Практическая работа

З а д а н и е №1

Изучить микробиоту кожи. Рассмотреть посевы с кожи пальцев рук студентов на МПА, сравнить выросшие колонии, сделать мазки, окрасить их по Граму, микроскопировать, результаты занести в таблицу. Сделать вывод.

№ колонии	Описание колонии	Рисунок (микропрепарат)	Предполагаемый микроорганизм	Индигенная/транзиторная микробиота

З а д а н и е №2

Изучить микробиоту зубного налета: взять зубной налет шейки зуба с помощью стерильной зубочистки, сделать мазок и окрасить по Граму, микроскопировать, зарисовать. Выявить характерных представителей микробиоты зубного налета, обозначить на рисунке.

З а д а н и е №3

Изучить микробиоту урогенитального тракта мужчины и женщины. Микроскопировать препараты из влагалищного секрета и слизистой полового члена, окрашенные по Граму, зарисовать. Выявить характерных представителей микробиоты урогенитального тракта, обозначить на рисунках.

З а д а н и е №4

В бактериологическую лабораторию доставили материал (фекалии) от больного Р., 13 лет для исследования на дисбактериоз. Используя готовые демонстрации провести микробиологическое исследование кала на дисбактериоз. Оформить протокол. Сделать вывод.

Результаты исследования фекалий на дисбактериоз

ФИО _________________ Возраст _______________

Микроорганизмы	Количество микроорганизмов в г фекалий, КОЕ/г
	Норма (взрослые)	Норма (дети 1,5-2 лет)	У обследуемого
Патогенные энтеробактерии	нет	нет
Общее количество энтеробактерий	107-108	107-108
Эшерихии с нормальной ферментативной активностью	107-108	107-108
Эшерихии с пониженной ферментативной активностью	106-107	<106
Эшерихии лактозонегативные	105-106	<102
Гемолизирующие эшерихии	нет	нет
Протеи (общее количество)	<103	<103
Другие условно-патогенные энтеробактерии	<102	<102
Энтерококк	107-108	106-107
Стафилококки (общее количество)	104-105	104-105
Гемолизирующие стафилококки	нет	нет
Бифидобактерии	109-1010	1010-1011
Лактобациллы	107-108	106-107
Дрожжеподобные грибы	<104	<102
Клостридии	нет	нет

Заключение ____________________________ Степень ________

М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я

Для постановки опыта из 1,0 г фекалий делают последовательные 10-кратные разведения в физиологическом растворе (10^-1, 10^-2, 10^-3 и т.д.) и засевают по 0,1 мл разведения на чашки Петри с элективными средами, предназначенными для роста определенных представителей микробиоты. Посевы инкубируют при 37°С в течение 2-3 суток. Далее изучают посевы.

1. Подсчитывают число выросших колоний на чашках Петри.

Бифидобактерии – среда Блаурока;

Лактобациллы – среда МРС;

Бактероиды – среда КАБ;

Клостридии – клостридиальный агар;

Энтеробактерии (эшерихии, клебсиеллы и другие) – среда Эндо

Стафилококки – стафилококковый агар;

Грибы кандида – среда Сабуро.

2. Определяют количество микробов в 1,0 г фекалий по формуле:

N = m10⁽ⁿ⁺¹⁾,

где N – общее количество микробов в 1,0 г фекалий, m – количество колоний, выросших на чашке, n – величина разведения.

З а д а н и е №5

Классифицировать набор предложенных биопрепаратов для коррекции нормальной микробиоты. Результаты представить в виде схемы.

Название (Н):

Классификационное положение (КП):

Действующее начало (ДН):

Получение (П):

Применение (Пр):

Способ применения (СП):

З а д а н и е №6

Больной М., 16 лет страдает хроническим ринитом. При проведении бактериологического исследования возникло подозрение на смешанную инфекцию, вызванную Staphylococcus aureus и S. saprophyticus. Для доказательства этиологической роли микробной ассоциации было решено изучить влияние ассоциантов на биологические свойства друг друга. Используя готовые демонстрационные посевы учесть результаты. Оформить протокол в виде рисунка. Сделать заключение. Ответить на вопросы:

1. Какой материал использовали для бактериологического исследования?

2. Почему возникло подозрение на смешанную инфекцию?

2. Какая форма симбиоза наблюдается в данном случае?

3. Какая форма инфекции у больного?

4. Какова этиология хронического ринита и почему?

М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я

Делается перекрестный посев чистых культур выделенных стафилококков на кровяной агар для выявления гемолитической активности и желточно-солевой агар для выявления лецитиназной активности. Посевы ставят в термостат на сутки при 37°С.

Результаты учитывают по появлению соответствующих активностей – зона гемолиза на кровяном агаре и «радужный венчик» на желточно-солевом агаре, измеряют зоны действия факторов с помощью линейки: а) в контролях (посев монокультур стафилококков) по середине действия фактора; б) в опыте (посев ассоциации стафилококков) на расстоянии 2 мм от места перекреста исследуемых культур.