Самостійна робота студентів

Кожний студент проводить висів 5-ти бактеріальних культур на 5 поживних середовищах. Результати роботи студенти заносять у нижче наведену таблицю.

Поживні середовища і характер росту мікроорганізмів

Назва поживного середовища	Назва мікроорганізмів, що висіваються (латинська)	№ штамів	Характер росту мікроорганізмів
1	2	3	4

Примітка: стовпчик 4 заповнюється на наступному занятті.

Контрольні питання

1.Який лабораторний посуд використовується для культивування мікроорганізмів?

2. Які інструменти використовують для посіву мікроорганізмів на поживні середовища?

3. Порядок дій під час посіву мікроорганізмів з щільного на щільне поживне середовище.

5. Порядок посіву з щільного поживного середовища на рідке.

6. Порядок посіву з рідкого поживного середовища на рідке.

7. Фізичний метод вирощування анаеробів.

8. Хімічний метод вирощування анаеробів.

9.Біологічний метод вирощування анаеробів.

Заняття № 7

Тема: вивчення культуральних та біохімічних властивостей мікроорганізмів, яких вирощено на поживних середовищах.

Мета заняття:

1. Засвоїти методи опису, характеру росту бактерій на рідких і щільних поживних середовищах (макроскопічні та мікроскопічні).

2. Вивчити деякі біохімічні властивості мікроорганізмів .

3. Навчитися визначати вид бактерій за характером росту на поживних середовищах.

4. Ознайомитися з методами виділення чистої культури мікроорганізмів.

ЛІТЕРАТУРА:

ІV 64-68; VІ 107-11О;

Самостійна робота студентів

Кожен студент вивчає макро- та мікроскопічні культуральні та біохімічні ознаки бактерій, які зросли на рідких та щільних поживних середовищах, готує мазки з кожної культури, забарвлює їх за методом Грама. Мазки розглядають під мікроскопом і замальовують у зошит.

ОСНАЩЕННЯ ЗАНЯТТЯ.

Забезпечити кожного студента: культурами, які зросли на поживних середовищах: МПА, МІІБ, МПЖ, картоплі, молоці, бактеріологічною петлею, мікроскопом, спиртівкою, фільтрувальним папером, предметним склом, пастерівською піпеткою, пінцетом.

На дві людини - набір фарб, полоскальницею, сірниками, імерсійною олією, дезрозчином, спиртом, стерильною водою.

Тим самим забезпечити в одному примірнику викладача.

Методика проведення заняття.

Студенти вивчають характер росту мікроорганізмів на рідких, напіврідких, щільних поживних середовищах.

Для кожної культури мікроорганізмів властивий певний ріст на поживних середовищах. В зв'язку з цим культуральні ознаки мають дуже важливе значення під час визначенні виду бактерій.

На рідких поживних середовищах: на м'ясопептонному бульйоні - мікроби зростають на поверхні у вигляді плівки ніжної або грубої, складчастої або гладенької.

Деякі бактерії утворюють пристінне кільце. Інколи спостерігається зміна прозорості середовища, його кольору, виникнення на дні згустку зернистого або у вигляді шматочка вати.

При визначенні культуральних властивостей бактерій на рідких поживних середовищах (МПБ) пробірку з культурою спочатку розглядають не струшуючі. При цьому звертається увага на колір середовища в порівнянні з початковим, наявність росту на поверхні, наявність плівки, згустку, помутніння середовища. Потім пробірку збовтують та визначають характер згустку.

На щільному (м'ясопептонному агарі) та напіврідких середовищах (м'ясопептонній желатині) мікроорганізми утворюють колонії - округлі, овальні, розгалужені, середні та великі, кінці колоній можуть бути рівні, розірвані, зубчасті, лапасті. Поверхні колоній можуть бути матові, блискучі, рівні або складчасті.

Під час визначення культуральних властивостей на щільному поживному середовищі (МПА) колонії, які зросли, спочатку розглядають неозброєним оком, потім через окуляр мікроскопа

Опис колоній проводять з вивченням їх форм, поверхні, кінців, прозорості, консистенції та пігментації.

На м`ясопептонній желатині, під час посіву уколом (стовпчиком) спостерігають її розрідження або ріст по уколу вгорі - аероби, внизу - анаероби. За лінією уколу зріст може бути суцільним ланцюжком у вигляді пера, ялинкою, або лампової щітки.

При визначенні культуральних властивостей вивчають наявність розрідження, характер росту за уколом.

Деякі бактерії викликають біохімічні зміни в молоці, що призводить до його зтвороження. Так цукроволітична властивість мікроорганізмів - це властивість ферментативно розкладати цукор.

C₆H₁₂O₆ → 2C₃H₆O₃

Лактоза → молочна кислота.

Молочна кислота яка утворилася, хімічно реагує з казеїном, який має атом кальцію. В результаті молоко, на якому культивуються мікроорганізми зтворожується.

Деякі бактерії розріджують казеїн, завдяки протеолітичній властивості - це властивість виділяти протеолітичні ферменти - протеази.

Бактерії, які виділяють протеази, розріджують желатину та розчиняють казеїн у молоці.

На молоці визначають зтвороження - наявність цукроволітичних властивостей та пептонізації - наявність протеолітичних властивостей мікроорганізмів.

На картоплі вивчають форму колоній, форму кінців колоній, поверхню, колір, консистенцію та інші характерні ознаки росту мікроорганізмів - на щільних середовищах.