§ 2. Подсемейство Paramyxovirinae.

Род Respirovirus.

Вирус парагриппа человека

История открытия. Впервые вирусы парагриппа были выделены У. Ченоком в 1956-58 гг. от детей с гриппоподобными заболеваниями.

Особенности вируса. Вирионы диаметром 150-250 нм имеют типичное для парамиксовирусов строение (рис. 2). Суперкапсид содержит гемагглютинин- нейраминидазу и F-белки (fusion – слияние). Белок F (F1, F2), образующийся после протеолитического расщепления его предшественника F0, опосредует 3 вида активности: гемолиз эритроцитов; слияние вирусной мембраны с мембраной клетки и ее лизосом; слияние клеток, которое обеспечивает возможность вирусу распространяться от клетки к клетке при помощи образующегося синцития, минуя околоклеточную среду. Под суперкапсидом располагается матриксный белок М. Капсид вирусов парагриппа имеет спиральный тип симметрии. Капсид имеет 18 нм в диаметре, содержит приблизительно 2000 молекул нуклеопротеина (NP), покрывающего РНК. Нуклеопротеины представлены 2000 молекулами белка Р и 20 L молекулами. Р-белок формирует полимеразный комплекс с L-белком и необходим для транскрипции вирусной РНК и репликации, включающей дополнение 3’-поли(А), модификации 5’-конца и нуклеотидной полимеризации вирусных транскриптов. Белки Р для парамиксовирусов являются видоспецифичными. Геномная РНК имеет 6 генов и длину 15_*10³ нуклеотидов (у вирусов парагриппа 1, 2, и 3 типов; у вирусов парагриппа 4 типа она становится такой после завершения последовательности). Продуктом гена Р является полимеразо-ассоциированный белок (РНК-полимераза или транскриптаза). Геном парамиксовирусов стабилен.

Антигенная структура. На основании различий антигенной структуры гемагглютинина-нейраминидазы, F- и NР-белков вирусы парагриппа человека подразделяются на 4 серотипа. Типы 1, 2 и 3 антигенно родственны и перекрестно реагируют с антителами к вирусу эпидемического паротита. Вирусы 4 типа не имеют выраженного антигенного родства и имеют 2 подтипа (последний иногда рассматривается как 5 серотип). Представители всех серотипов проявляют нейраминидазную и гемагглютинирующую активности. Вирусы парагриппа человека 1 и 2 типов агглютинируют эритроциты морских свинок, мышей, овец и кур, 3 типа – не агглютинируют эритроциты кур, а 4 типа – агглютинирует только эритроциты морских свинок. Вирусы 1 и 4 типов проявляют наибольший цитопатический эффект, выявляемый в реакции гемадсорбции. Парамиксовирусы не имеют общего антигена, единого для всего семейства, но имеют общие детерминанты для рода.

Культивирование. Вирусы парагриппа интенсивно размножаются в культурах первичных и перевиваемых клеток почек обезьян, морских свинок, телят, диплоидных клетках, фибробластах и клетках почек эмбриона и амниона человека, в меньшей мере – в перевиваемых культурах клеток Нер-2, HeLa, Vero, СОСТ, ВНК-21, КВ (рис. 3).

Резистентность. Вирусы парагриппа термолабильны, инактивируются при температуре 56˚С в течение 30 минут. При -70˚С жизнеспособны несколько месяцев. Быстро погибают в кислой среде, чувствительны к эфиру, детергентам, спиртам и хлорсодержащим дезинфектантам.

Эпидемиология. Источник инфекции при парагриппе – больной человек или вирусоноситель. Механизм передачи – аэрогенный, реализующийся преимущественно воздушно-капельным путем, в редких случаях – контактным путем. Вирусы парагриппа распространены повсеместно, вызывают в основном локальные вспышки, особенно в странах с умеренным климатом. Доминирующим патогеном является вирус парагриппа человека 3 типа. Наиболее часто парагрипп возникает у детей (в возрасте 4-5 лет) и грудных младенцев. Заболеваемость имеет весенне-осеннюю сезонность.

Патогенез. Возбудитель репродуцируется преимущественно в эпителии верхних отделов дыхательных путей, откуда проникает в кровоток, вызывая вирусемию. Реже размножение вирусов парагриппа происходит в бронхиолах и ткани легких. Поражаются клетки гортани (ларингит), трахеи, бронхов (трахеобронхит), реже - легких (пневмония). Ларинготрахеобронхиты наиболее часто вызывают вирусы парагриппа человека 1 и 2 типов. Бронхиолиты и пневмонии чаще связаны с инфекцией вирусом парагриппа человека 3 типа. Субклинический катар верхних отделов дыхательных путей способны вызывать все серотипы вирусов парагриппа человека. Выявлена способность вирусов парагриппа к персистенции в организме человека.

Иммунитет при парагриппозной инфекции типоспецифичен и обеспечивается как клеточными (натуральные киллеры, Т-киллеры), так и гуморальными факторами (интерферон, иммуноглобулины). У большинства взрослых обнаруживаются сывороточные нейтрализующие антитела для всех типов парагриппа человека, а у некоторых - секреторные Ig А в концентрациях, предотвращающих первичную инфекцию. Несмотря на наличие нейтрализующих антител, возможна реинфекция одним и тем же типом вируса.

Клиника. Парагрипп у детей проявляется ринитом, фарингитом и бронхитом, часто с повышением температуры. Кашель грубый, лающий. Возможно развитие крупа, обструкции дыхательных путей при сохранении кашля и высокой температуры.

Лабораторная диагностика. Материалом для исследования являются мазки с задней стенки глотки и нижних носовых ходов, носоглоточные смывы, сыворотка крови, секционный материал (участки ткани трахеи, бронхов, легких). Забор материала из носоглотки проводят тампонами, после чего их погружают в раствор Хенкса с бычьей сывороткой крови. От одного больного материал берут 2-3 раза, все тампоны собирают в 1 пробирку. Носоглоточные смывы получают путем полоскания горла изотоническим раствором натрия хлорида 3 раза по 5 мл; собирают их в банку.

В лаборатории тампоны прополаскивают в жидкости, в которой они находились, отжимают о стенки посуды и удаляют. Смыв отстаивают, отбирают среднюю его часть, добавляют антибиотики (пенициллин и стрептомицин), выдерживают 30 минут при комнатной температуре и используют для выделения вируса как можно раньше после получения (без замораживания). Часть материала сохраняют при температуре -18˚С и ниже для повторного выделения вируса. У умерших берут для исследования кусочки легких, трахеи и бронхов.

Для серологического исследования получают парные сыворотки крови. Первую сыворотку берут на 3 день заболевания, вторую – через 2-3 недели. Сыворотки крови хранят замороженными.

Для экспресс-диагностики материал от больного центрифугируют, осадок ресуспендируют в небольшом объеме (3-5 капель) надосадочной жидкости, и из полученной суспензии готовят 5-6 мазков на предметном стекле. Используют также мазки-отпечатки со слизистой оболочки нижних носовых раковин.

Экспресс-диагностика. Используется иммунофлюоресцентная микроскопия. Для прямого иммунофлюоресцентного метода применяют противовирусные флюоресцирующие иммуноглобулины, для непрямого - антивидовые флюоресцирующие иммуноглобулины. Результат исследования считают положительным, если в препаратах выявлено 3-5 флюоресцирующих клеток и более.

Вирусологическое исследование проводится на первичных монослоях культур почек эмбриона человека или обезьян; индикацию возбудителя осуществляют по ЦПД и тесту гемадсорбции. Вирусы идентифицируют в РСК, РТГА, РН, смешивая со специфическими антителами и инкубируя 2 ч при температуре 18-21˚С.

Серологический метод. Парные сыворотки крови исследуются в РТГА и РСК с эталонными штаммами парагриппозных вирусов.

Лечение включает использование интерферонов и индукторов их продукции. На ранних этапах заболевания парагриппом эффективен ремантадин. В тяжелых случаях болезни применяется донорский γ-глобулин.

Профилактика. Неспецифическая профилактика парагриппа включает: 1) выявление и санацию источника инфекции; 2) соблюдение правил противоэпидемического режима в условиях очага инфекции, направленных на разрыв механизма и путей передачи инфекта (изоляция больного, влажная уборка и проветривание, УФО и т.д.); 3) массовое применение индукторов продукции эндогенного интерферона или интраназальное введение интерферонов в течение всего периода вспышки; использование оксолиновой мази для смазывания носовых ходов.

Специфическая профилактика парагриппа проводится инактивированными культуральными вакцинами против вирусов парагриппа 1, 2, 3 типов, но эти вакцины малоэффективны, что связано с инактивацией F-гликопротеинов при приготовлении вакцин.

14. Вирусы гепатитов В, С, D. Пути передачи возбудителей человеку. Характеристика вирусов. Патогенез. Лабораторная диагностика вирусных гепатитов В, С, D. Проблема специфической профилактики. Особенности патогенеза гепатитов В и D у детей.

Семейство Hepadnaviridae