Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
ОБЩАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ МЕТОДИЧКА.doc
Скачиваний:
50
Добавлен:
15.08.2019
Размер:
4.18 Mб
Скачать

Результат микробиологического исследования №____

« » «___________»20___ г.

(дата взятия биоматериала)

Ф. И. О ___________ Возраст _____

Отделение ________________________________________

При исследовании: ___________________________________________________

(указать материал и результат)

АнтибиОтикоГрамма

Ристомицин

R I S

Канамицин

R I S

Гентамицин

R I S

Бензилпенициллин

R I S

Доксициклин

R I S

Ампициллин

R I S

Эритромицин

R I S

Карбенициллин

R I S

Линкомицин

R I S

Ципрофлоксацин

R I S

Левомицетин

R I S

Оксациллин

R I S

Рифампицин

R I S

Цефалекцин

R I S

Фузидин

R I S

Олеандомицин

R I S

Условные обозначения: R – культура устойчива; I – умеренно устойчива; S – чувствительна

« » «___________»20___ г. Подпись______________ /___________/

(дата выдачи результата)

М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я

На поверхность плотной питательной среды засевают газоном исследуемую культуру. Накладывают диски из фильтровальной бумаги, пропитанные антибиотиками, на расстоянии не менее 2-х см друг от друга (не более 6-ти дисков на чашку). После инкубации посевов в течение суток учитывают чувствительность культуры к антибиотикам по диаметрам зон отсутствия роста вокруг дисков.

Для измерения диаметра зон задержки роста чашки помещают кверху дном на темную матовую поверхность так, чтобы свет настольной лампы падал под углом 45°. Диаметр зон задержки роста с учетом диаметра самого диска измеряют с точностью до 1 мм с помощью линейки или штангенциркуля. Интерпретация результатов ведется по табличным данным предприятия-изготовителя дисков.

З а д а н и е №5

В целях назначения больному рациональной схемы лечения пенициллином необходимо определить минимальную бактериостатическую (подавляющую) концентрацию (МПК) и минимальную бактерицидную концентрацию (МБК) препарата по отношению к возбудителю – золотистому стафилококку. Учесть готовые результаты. Сделать вывод. Оформить протокол. Ответить на вопросы:

1. Почему МБК выше, чем МПК?

2. Может ли быть наоборот? Почему?

3. С какой целью поставлены контроли?

Материал

Концентрация антибиотика в МПБ, ед/мл

Результат (МПК, МБК)

128

64

32

16

8

4

2

1

К

Наличие роста микроба в МПБ

Наличие роста микроба при высеве на МПА

«+» – рост бактерий, «–» – отсутствие роста

М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я

В пробирки с 1 мл МПБ добавляют исследуемый антибиотик в различных концентрациях: от 1 до 128 ед/мл. Все пробирки засевают 1 мл бульонной культуры стафилококка. Посевы инкубируют в термостате при 37° в течение 24 ч. Учитывают результаты определения МПК.

МПК – это наименьшая концентрация антибиотика, при которой не происходит размножение бактерий и содержимое пробирки остается прозрачным.

Для определения МБК из пробирок с отсутствием видимого роста и из пробирки с минимальной концентрацией антибиотика, где есть рост (контроль) делают высев секторами в чашки Петри с МПА. На секторах обозначают концентрацию антибиотика, из которой сделан высев. Посевы ставят в термостат при 37°С на 18-24 ч. Учитывают результаты определения МБК по отсутствию роста бактерий на агаре в соответствующих секторах.

З а д а н и е №6

У двух госпитализированных членов семьи по клиническим признакам и данным анамнеза врач заподозрил холеру. Взятый у больных исследуемый материал (испражнения) направлен в лабораторию ООИ областного ЦГСЭН. Для экспресс-анализа чувствительности возбудителя к антибиотикам был использован метод Роджерса. Используя готовые демонстрации учесть результаты, оформить протокол. Сделать вывод.

Ответить на вопросы:

1. Какие достоинства и недостатки имеет экспресс-метод Роджерса?

2. С какой целью и как поставлены контроли?

Антибиотик

1

2

3

4

5

Результат

«+» – синее окрашивание в лунке (микроб чувствителен к антибиотику)

«–» – отсутствие окрашивания (микроб резистентен к антибиотику)

М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я

Метод Роджерса основан на качественной реакции на нитрит-ионы. Патологический материал от больного, содержащий возбудителя, выдерживается 1-2 ч в МПБ с добавлением нитрата калия (0,1%), затем бульон разливается в лунки планшета, в каждую из которых кладут диски с антибиотиками. При росте микробов образуется нитратредуктаза, которая восстанавливает нитрат-ион в нитрит-ион. В лунки последовательно добавляют 5%-ный раствор иодида калия, 5%-ный раствор серной кислоты и 1%-ный раствор крахмала по 0,1 мл каждого компонента. При этом нитраты в присутствии серной кислоты выделяют из иодида калия иод, который, взаимодействуя с крахмалом, дает синее окрашивание:

2КNO3 + 2KI + 2H2SO4 → I2 + 2K2SO4 + 2NO2 + 2H2O,

крахмал + I2 → крахмал-I2 (синее окрашивание).