Заняття № 5

Тема: Поживні середовища для вирощування мікроорганізмів і рецепти їх приготування.

Мета заняття:

1. Вивчити призначення, вимоги до поживних середовищ, їх класифікацію.

2. Засвоїти методику виготовлення поживних середовищ: м'ясопептонного бульйону, м'ясопептонного агару, м'ясопептонного желатину, картоплі.

3. Вивчити способи стерилізації поживних речовин.

ЛІТЕРАТУРА

IV. 81-89; VI. 46-52;VІІ.68-72.

Зміст заняття

Викладач:

- проводить опитування студентів по пройденому та наступному матеріалу;

- знайомить з основними поживними середовищами і їх класифікацією, призначенням і рецептами виготовлення (МПБ, МПА, МПЖ, картоплі, молока).

- показує методи розливу, підготовки до стерилізації поживних середовищ;

- знайомить з методами їх стерилізації.

Самостійна робота студентів.

Кожен студент вивчає:

а) основні поживні середовища, вимоги до них, їх призначення і класифікацію;

б) рецепти виготовлення основних поживних середовищ та методи їх стерилізації;

в) підгрупа в 2-3 студента готує поживні середовища: МПБ, МПА, МПЖ, із картоплі, молока;

г) розливають виготовленні поживні середовища в пробірки із розрахунку одна пробірка на дві людини.

Оснащення заняття

Забезпечити кожну підгрупу студентів — МПБ, агар-агаром, пептоном, желатином, картоплею, молоком, пробірками з пробками, штативами, водяною банею, електроплиткою, пінцетами, сірниками, скальпелями, терезами з рівновагами, лійками, колбами, склянками, вимірювальним циліндром, крейдою, хімічно чистою повареною сіллю, дистильованою водою.

Методика виконання завдання

До поживних середовищ, які використовуються для вирощування мікроорганізмів висувають слідуючи вимоги:

- поживне середовище повинно мати всі речовини, необхідні для росту та розмноження певного мікроорганізму в доступній форм: - бути прозорою і ізотонічною; - мати оптимальну вологість, в'язкість і РН; - бути стерильною.

За походженням поживні середовища бувають:

а) природні (молоко, картопля та ін.);

б) штучні - це такі середовища, які готують за спеціальними рецептами із природних продуктів. Наприклад: м'ясопептонний агар (МПА), м'ясопептонний бульйон (МПБ),м'ясопептонний желатин (МПЖ);

в) синтетичні - готуються із хімічно чистих речовин.

Поживні середовища класифікують ще за консистенцією. Вони бувають: рідкі (молоко, МПБ), щільні (МПА), напіврідкі (МПЖ);

За призначенням поживні середовища поділяють на: прості (звичайні), спеціальні або елективні та диференціально-діагностичні (кольорові).

М'ясопептонний бульйон (МПБ) готують на м'ясній воді шляхом додавання до неї 1% пептону і 0.5% повареної солі. Визначають Р^Н, доводять, його до 7.4-7.6. Компоненти змішують і кип'ятять до повного розчинення пептону, фільтрують і стерилізують при температурі 120⁰С протягом 20 хвилин.

М'ясопептонний агар (МПА) готують шляхом додавання до МПБ 2% дрібно різаного агар-агару. Його розчиняють шляхом нагрівання, фільтрують, розливають в пробірки по 4-5 мл і стерилізують при 120⁰С протягом 30 хвилин.

М'ясопептонна желатина (МПЖ) готується з додаванням до МПБ 15-20% желатини. При постійному помішуванні в водяній бані желатину розплавляють до повного розчинення.

Молоко - знежирюють шляхом центрифугування, після чого розливають в пробірки по 4-5 мл.

Картопля - із почищеної картоплі вирізають куб не більше діаметра пробірки. Куб ріжуть по діагоналі. Отриману призму надівають на 1/3 сірника і сірником вниз опускають до дна пробірки. У пробірку наливають декілька крапель води і на кінчику скальпеля додають порошок крейди.

Виготовленні поживні середовища стерилізують за прийнятими методиками, після чого витримують деякий час в термостаті для контролю їх стерильності.