Правила работы с культурами микроорганизмов
Все склянки с культурами микроорганизмов должны быть четко подписаны, указывают род, вид микроорганизма, дату и время посева.
Перед тем как открыть склянку с культурой микроорганизма, обязательно обжигают (фламбируют) ее края в пламени спиртовки.
Посевы микроорганизмов I и II групп патогенности, а также биоматериала с подозрением на инфицирование указанными группами микроорганизмов производят, как и все работы с кровью в ламинарном боксе II класса защиты.
При пересеве микроорганизмов с жидкой питательной среды на твердую или жидкую, культуральную жидкость набирают стерильной пипеткой, используя резиновую грушу.
Все операции с предметными стеклами выполняются пинцетом, или при необходимости зажимаются покроям между большим и указательным пальцем.
Клетки микроорганизмов для посева следует брать бактериологической петлей или иглой.
Все манипуляции с чистыми культурами микроорганизмов следует проводить около пламени горелки (стерильная зона), а не в пламени по возможности быстро, но без спешки.
Бактериологическую петлю и иглу следует всегда держать как карандаш.
До и после использования петлю необходимо обжигать в пламени спиртовки, сначала на участке проволоки примыкающей к петледержателю, чтобы подсохла микробная масса, после чего петлю в вертикальном положении медленно прокаливают докрасна. Помните, что при быстром прогреве всей петли происходит разбрызгивание микробных клеток, загрязняющих воздух!
Использованные на занятии культуры микроорганизмов обязательно сдаются преподавателю или лаборанту.
Все патогенные культуры микроорганизмов необходимо регистрировать в специальном журнале.
Схема устройства светового биологического микроскопа
|
1 – окуляр 2 – монокулярная насадка (тубус) 3 – револьверное устройство 4 – объектив 5 – предметный столик 6 – конденсор 7 – корпус коллекторной линзы 8 – патрон с лампой 9 – шарнир 10 – рукоятка перемещения кронштейна конденсора 11 – рукоятка тонкой фокусировки (микрометрический винт) 12 – рукоятка грубой фокусировки (макрометрический винт) 13 – тубусодержатель 14 – винт для крепления насадки |
занятие №1
микробиологическая лаборатория. Морфология бактерий
Техника безопасности. Микроскопический метод исследования.
Простые методы окраски
Вопросы для подготовки
1. Инструктаж по технике безопасности работы в микробиологической лаборатории.
2. Оптическая микроскопия: полезное увеличение, разрешающая способность микроскопа. Устройство светового микроскопа.
3. Подготовка микроскопа к работе в светлом поле. Техника микроскопирования с иммерсионной системой. Уход за микроскопом.
4. Методы микроскопии, используемые в микробиологии. Принципы темнопольной, фазово-контрастной, флуоресцентной и электронной микроскопии. Достоинства и недостатки.
5. Приготовление препаратов живых и фиксированных клеток микроорганизмов для светлопольной микроскопии. Простые методы окраски, цели их использования.
6. Основные морфологические группы микроорганизмов – кокки, палочки и извитые формы.
7. Подходы к классификации микроорганизмов. Классификационные категории (царство, отдел, класс, порядок, семейство, род, вид). Бинарная номенклатура.
8. Классификация бактерий по Берджи (1995 г).
9. Составить и заполнить таблицу «Микроскопические методы исследования»:
Вид микроскопии |
Принцип |
Разрешающая способность |
Применение |
Иммерсионная |
|
|
|
Темнопольная |
|
|
|
Фазово-контрастная |
|
|
|
Люминесцентная (флуоресцентная) |
|
|
|
Электронная |
|
|
|
10. Составить и заполнить таблицу «Основные таксономические группы микроорганизмов, имеющих медицинское значение»:
Определение |
Пример |
Царство Эукариота – |
|
Простейшие – |
|
Грибы – |
|
Царство Прокариота – |
|
Бактерии – |
|
Микоплазмы – |
|
Риккетсии – |
|
Хламидии – |
|
Спирохеты – |
|
Актиномицеты – |
|
Царство Вира – |
|