Практическая работа

З а д а н и е №1

Микроскопировать с объективом 90 и иммерсией фиксированные препараты, приготовленные из суточных культур Escheriсhia coli, Micrococcus luteus и смеси двух бактерий Bacillus cereus и Escheriсhia coli, окрашенные по Граму. При микроскопии определить форму бактерий и отношение их к окраске по Граму (тинкториальные свойства). Препараты зарисовать.

З а д а н и е №2

Приготовить постоянный препарат из суточной культуры бактерий на плотной питательной среде, окрасить по Граму и микроскопировать с объективом 90 и иммерсией. При микроскопии определить форму бактерий и отношение их к окраске по Граму. Препарат зарисовать. Заполнить таблицу.

Ингредиенты окраски по Граму	Назначение основных ингредиентов	Рисунок

М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я

Окраска по Граму

1. Приготовить тонкий и равномерный мазок, без скоплений клеток в определенном участке.

2. Высушить мазок на воздухе.

3. Зафиксировать жаром.

4. Окрасить мазок 1%-ным карболовым раствором генцианового фиолетового, красить 1-2 мин.

5. Слить краситель (не в коем случае не промывать водой).

6. Обработать мазок раствором Люголя 1-2 мин.

7. Обильно промыть препарат водой.

8. Погрузить мазок в раствор 95%-ного этанола на 60 с, препарат слегка покачивать для равномерного отхождения фиолетовых струек краски.

9. Промыть препарат водой.

10. Окрасить препарат дополнительно фуксином.

11. Высушить препарат на воздухе.

З а д а н и е №3

Микроскопировать с объективом 90 и иммерсией фиксированный препарат, приготовленный из мокроты больного туберкулезом (окраска по Цилю-Нильсену). При микроскопии определить наличие в препарате и форму кислотоустойчивых бактерий среди элементов мокроты (лейкоциты, слизь, некислотоустойчивые бактерии). Препарат зарисовать. Внести в протокол методику окраски по Цилю-Нильсену. Заполнить таблицу.

Ингредиенты окраски по Цилю-Нильсену	Назначение основных ингредиентов	Рисунок

М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я

Окраска по Цилю-Нильсену

1. Приготовить тонкий и равномерный мазок, без скоплений клеток в определенном участке.

2. Высушить мазок на воздухе.

3. Зафиксировать жаром.

4. Окрасить мазок карболовым фуксином Циля с подогреванием до появления паров, но не доводя краситель до кипения, красить 3-5 мин.

5. Слить краситель и промывать препарат водой.

6. Погрузить препарат на 3-5 с в 5%-ный раствор серной кислоты для обесцвечивания.

7. Обильно промыть препарат водой.

8. Докрасить препарат метиленовым синим Леффлера в течение 3-5 мин.

9. Высушить препарат на воздухе.

З а д а н и е №4

Изучить морфологию плесневых грибов родов Mucor, Aspergillus и Penicillium. Для этого микроскопировать с объективом 40 препараты «раздавленная капля», приготовленные из мицелия этих грибов. Все препараты зарисовать, на рисунках обозначить:

1. Тип плесени (леечная, головчатая, кистевая); 2. Тип мицелия (септированный /несептированный); 3. Конидиеносец;

4. Везикул; 5. Конидии; 6. Фиалиды.

З а д а н и е №5

Изучить морфологию дрожжей Saccharomyces cerevisiae и дрожжеподобного гриба рода Candida. Для этого микроскопировать с объективом 90 и иммерсией фиксированные препараты, приготовленные из этих микроорганизмов (окраска метиленовым синим). Препараты зарисовать, на рисунках обозначить:

1. Дрожжевые клетки

2. Псевдомицелий

3. Ростовые трубки

занятие №3

Строение бактериальной клетки

Методы выявления различных структур бактерий

Вопросы для подготовки

1. Сравнительная характеристика строения прокариотической и эукариотической клетки.

2. Прокариотическая клетка как система. Химический состав одноклеточных организмов.

3. Цитоплазма прокариот. Строение, химический состав и функции.

4. Цитоплазматическая мембрана. Строение, химический состав и функции.

5. Цитоплазматические структуры (нуклеоид, рибосомы, мезосомы и др.). Строение, химический состав и функции. Методы выявления.

6. Жгутики и ворсинки (пили и фимбрии). Строение и основные функции. Подвижность бактерий. Классификация бактерий в зависимости от расположения жгутиков. Примеры. Методы выявления.

7. Строение спирохет, особенности подвижности, методы изучения морфологии.

8. Слизи и капсулы. Химический состав и функции. Виды капсул. Примеры. Техника и механизм окраски по Бурри-Гинсу.

9. Эндоспоры. Индукция спорообразования, стадии. Классификация бактерий в зависимости от расположения спор. Примеры. Техника и механизм окраски по Ожешко и Пешкову.

10. Внутрицитоплазматические включения бактерий (жироподобные вещества, нейтральные жиры, полифосфаты и др.). Химический состав и функции. Методы выявления.

11. Заполнить таблицу «Структура бактериальной клетки»:

Органоид	Функция	Метод выявления
Обязательные органоиды
Клеточная стенка
Цитоплазматическая мембрана
Нуклеоид
Рибосомы
Мезосомы
Необязательные органоиды
Пили
Жгутики
Капсула
Спора
Плазмиды
Включения