Контрольні питання.

1. Як класифікуються поживні середовища за походженням?

2. На які групи поділяються середовища за їх призначенням?

3. Яким вимогам повинні відповідати поживні середовища?

4. Що таке поживне середовище і його призначення?

5. Що таке пептон і його роль в складі поживних середовищ?

6. Що таке агар-агар, його хімічний склад і призначення?

7. Що таке желатина і її походження?

8. Технологія виготовлення МПБ, МПА, МПЖ.

9. Режим стерилізації поживних середовищ.

Заняття № 6

Тема: Методи посіву та культивування мікроорганізмів на поживному середовищі.

Мета заняття: 1.Оволодіти технікою посіву мікроорганізмів на рідкі, напіврідкі і густі поживні середовища;

2. Засвоїти методи культивування мікроорганізмів в аеробних і анаеробних умовах.

ЛІТЕРАТУРА:

ІV 100-104; VІ 58-62; VІІ.98-100

Обладнання заняття

Забезпечити кожного студента: спиртівкою, бактеріологічною петлею, штативом, скляним шпателем, пастерівською піпеткою, стерильними середовищами в пробірках і бактеріологічних чашках МПБ, МПА, МПЖ, картопля, знежирене молоко та чистими культурами №183 - Вас. mycoides, №86 - Вас. anthracoides, №104 - Вас. pseudoantracis, №720 - Вас. sublitis, №181 - Вас. mesentericus, №31- Escherichia coli.

Викладача забезпечити тим же у одному екземплярі.

Методика виконання завдання.

В бактеріологічних лабораторіях мікроорганізми культивують на поживних середовищах. Для того, щоб отримати чисту культуру, досліджуванні мікроорганізми висівають у стерильних умовах на стерилізовані поживні середовища.

Для посіву необхідно мати поживне середовище в лабораторній посудині, зручної для роботи, і інструменти посіву - бактеріологічну петлю, пастерівські піпетки, скляний або металевий шпатель.

Викладач демонструє інструменти та техніку посіву на рідкі, напіврідкі і густі поживні середовища.

Після висіву пробірки і чашки ставлять в термостат (шафа, в якій автоматично підтримується. постійна температура). Звичайно посіви витримують при 37⁰С впродовж доби.

Для культивування анаеробів пробірки або чашки розміщують в ексикаторі, який з`єднаний з вакуум-насосом або має на дні хімічний поглинач кисню. Ексикатор ставлять в термостат.

Інколи анаероби культивують в герметичне закритій посудині разом з аеробами. Аероби використовують весь кисень, і тільки тоді починається ріст анаеробів.

Техніка посіву

Етап І.

1. Пробірку з бактеріальною культурою беруть у ліву руку знизу так, щоб поверхню середовища було добре видно.

2. У праву руку як олівець беруть петлю або піпетку.

3. Петлю або піпетку фламбірують.

4. Мізинцем правої руки виймають пробку.

5. Петлю охолоджують об край агару або скла.

6. Петлею набирають наліт мікроорганізмів.

7. Закривають пробірку і ставлять її в штатив.

Етап II.

1. Пробірку з чистим поживним середовищем беруть у ліву руку знизу так, щоб поверхню середовища було гарно видно.

2. Мізинцем правої руки виймають пробку.

3. Петлю вводять в пробірку і матеріал на густому поживному середовищі розтирають по поверхні зигзагоподібними рухами, у рідкому середовищі -круговими рухами, а у напіврідкому (МПЖ) проколом до дна пробірки (посів стовпчиком).

Посів з рідкого поживного середовища роблять пастерівськими піпетками. Пипетку фламбірують. Стерильним пінцетом відламують кінець. Стерильно набирають досліджуваний матеріал. Переносять його на стерильне поживне середовище. Пипетку опускають у дез розчин.