационного периода (последние 3-7 дней) до 40 дня болезни, а в ряде случаев – несколько месяцев. В 1 грамме фекалий больных полиомиелитом содержится до 1 миллиона инфекционных доз.

Наиболее чувствительны к полиомиелиту дети, однако заболевают и взрослые. Нередко распространение полиомиелита приобретает эпидемический характер. Для полиомиелита характерна сезонность с подъемом заболеваемости в летние месяцы, что связано с распространением возбудителя с фекалиями.

Патогенез. Алиментарная стадия. Входными воротами при полиомиелите является эпителий слизистых оболочек ротоглотки, желудка, кишечника, а также лимфоидная ткань кольца Пирогова-Вальдейера и пееровых бляшек. В них происходит первичное размножение вируса и поэтому через несколько дней после заражения его можно обнаружить в глоточной слизи и испражнениях. После размножения в эпителиальных клетках вирус проникает в регионарные лимфатические узлы, а затем в кровь (стадия вирусемии). Эти две стадии, как правило, протекают бессимптомно. Лишь иногда вирусемия сопровождается кратковременным повышением температуры и легким недомоганием – это характерно для так называемой «малой» болезни, которая заканчивается выздоровлением и формированием постинфекционного иммунитета. Стадия вирусемии продолжается от нескольких часов до нескольких дней. «Малая» болезнь, как правило, развивается при наличии в сыворотке крови больных высоких титров защитных антител, которые препятствуют дальнейшему диссеминированию возбудителя (абортивная инфекция). В противном случае развивается вторичная вирусемия. При этом в некоторых случаях полиовирусы преодолевают гематоэнцефалический барьер и проникают в центральную нервную систему, в результате чего развивается «большая» болезнь. Полиовирусы проникают в мотонейроны спинного и головного мозга, по-видимому, через аксоны периферических нервов. Это может быть связано с повышенной проницаемостью гематоэнцефалического барьера за счет образующихся иммунных комплексов.

Репродукция вируса в двигательных нейронах передних рогов спинного мозга, а также в нейронах большого и продолговатого мозга, приводит к глубоким, нередко необратимым изменениям. В цитоплазме пораженных нейронов, которые подвергаются глубоким дегенеративным изменениям, обнаруживаются кристаллоподобные скопления вирионов. Вызываемая полиовирусами гибель двигательных нейронов передних рогов спинного мозга приводит к развитию параличей скелетных мышц, вследствие чего больной либо умирает, либо остается инвалидом на всю жизнь.

Клиника полиомиелита. Форма течения полиомиелита определяется величиной инфицирующей дозы, степенью нейровирулентности вируса и иммунологическим статусом организма.

Непаралитические формы полиомиелита. Значительная часть полиовирусных инфекций протекает бессимптомно (скрытно), а абортивная инфекция не вызывает развития специфического симптомокомплекса и проявляется только подъемом температуры тела, слабостью, катаральными либо желудочно-кишечными расстройствами. У незначительной части заболевших (около 1 %) развивается самоограничивающийся асептический менингит, обычно не дающий осложнений.

Паралитическая форма полиомиелита. Наблюдается у 0,1-1 % больных полиомиелитом. Заболевание обычно начинается бурно, с подъема температуры тела до 39-40˚С, сочетающимся с неврологическими расстройствами. Параличи развиваются внезапно на 3-5 сутки. Частота и тяжесть паралитической формы полиомиелита увеличиваются соответственно возрасту. Для детей старше 10-15 лет более характерно развитие тяжелых, калечащих форм заболевания.

Иммунитет. Пассивный иммунитет, приобретенный после рождения, сохраняется в течение первых 4-5 недель жизни ребенка. После перенесенного заболевания (в том числе и в скрытой форме) остается прочный пожизненный иммунитет, обусловленный вируснейтрализующими антителами и клетками иммунной памяти. Гуморальный иммунитет носит типоспецифический характер. Вируснейтрализующие антитела синтезируются еще до появления параличей, однако их максимальные титры (1:2048 и более) регистрируются через 1-2 месяца и обнаруживаются в течение многих лет. Это имеет практическое значение для ретроспективной диагностики полиомиелита. Высокая концентрация антител в сыворотке крови не предотвращает развитие параличей после того, как полиовирус проник в ЦНС.

Лабораторная диагностика включает вирусологический и серологический методы исследования. Недостаток всех имеющихся методов – большая длительность и невозможность быстрого получения результатов.

Материалом для исследования служат смывы с носовой части глотки, мазки из глотки, кал, ректальные тампоны, спинномозговая жидкость, кровь и ее сыворотка. В летальных случаях исследуется секционный материал.

Вирусологический метод. Выделение полиовирусов проводят в первичных культурах тканей (хирургические отходы, эмбрионы) или культурах клеток HeLa, Нер-2, СОЦ и др. Индикацию возбудителей осуществляют по ЦПД и цветной пробе, а его идентификацию – в РН при использовании типовых антисывороток.

О ЦПД сказано в разделе «Культивирование полиовирусов».

Цветная проба. Нормально растущие клетки тканевой культуры кислыми продуктами своего метаболизма изменяют рН среды, вследствие чего содержащийся в ней индикатор (фенол-рот) изменяет цвет из красного в желтый. При инфицировании тканевой культуры полиовирусами происходит разрушение клеток, что сопровождается выходом в среду цитоплазмы клеток с щелочной рН. В результате этого содержащийся в питательной среде индикатор изменяет ее цвет в малиновый с фиолетовым оттенком. Нейтрализация полиовируса соответствующей типу иммунной сывороткой не нарушает метаболических процессов в тканевой культуре, в результате чего так же, как и в первом случае, происходит изменение цвета среды на желтый. Цветная проба лежит в основе реакции нейтрализации.

Реакция нейтрализации. Постановке РН предшествует подготовительный этап: 1) забор материала и его обработка; 2) титрование вируса.

Забор материала и его обработка. Фекалии больного помещают в стерильный пенициллиновый флакон до 10 % объема, заливают раствором Хенкса, центрифугируют, замораживают, оттаивают, к надосадочной жидкости добавляют антибиотики, повторяя данную последовательность несколько раз. Получают прозрачную надосадочную жидкость желто-коричневого цвета, которую засевают в культуру клеток.

Титрование вируса. Для этого вирус разводят от 10^-1 до 10^-10 и каждым разведением заражают по 4 пробирки с культурами клеток. Определяют ТЦД₅₀ (ТЦД – тканевая цитопатическая доза – это такое разведение содержащего вирус материала, которое вызывает гибель 50 % зараженных культур клеток).

Постановка РН. В каждую из 3 пробирок вносят по 1 мл содержащего вирус материала в дозе 100 ТЦД₅₀. В 1 пробирку добавляют 1 мл сыворотки первого типа, во 2 - второго типа и в 3 - третьего типа. Каждой смесью (0,2 мл) заражают культуру клеток (2 пробирки). Во все пробирки приливают 0,8 мл среды 199. Инкубируют при 37˚С 5-7 суток, после чего учитывают РН по ЦПД полиовируса, а также по цветной пробе.

Серологический метод. Включает определение антител в сыворотке крови и спинномозговой жидкости. Выявление высоких титров Ig М указывает на наличие инфекции.

Лечение. Средства специфической противовирусной терапии при полиомиелите отсутствуют. Возможно использование интерферонов.

Профилактика. Неспецифическая профилактика включает в себя выявление и санацию источника инфекции, а также разрыв механизмов и путей передачи полиовирусов, что достигается соблюдением санитарно-гигиенического режима в организованных коллективах. Особое внимание следует уделять обеззараживанию молока и воды (кипячение, пастеризация).

Специфическая профилактика. В настоящее время используется инактивированная формалином вакцина Д. Солка и живая вакцина А. Сэбина.

Убитая вакцина Солка лишена возможности мутаций вакцинного штамма, способных приводить к увеличению вирулентности. К недостаткам вакцины относят: 1) парентеральное введение вакцины, не позволяющее развиться местному иммунитету в лимфоидной ткани кишечника; 2) дороговизна; 3) отдельные партии вакцины могут различаться по иммуногенным свойствам; 4) стойкая невосприимчивость развивается только после 4 инъекций; 5) изготовление требует постоянного контроля эффективности инактивации вируса.

Живая вакцина Сэбина. Достоинствами вакцины являются: 1) сравнительная дешевизна и пероральное использование; 2) вызывает развитие местной (синтез Ig А) и системной невосприимчивости; 3) не требует хранения в холодильнике; 4) способствует формированию иммунной прослойки в популяции. Недостатками вакцины являются: 1) вакцинный штамм способен мутировать и резко увеличивать вирулентные свойства; 2) менее надежна в тропических странах.

По рекомендации ВОЗ прививки против полиомиелита являются обязательными и проводятся, начиная с трехмесячного возраста, до 14 лет. Вакцинация начинается с 3 месяцев трижды с интервалом в 1 месяц. Ревакцинация проводится однократно в 18 месяцев, в 3, 6 и 14 лет.

Вирусы Коксаки

История открытия. Первый вирус Коксаки был изолирован в 1948 г. в штате Нью-Йорк Долдорфом и коллегами, которые изучали вспышку паралитического полиомиелита в деревне Коксаки (США).

Особенности вируса. Вирионы вирусов Коксаки имеют диаметр 22-30 нм и полное морфологическое сходство с полиовирусами.

Геном представлен однониточной нефрагментированной «+»-РНК, состоящей из 7,5_*10³ нуклеотидов, и расположен между 2 нетранслирующимися поли(А)-участками – 5’- и 3'-концами. Малый белок, VPg, связан с 5'-концом.

Антигенная структура. Вирусы Коксаки имеют отличную от полиовирусов антигенную структуру и никогда перекрестно не реагируют с антителами к возбудителям полиомиелита. Подразделение вирусов Коксаки по антигенной структуре основано на селективном действии на мышей-сосунков, в связи с чем вирусы Коксаки подразделены на группу А и группу В.

Вирусы Коксаки группы А вызывают у новорожденных мышей вялый паралич, обусловленный поражением скелетной мускулатуры (диффузный миозит с воспалением и очаговым некрозом поперечно-полосатых мышц). В отличие от них, вирусы Коксаки В вызывают у новорожденных мышей поражение центральной нервной системы, а изменения в мышцах выражены слабо. Кроме того, вирусы группы В способны поражать миокард, селезенку и другие органы. Характерным для инфекции является некроз бурого межлопаточного жира.

Группа А имеет 23 серотипа 1-24 (23-й утерян), группа В - 6 серотипов 1-6. Разделение на серовары основано на свойствах типоспецифического антигена. Серовары не содержат группоспецифического антигена, но обладают некоторой перекрестной реактивностью. Было замечено, что действие на мышей-сосунков не является четкой характеристикой. Например, штаммы вирусов Коксаки А 23 сейчас считаются вариантами вируса ЕСНО 9, а некоторые штаммы вирусов Коксаки 24 с недавнего времени классифицируются как вирусы ЕСНО 34. Современные исследования в области молекулярной биологии внесли новые дополнения в современную классификацию: в связи с анализом структуры РНК в настоящее время существуют 4 кластера энтеровирусов человека, среди которых вирусы Коксаки составляют более 3 кластеров.

Вирусы групп А и В имеют общий комплементсвязывающий антиген и различаются по типоспецифическим антигенам в реакции нейтрализации. Некоторые штаммы вирусов Коксаки обладают гемагглютинирующими свойствами в отношении эритроцитов человека группы крови О (I), вследствие чего они могут быть идентифицированы в РТГА.

Резистентность. Действие температуры 50˚С убивает вирусы Коксаки в течение нескольких минут, однако присутствие ионов магния и кальция может препятствовать тепловой инактивации. Вирусы Коксаки резистентны ко многим широко используемым дезинфектантам (алкоголю, хлоргексидину, продуктам четвертичного аммония). Они стабильны в рамках рН=3,0-10,0. Для дезинфекции следует использовать дезинфектанты, содержащие альдегиды (формальдегид, глютаральдегид), для рук – хлориды и йодиды. Вирусы высоко резистентны в фекалиях, фекалии могут при комнатной температуре неделями сохранять свою инфективность.

Культивирование. Целый ряд сероваров Коксаки А и Коксаки В способны размножаться в культурах клеток человека (гетероплоидные клетки, такие как КВ, HeLa, Hep-2). Кроме того, вирусы Коксаки групп А и В культивируют в культурах клеток обезьян (Vero, BGM). При размножении вирусов Коксаки в культурах клеток ЦПД аналогично таковому для полиовирусов. Для выделения вирусов Коксаки А и В используют новорожденных мышей 1-4 дневного возраста. С увеличением возраста чувствительность мышей к вирусам уменьшается.

Эпидемиология. Вирусы Коксаки распространены повсеместно. Отмечается сезонность заболеваемости с подъемом в летне-осенние месяцы. Источником инфекции при Коксаки-инфекции являются больные люди и вирусоносители. Вирусы Коксаки могут циркулировать и у различных животных, например у свиней (вирус Коксаки В5). Основной механизм передачи – фекально-оральный, реже – аэрогенный (через отделяемое носоглотки). Дети младшего возраста являются резервуаром вируса.

Патогенез. После попадания вируса оральным путем, установлено, что он следует тем же путем, что и полиовирус: размножается в клетках глотки (редко – в кишечнике), а также в лимфатических узлах. Затем, через кровеносную и лимфатическую системы вирус достигает органов-мишеней. В нижних отделах кишечника вирус проникает в пейеровы бляшки через М-клетки. Его размножение в абсорбирующих клетках хорошо изучено в животных тканях in vitro, но плохо – у человека.

Иммунитет. После перенесения заболевания остается напряженный типоспецифический иммунитет. В сыворотке крови сохраняются вируснейтрализующие антитела в течение многих лет. Комплементсвязывающие антитела исчезают спустя несколько месяцев.

Клиника. Большинство инфекций клинически никак не проявляется. Неизвестно, почему люди по-разному восприимчивы к данному вирусу. Несколько факторов увеличивают чувствительность: исходный иммунный статус, иммунодефицит, вызванный некоторыми штаммами вирусов, состояние системы HLA и (или) гормональные взаимодействия с размножающимся вирусом. Последний фактор может объяснить тот факт, что на 1 заболевшую Коксаки-инфекцией женщину приходится 1,5-2 мужчины в случае, когда есть налицо клинические проявления заболевания.

Вирусы Коксаки А у людей были выделены при «герпетической» ангине, перикардите, асептическом серозном менингите и других заболеваниях. Вирусы Коксаки В характеризуются более высокой нейротропностью. Они выделяются при асептическом серозном менингите, миокардите и энцефаломиокардите у детей до 3-летнего возраста. Вирусы обеих групп могут вызывать у детей и взрослых полиомиелитоподобные заболевания, острые респираторные и кишечные инфекции у детей, а также эпидемическую плевродинию. В целом, для вирусов Коксаки характерен полиорганный тропизм .

Лабораторная диагностика. Применяются вирусоскопический, вирусологический и серологический методы исследования. Материалом для исследования являются смывы и мазки из носоглотки, содержимое кишечника.

Экспресс-диагностика. Используется кариологический анализ. Смывы из носоглотки центрифугируют, из осадка готовят препарат, окрашивают гематоксилином, высушивают, микроскопируют с использованием иммерсионной микроскопии. Специфическим для энтеровирусной инфекции является смещение хроматина к периферии ядра и образование характерных, вытесненных из осветленного ядра, ярко-фиолетовых полумесяцев. Это дает возможность сделать предварительный вывод о репродукции энтеровирусов в исследуемом материале.

Метод флюоресцирующих антител в непрямом варианте является перспективным для выявления и идентификации вирусов ЕСНО в клиническом материале. Используются иммунные диагностические сыворотки, реагирующие с вирусным антигеном, находящимся в середине клетки исследуемого материала.

Вирусологический метод. Вируссодержащим материалом заражают культуры клеток (например, НеLа или почек обезьян) и мышат-сосунков (последнее особо значимо для идентификации вирусов группы А, проявляющий слабый цитопатогенный эффект in vitro). Гемагглютинирующие варианты выявляют с помощью РТГА, характеризующейся типоспецифичностью. При наличии цитопатического эффекта производят типирование вируса внесением диагностических иммунных сывороток, меченных флюоресцинами. По характеру патологических изменений у мышей определяют принадлежность вируса к группе А или В. Принадлежность к сероварам определяют в РСК или РН с типоспецифическими антисыворотками.

Серологический метод. Диагноз Коксаки-инфекции подтверждают обнаружением антител в парных сыворотках, забираемых в начале и на 2-3 неделе болезни. Для выявления антител используют РН, РСК и РПГА.

Лечение. Противовирусное лечение включает использование интерферонов (преимущественно класса α-интерферонов, обладающих наибольшим антивирусным действием) и индукторов продукции эндогенных интерферонов (мефенаминовая кислота, амизон). Специфическое лечение включает использование γ-глобулина с антителами против вирусов Коксаки.

Профилактика. Неспецифическая профилактика заключается в выявлении, локализации и санации источника инфекции (больного человека, или вирусоносителя) и разрыве механизмов и путей передачи энтеровирусов (охрана водоисточников от фекального загрязнения, кипячение воды, и прочее). Защита восприимчивого к энтеровирусам контингента людей включает массовое использование с профилактической целью индукторов продукции эндогенного интерферона. Вакцинопрофилактика при Коксаки-инфекции не разработана.

Вирусы ЕСНО

История открытия. ЕСНО-вирусы впервые были выделены из фекалий людей в 1951-53 гг. Д. Мельником и др. В связи с тем, что эти вирусы обнаруживали сходство с полиовирусами и вирусами Коксаки (обладали ЦПД при отсутствии патогенности для обезьян и новорожденных мышей), но не были связаны в то время ни с какими заболеваниями человека, их назвали вирусами-сиротками, или, согласно английской аббревиатуре, ЕСНО-вирусами (от английских слов enteric cytopatogenic human orphans – кишечные цитопатогенные вирусы-сиротки человека). В настоящее время установлено, что ЕСНО-вирусы способны вызывать у человека ОРВИ, асептические менингиты, реже - восходящие параличи, энцефалиты и лихорадочные состояния, сопровождающиеся кореподобными высыпаниями.

Особенности вируса. Вирионы ЕСНО-вирусов имеют типичное для пикорнавирусов строение. Геномная «+»-РНК длиной 7,5_*10³ нуклеотидов ковалентно связана на 5-конце с маленьким кодируемым вирусом белком VPg. На 3’-конце расположен короткий (длиной в 70-100 нуклеотидов) нетранслируемый участок, формирующий псевдоузел. 3'-конец является полиаденилированным, длина поли(А)конца составляет 60 нуклеотидов и он играет важную роль в стабильности РНК и инфекционности. Репродукция вирусов ЕСНО типична для пикорнавирусов.

Антигенная структура. ЕСНО-вирусы имеют 31 серовариант (1-9, 11-27, 29-33), которые дифференцируют в РН. Разделение основано на свойствах специфического антигена вирусного капсида, нейтрализуемого типоспецифическими антителами. Согласно последней классификации, серовары вирусов ЕСНО 22 и 23 составляют новый род энтеровирусов – Parechovirus. Групповой специфический антиген отсутствует; некоторые типоспецифические антигены обладают определенной перекрестной реактивностью, а 12 сероваров способны агглютинировать эритроциты человека 0 (I) группы крови. Антигены некоторых сероваров спонтанно элюируют.

Культивирование. Размножение вирусов in vivo происходит у приматов, мышей-сосунков. In vitro рост вирусов ЕСНО дает цитопатический эффект (исключение составляют серотипы 22 и 23). Первичные культуры клеток обезьян и человека и культуры тканей приматов являются наиболее приемлемыми для изоляции вирусов ЕСНО: BMG (клетки почки зеленой обезьяны Буффало), МК (клетки почек макаки резус), Vero, HEK (клетки почки эмбриона человека), MRC-5 (диплоидные фибробласты человека), клетки амниона человека, RD (клетки рабдосаркомы человека). Другие клеточные линии (HeLa, KB, Нер-2) менее чувствительны.

Эпидемиология. Источником инфекции является больной человек или вирусоноситель. Механизм передачи – фекально-оральный, реализующийся преимущественно водным путем. Дополнительный механизм передачи - аэрогенный. Поражаются преимущественно дети. Описаны случаи внутрибольничных ЕСНО-инфекций среди новорожденных с летальным исходом. Подъем заболеваемости ЕСНО-инфекцией наблюдается преимущественно в летне-осенний период.

Патогенез. Патогенез ЕСНО-инфекции сходен с патогенезом полиомиелита. Входными воротами являются слизистая оболочка носа, глотки, тонкого кишечника, в эпителиальных клетках которых, а также в лимфоидной ткани и происходит размножение ЕСНО-вирусов. После размножения вирусы проникают в лимфу, а затем в кровь, обусловливая вирусемию и генерализацию инфекции. Дальнейшее развитие болезни зависит от свойств вируса, его тканевого тропизма, а также иммунологического статуса организма. Попадая в ток крови, вирусы гематогенно распространяются по всему организму, избирательно оседая в тех органах и тканях, к которым они обладают тропизмом. Развитие полиомиелитоподобного заболевания или серозного менингита происходит лишь в тех случаях, когда вирус проникает через гематоэнцефалический барьер в ЦНС.

Лабораторная диагностика. Материалом для исследования являются фекалии, спинномозговая жидкость, смыв из носовой части глотки, кровь и др.

Экспресс-диагностика. Используется кариологический анализ. Смывы из носоглотки центрифугируют, из осадка готовят препарат, окрашивают гематоксилином, высушивают, микроскопируют с использованием иммерсионной микроскопии. Специфическим для энтеровирусной инфекции является смещение хроматина к периферии ядра и образование характерных, вытесненных из осветленного ядра, ярко-фиолетовых полумесяцев. Это дает возможность сделать предварительный вывод о репродукции энтеровирусов в исследуемом материале.

Метод флюоресцирующих антител в непрямом варианте является перспективным для выявления и идентификации вирусов ЕСНО в клиническом материале. Используются иммунные диагностические сыворотки, реагирующие с вирусным антигеном, находящимся в середине клетки исследуемого материала.

Вирусологический метод. Проводят заражение клеток почек обезьян вируссодержащим материалом. Принципы выделения и идентификации общие для всех энтеровирусов. Факт обнаружения возбудителя – не абсолютный показатель для постановки диагноза (так как возможно бессимптомное носительство).

Серологический метод. Диагноз ЕСНО-инфекции подтверждают обнаружением антител в парных сыворотках, забираемых в начале и на 2-3 неделе болезни. Для выявления антител используют РН, РСК и РПГА.

Лечение. Показано использование интерферонов и индукторов продукции эндогенных интерферонов.

Профилактика. Аналогична таковой при полиомиелите и Коксаки-инфекции.