Рентгенографические результаты

Авторентгенограммы общего вида, сделанные на кроликах в разные моменты после инъекции в ядра подъязычного нерва (и неизбежно в дорсальное ядро блуждающего нерва, который очень близок) раствора, содержащего отмеченные вещества, показали, что: ^л) наша выборочная маркировка оказалась успешной;

2) радиоактивные вещества переносились по подъязычному (и блуждающему) нерву со скоростью 5-5,5 мм в день;

3. радиоактивность достигла корня языка через 5-6 дней после операции (сердца - по блуждающему нерву через 9-10 дней после операции);

4. если мы перерезали бы один из двух подъязычных нервов, то смогли бы установить радиоактивность только с той стороны языка, которая иннервировалась.

Наши микроскопические рентгенограммы (у животных, умерщвленных на 8 или 15 день после операции по маркировке подъязычного нерва при условии вырезания левого нерва) показали, что:

") только правая сторона была радиоактивна (слева нам удалось обнаружить слабую степень радиоактивности); радиоактивность происходила из мышечных клеток;

2. сначала радиоактивность появлялась в основании языка, затем распространялась к его кончику, которого она достигала через несколько дней;

3. несмотря на разнообразие соединительных тканей языка (мышца, эпителий, кровеносные сосуды, железы и сенсорные рецепторы) и множественность их иннервации (V, VII, IX, X, XII пары краниальных нервов и симпатические волокна) только мышцы языка (иннервируемые ХП-ой парой) демонстрировали значительную радиоактивность.

Радиоактивные частицы мышечных клеток можно было обнаружить во всех частях клеток (ядра, саркоплазма, фибриллы), в нервных волокнах, иннервирующих эти клетки и в двигательных пластинках. Эта тройная локализация убеждала нас в том, что, по меньшей мере, между 8 и 15 днем после маркировки нейрона нейронные протеины, переносимые аксоном, достигают мышечных клеток.

В опубликованном нами отчете о проведении этого эксперимента мы сделали предположение о том, что эта межклеточная транспортировка

190

веществ лежит в основе так называемых "трофических" свойств, которыми обладают периферические нейроны по отношению к метаболизму, функции, развитию, дифференциации, росту и регенерации структур, которые они иннервируют.

Какова природа и качество перемещаемых веществ

Такое очень оригинальное свидетельство перемещения из нейрона в мышцу макромолекулярных веществ (эти вещества оставались прикрепленными к мышечным клеткам и удерживались после промывания) навело нас на мысль: попытаться определить, по меньшей мере, тип передаваемых веществ и временные условия этого вклада. Я расскажу Зшшь о последних результатах, полученных нами в этой области и опущу промежуточные стадии исследований. Основную роль в этих экспериментах сыграл Г.С.Л.Эпплтенер (G.S.L.Appletaner), ранее работавший в университете Уругвая.

Итак, мы попытались более подробно исследовать эти трофические явления по следующим причинам:

1) в наших первых авторентгеновских опытах мы использовали аминокислоты, помеченные углеродом (14). Мы могли, следовательно, предположить, что, по меньшей мере, некоторые из радиоактивных частиц, обнаруженных позднее в мышечных клетках, будут иметь протеиновую природу,

2. аксоно-плазмическая транспортировка протеинов хорошо известна уже давно, она является темой многих докладов.

3. огромное разнообразие протеинов делает возможной очень высокую специфичность, которая характеризует трофические процессы.

В ходе второй волны экспериментов мы сделали инъекцию лейцина, помеченного тритием (НЗ) в подъязычный нерв всех подопытных кроликов. Доза (80 микрокюри) сначала была абсорбирована бумагой-фильтром, которую затем разрезали так, чтобы она покрывала ядро подъязычного нерва; затем эту бумагу оставляли на дне 4-ого желудочка на 15 минут, после чего убирали и закрывали рану. Затем кроликов умерщвляли на различных стадиях после операции; ткани, интересующие нас, срезались для оценки содержания в них радиоактивных протеинов. (Хирургические подробности и методы отделения клеточных протеинов от остальной клетки уже являлись предметом научного доклада).

Несмотря на то, что мы исследовали срезы подъязычного нерва, продолговатого мозга и других тканей, для краткости я расскажу лишь о

191

полученных нами результатах на шило-язычной мышце, расположенной на отмеченной стороне (слева). Некоторая утечка лейцина с тритием в кровеносные сосуды была неизбежна, и нам пришлось оценить ее количество, определив у каждого животного процентное соотношение лейцина с тритием, дошедшего до языка через кровь. Ранее мы продемонстрировали на кроликах, у которых лейцин с тритием был введен в брюшную полость, что одинаковое количество его кровяного происхождения входило в шило-подъязычные мышцы (иннервирующиеся VII-ой парой) и в подбородочно-подъязычные мышцы (иннервирующиеся V-ой парой) и в мышцы языка. Поэтому мы воспользовались этими мышцами как свидетелями. Эти мышцы были удалены у каждого убитого животного, их радиоактивность была оценена и дала нам количество радиоактивности на миллиграмм ткани, вследствие утечки лейцина с тритием в кровь при маркировке подъязычного нерва. Нам оставалось только вычесть значение этой радиоактивности из значения радиоактивности мышц языка, что дало нам реальное количество радиоактивности, принесенное подъязычным нервом к мышцамязыка.

После того, как мы удостоверились в правильности наших методов введения лейцина с тритием в нейроны подъязычного нерва, методов отделения протеинов и, в конечном итоге, методов количественного определения переданной радиоактивности, то мы перешли непосредственно к опыту. Мы провели три опыта за каждый день, который отделял операцию от снятия "гистологических образцов (интервал в зависимости от маркировки), и смогли подтвердить результаты наших авторентгенографических исследований: действительно, определялась волна прохождения радиоактивных протеинов в мышечные клетки на 8-15 день после инъекции меченых аминокислот в нейроны подъязычного нерва.

192