Практическая работа

З а д а н и е №1

Изучить методы культивирования анаэробов. Результаты оформить в виде таблицы.

Метод, среда	Условия создания анаэробиоза	Рисунок
Методы
Физический
Химический
Биологический		–
Специальные среды
Китта-Тароцци
Вильсона-Блер
СКС (среда для контроля стерильности)

З а д а н и е №2

В бактериологическую лабораторию поступил исследуемый материал (испражнения) от больного с предварительным диагнозом: «Пищевая токсикоинфекция?» При микроскопии материала обнаружены грамположительные кокки и грамотрицательные палочки. Выделить чистые культуры микроорганизмов, провести их идентификацию. Сделать заключение об этиологии пищевой токсикоинфекции. Оформить протокол бактериологического исследования по дням.

День исследования		Метод и его содержание	Полученные результаты	Вывод
1	Цель	1. Приготовление фиксированного препарата – мазка из испражнений. 2. Фиксация жаром. 3. Окраска по Граму. 4. Иммерсионная микроскопия (90×). Посев исследуемого материала на чашку Петри с МПА по Дригальскому	Рисунок	Обнаружены грам+ кокки и грам- палочки
	Обнаружение предполагаемого возбудителя в исследуемой культуре и его идентификация по морфологическим и тинкториальным свойствам
2	...	...	...	...

М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я

1-й день исследования: Приготовление фиксированного препарата из испражнений, окраска по Граму. Посев исследуемого материала на МПА в чашку Петри по способу Дригальского.

2-й день исследования: Изучение культуральных свойств выросших колоний. Дифференцируют разные типы колоний (см. предыдущее занятие). Проводят расчет показателя микробной обсемененности на 1 г фекалий (ПМО). ПМО (КОЕ/г) = m10ⁿ⁺¹, где m – количество колоний, выросших на чашке, n – величина разведения.

Из материала части колоний готовят мазок, окрашивают по Граму и микроскопируют. Остаток колоний отсевают петлей в пробирку на скошенный МПА для получения чистой культуры. Посевы ставят в термостат при 37°С на 12-18 ч.

3-й день исследования: Проверяют чистоту выделенных культур бактерий по изучению характера роста бактерий на скошенном агаре (см. предыдущее занятие) и микроскопии мазков из этих культур (окраска по Граму). Делают высев чистой культуры с агара на биохимические панели идентификации, среды Гисса и в МПБ с целью изучения сахаролитических и протеолитических свойств бактерий. Посевы ставят в термостат при 37°С на 12-18 ч.

4-й день исследования: Оценивают результаты биохимической активности по изменению цвета в лунках биохимической панели, сред Гисса и СИБ-полосок. На средах Гисса с углеводами отметить наличие кислых продуктов расщепления углеводов и газообразование. На МПБ обратить внимание на характер роста, отметить наличие продуктов гидролиза белков (сероводорода и индола).

По результатам изучения свойств выделенных чистых культур определяют виды микроорганизмов. Используют определитель Берджи.

Выдают окончательный ответ: из испражнений больного выделили _________________.