Контрольні питання

1. Основні правила роботи і техніки безпеки в мікробіологічній лабораторії;

2. Механічні частини світового мікроскопу;

3. Оптичні частини світового мікроскопу;

4. Як підготувати мікроскоп до роботи;

5. Принцип роботи електронного мікроскопа;

6. Устрій люмінісцетного мікроскопа;

7. Одиниці вимірювання розмірів бактерій, дріжджів рикетсій мікоплазм та вірусів;

8. Визначення збільшуйочої здатності світового мікроскопа;

9. Хід світових променів у сухому та імерсійному об'єктивах;

10. Які фізичні властивості скла, повітря і імерсійної олії враховуються при мікроскопії з імерсійною системою;

11. Техніка мікроскопії бактерійних препаратів з імерсійною системою;

12. Основні форми бактерій ( кулеподібні, палицевидні, звивисті);

13. Що дає імерсійна система при мікроскопії)

14. Хто вперше виготовив мікроскоп?;

15. Вклад в розвиток ґрунтової мікробіології в Росії С.Н. Виноградського, В.Л. Омелянського С.П. Костичева, В.С. Буткевича;

16. Значення мікробіології у природі та сільському господарстві;

Заняття № 2

ТЕМА: Виготовлення мікробіологічних препаратів (мазків) і фарбування їх простим засобом.

МЕТА ЗАНЯТТЯ:

1. Ознайомити студентів з фарбуючими розчинами, які використовуються для фарбування мазків простим засобом.

2. Засвоїти техніку виготовлення бактерійних препаратів-мазків та фарбування їх простим способом.

ЗМІСТ ЗАНЯТТЯ

Викладач проводить опитування студентів по минулому та наступному матеріалу, знайомить з правилами використання фарбуючих розчинів, показує техніку виготовлення препаратів-мазків з чистої культури; а також з зубного нальоту, демонструє техніку фарбування їх простим засобам.

'

САМОСТІЙНА РОБОТА СТУДЕНТІВ

Кожен студент самостійно: готує препарати з чистої культури бактерій і зубного нальоту; фарбує їх простим засобом; мікроскопує та робить малюнки у зошиті.

ОСНАЩЕННЯ ЗАНЯТТЯ

Забезпечити кожного студента:

- мікроскопом, предметним склом, бактеріологічною петлею, пальником, імерсійною олією, фільтрованим папером, практикумом та методичними вказівками по мікробіології; Забезпечити кожні 2-3 студента-культурою мікроорганізмів, склянкою з дезрозчином для використаних н препаратів, фарбуючи ми розчинами (метиленова синь, карболовий фуксині), олівцем по склу, ванночкою з місточком, пастерівськими піпетками; водою для промивання.

МЕТОДИКА ВИКОНАННЯ ЗАВДАННЯ

Виготовлення препарату-мазка.

Бактерійний препарат-мазок готують на чистому знежиреному предметному склі. Знежирення здійснюється наступними засобами:

а) в розчині спирт-ефір 1:1

б) над полум'ям пальника (проводячи над полум'ям поверхню скла);

в) протиранням скла серветкою обробленою господарським милом. Для рівномірного розподілу культури мікроорганізмів взятих з щільного поживного середовища, використовують краплину дистильованої води або фізрозчину.

Культуру мікробів розмазують бактеріологічною петлею-по склу рівномірним тонким шаром на площі 1-2см².^!При відборі культур з рідкого середовища використовують пастерівську піпетку або бактеріологічну петлю.

Відбір всього матеріалу для дослідження проводять над полум'ям пальника, бактеріологічну петлю до і після використання - пропалюють. Потім препарат висушують на повітрі при кімнатній температурі.

Наступний етап - фіксування, який виконується фізичним або хімічним методом. Хімічний метод заснований на здатності деяких речовин віднімати воду (гідрофільні властивості)— спирти, ацетон, ефіри або їх суміші. Фізичний метод - термічна обробка препарату при Т-60С, який використовується шляхом прогрівання зворотної сторони препарату (проводять 3-5 разів над полум'ям пальника). Контроль за температурою здійснюється шляхом доторкування предметного скла до тильної сторони долоні.

Фіксування препарату переслідує мету:

- Закріпити мікроби на склі.

- Вбити бактерії для запобігання зараження і забруднення мікрофлорою оточуючого середовища.

- Розруйнувати оболонку клітини для кращого проникнення фарбуючого розчину.

Фарбування. Розрізняють прості, складні і спеціальні засоби фарбування мікроорганізмів.

Просте фарбування дозволяє побачити форму і розмір бактерій, взаємне розміщення, дати родову назву чистої культури мікробних клітин. При простому засобі фарбування використовується одна фарба: карболовий фуксин (експозиція 1-2 хвилини) або метиленова синь (експозиція3-4хвилини).

Після закінчення зазначеного терміну фарбу змивають, препарат висушують фільтрованим папером і мікроскопують. Роблять малюнки у зошиті.